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基于网络药理学及分子对接探究茵陈蒿汤治疗自身免疫性肝炎的作用机制程新红1，王浩嘉1,2，王 勇1，雒 扬1,2，李 汛1,21 兰州大学 第一临床医学院，甘肃 兰州 730000；2 兰州大学第一医院 甘肃省生物治疗与再生医学重点实验室，甘肃 兰州 730000收稿日期：2023-05-05基金项目：国家自然科学基金资助项目（81960293）；甘肃省自然科学基金资助项目（20JR5RA368）；兰州市城关区科技计划资助项目（2020XG47）；中央高校基本科研业务费资助项目（lzujbky-2020-sp26）；兰州大学（第26届）“政基金”资助项目（LZU-JZH2634）作者简介：李 汛，男，主任医师，教授，博士研究生导师，博士，研究方向为外科学，e-mail：，通信作者摘要：目的目的 通过网络药理学的方法，探讨使用茵陈蒿汤治疗自身免疫性肝炎可能发挥作用的关键成分以及分子机制，并通过分子对接验证结果的可靠性。方法方法 使用TCMSP数据库筛选茵陈蒿汤有效化学成分和作用靶点，使用OMIN、DRUGBANK、Genecards和 DisgenNET数据库获得自身免疫性肝炎靶点。将获得的药物与疾病靶点标准化后，使用VENNY 2.1线上工具获取交集靶点，通过Cytoscape 3.7.1软件，构建茵陈蒿汤治疗自身免疫性肝炎有效成分靶点网络。将靶点的交集导入String，构建蛋白质相互作用网络。借助Metascape数据库对靶点进行京都基因和基因组数据库、基因本体细胞成分、基因本体分子功能和基因本体生物过程富集分析。使用Autodock Vina软件对关键化学成分和核心靶点进行分子对接。结果结果 筛选得到茵陈蒿汤有效成分29个，其治疗自身免疫性肝炎的核心靶点分别是：白细胞介素-6、P53蛋白、肿瘤坏死因子、蛋白激酶B 亚型和白细胞介素-1。结论结论 茵陈蒿汤可能通过槲皮素、山柰酚等成分作用于白细胞介素-6、P53蛋白、肿瘤坏死因子、蛋白激酶B 亚型和白细胞介素-1靶点，进而影响肿瘤相关信号通路、核因子B信号通路、活性氧信号通路和趋化因子信号通路等多种相关信号通路治疗自身免疫性肝炎，该研究为深入研究茵陈蒿汤治疗自身免疫性肝炎的机制提供理论依据。关键词：茵陈蒿汤；自身免疫性肝炎；网络药理学；分子对接中图分类号：R575.1文献标识码：Adoi：10.13885/j.issn.1000-2812.2023.08.002Mechanism of Yinchenhao decoction in treating autoimmunehepatitis based on network pharmacology andmolecular dockingCheng Xinhong1,Wang Haojia1,2,Wang Yong1,Luo Yang1,2,Li Xun1,21 The First Clinical Medical School,Lanzhou University,Lanzhou 730000,China;2 Key Laboratory of Biotherapyand Regenerative Medicine of Gansu Province,The First Hospital of Lanzhou University,Lanzhou 730000,ChinaAbstract：Objects To investigate the possible key components and molecular mechanisms of Yinchenhao decoction in the treatment of autoimmune hepatitis through a network pharmacology approach,and to verify the reliability of the results through molecular docking.Methods The TCMSP database was used to screen the effective chemical components and targets of action of Yinchenhao decoction,and the OMIN,DRUG-BANK,Genecards,and DisgenNET databases were used to obtain autoimmune hepatitis targets.After stan-dardizing the acquired drug and disease targets,intersecting targets were obtained using the VENNY 2.1 online tool.Afterward,the Cytoscape 3.7.1 software was used to construct an ingredient-Target network 文章编号：1000-2812(2023)08-0006-10第49卷 第8期2023年8月兰州大学学报（医 学 版）Journal of Lanzhou University（Medical Sciences）Vol.49 No.8Aug.2023自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH）是一种累及肝实质的慢性自身免疫性疾病，病理学主要以门静脉和小叶毗邻处的交界性肝炎，以及肝组织玫瑰花结样改变为特征，并且伴有转氨酶升高和自身抗体阳性1。AIH可根据自身抗体分为 1 型和 2 型2，二者均常见于青年女性，其中80%的病例为1型，目前亚太地区发病率呈上升趋势3。近年来，随着对 AIH研究逐渐增多和相关检验、检查手段的日趋成熟，AIH的确诊数量呈增加趋势。AIH的病因不明确且复杂，研究4认为AIH是由遗传易感性、环境触发因素和天然免疫系统衰竭共同作用导致，尽管具体机制尚不明确，但免疫受损已经被证实是导致AIH发生的重要因素5。AIH的临床症状可有多种表现，且缺乏特异性，轻症时可能无明显症状，重症时可出现急性、慢性肝衰竭6，因而临床诊断较为困难，须排除其他病因导致的肝病才可确诊。目前对AIH的治疗目标仍以实现疾病缓解和控制症状为主，皮质类固醇与硫唑嘌呤的长期维持是最常见的手段7，但对于重症 AIH的患者而言，激素和免疫抑制剂治疗带来的益处有限6，且长期服用导致的副作用也使得患者的依从性不理想。中医整体观和辨证论治的思想在肝病治疗中有着独特的优势，传统中药治疗 AIH效果较好，且副作用较小，这也为临床治疗AIH提供了新的可能8。茵陈蒿汤出自张仲景著作伤寒论，包括栀子、大黄和茵陈三味中药，具有退黄解湿的功效，自唐宋以来便广泛用于治疗黄疸患者9。研究10汇总分析了中医药治疗AIH的医案，结果显示茵陈蒿汤是临床使用频率最高的方剂，这也说明茵陈蒿汤对AIH的治疗效果较好并得到了临床认可。中医方剂普遍由多种成分组成，并具有多靶点及协同作用的特点，目前茵陈蒿汤治疗AIH的有效成分及作用机制尚不明确。网络药理学的关键理论与中医治疗的思想有很多共同点11，该方法有助于我们从系统的角度和分子水平上探究中医药多靶点与多疾病的关系。本研究旨在通过网络药理学的方法，探究茵陈蒿汤在治疗AIH过程中可能的关键成分以及分子机制，并通过分子对接验证结果的可靠性。1方法方法1.1 茵陈蒿汤有效成分及靶点获取在TCMSP数据库（https:/old.tcmsp- 30%、药物相似度 0.18作为条件筛选，获得茵陈蒿汤的有效化学成分。利用数据库中“Related Targets”功能获取有效成分的对应靶点。下载Uniprot数据库（https:/www.uniprot.org/）中智人物种的基因及蛋白信息，使用 Excel 中 VLOOKUP 函数，将靶点名称标准化为基因名称。1.2 中药化合物靶点网络构建将茵陈蒿汤方剂所包含中药的有效化学成分，以及各成分所对应的靶点导入 Cytoscape 3.7.1软件，绘制中药化合物靶点网络。利用 Cyto-diagram for the treatment of autoimmune hepatitis with Yinchenhao decoction.The intersections of the targets were imported into the String to construct the protein-protein interaction network.We performed an enrich-ment analysis of targets based on Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,gene ontology-cellular compo-nent,gene ontology-molecular function and gene ontology-biological process by using the Metascape data-base,and the molecular docking of key chemical components and core targets were performed by Autodock Vina software.Results A total of 29 effective components of Yinchenhao decoction were obtained,and the core targets of the autoimmune hepatitis treatment were interleukin-6,P53 protein,tumor necrosis factor,protein kinase B and interleukin-1.Conclusion In the treatment of autoimmune hepatitis with Yinchenhao decoction,two active components quercetin and kaempferol could regulate cancer-related signaling pathways,nuclear factor-B signaling pathway,reactive oxygen signaling pathway and chemokine signaling pathway by acting targets such as interleukin-6,P53 protein,tumor necrosis factor,protein kinase B and interleukin-1.This study provides a theoretical basis for research on the mechanism of Yinchenhao decoction in treating autoimmune hepatitis.Keywords:Yinchenhao decoction;autoimmune hepatitis;network pharmacology;molecular docking第8期程新红，等：基于网络药理学及分子对接探究茵陈蒿汤治疗自身免疫性肝炎的作用机制7scape中的“Network Analysis”功能计算每个节点的计数值，并通过节点大小体现。1.3 AIH靶点筛选以“Autoimmune hepatitis”为关键词，在OMIN（https:/omim.org/）、DRUGBANK（https:/ 茵陈蒿汤AIH交集靶点筛选及有效成分靶点网络构建茵陈蒿汤和AIH的靶点标准化为基因名称后，使用 VENNY 2.1 线上工具（https:/b.csic.es/tools/venny/）获得药物与疾病的交集靶点。下载交集所得的共同靶点信息，导入 Cytoscape 3.7.1软件，构建茵陈蒿汤治疗AIH的有效成分靶点网络图。1.5 茵陈蒿汤AIH交集靶点蛋白质相互作用网络构建将茵陈蒿汤与 AIH的交集靶点导入 STRING数据库（https:/cn.string-db.org/），再使用“Multiple Proteins”功能绘制交集靶点蛋白质相互作用网络，得到蛋白质蛋白质相互作用数据。下载蛋白质相互作用网络并将其导入 Cytoscape 3.7.1 软件，计算各节点计数值，筛选茵陈蒿汤治疗AIH的关键靶点。1.6 京都基因和基因组数据库（Kyoto Encyclope-dia of Genes and Genomes，KEGG）和基因本体（gene ontology，GO）富集分析利用Metascape数据库（http:/metascape.org/）进行富集分析。导入茵陈蒿汤与AIH的交集靶点至 Metascape 数据库，选择智人物种，分别使用KEGG、GO细胞成分、GO 分子功能和GO 生物过程富集分析。使用线上生物信息工具绘制气泡图，对富集分析结果进行可视化处理，并分析茵陈蒿汤治疗AIH的潜在机制。1.7 关键化学成分关键靶点分子对接分子对接是利用受体和配体相互作用的原理从而发现药物的一种药物设计技术，适用于研究分子间的亲和力、结合模式及相互作用。使用Autodock Vina 软件，将通过网络药理学分析所得的茵陈蒿汤与 AIH 的关键化学成分和关键靶点进行分子对接，再使用Discovery studio软件分析数据，绘制分子对接结构图并计算结合能，验证有效成分和靶点的结合情况。结合能 0说明分子间可以自行结合，一般负值越大，分子自发结合的可能性越大；当结合能 -5 kcal/mol（1 kcal/mol=4.184 kJ/mol）可认为配体与受体间结合程度较好；当结合能 -7 kcal/mol时自发结合情况理想，且构象稳定。2结果结果2.1 茵陈蒿汤的有效成分及靶点在TCMSP数据库中共筛选得到茵陈蒿汤有效成分44种，其中栀子15种、茵陈13种、大黄16种。所得成分中栀子和茵陈共有成分为槲皮素，栀子、茵陈和大黄共有成分为-谷甾醇。使用TCMSP数据库中“Related Targets”功能对41种有效成分进行靶点筛选得到778个靶点，栀子中编号MOL009038、MOL001506和MOL001663的化学成分无靶点信息，大黄中编号MOL002293、MOL002276、MOL002251、MOL000554、MOL002260和MOL002303的化学成分无靶点信息。通过Uni-prot查询所得靶点的对应基因，并标准化靶点名称。其中靶点 Cytochrome P450-cam、Thrombin、mRNA of PKA Catalytic Subunit C-alpha、Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A、isoforms 1/2/3、Prob-able E3 ubiquitin-protein ligase HERC5、Peroxidase C1A、DNA gyrase subunit B 和 DNA topoisomerase 未在智人物种中检索到对应基因，故排除。由于DNA topoisomerase 是大黄有效成分MOL002259、MOL002280 和 MOL002288 的惟一靶点，因此上述3种有效成分均不纳入分析。经排除重复、无靶点、无基因名称的成分后，最终得到茵陈蒿汤有效成分29个，其中栀子10个（ZZ1-ZZ10）、茵陈11个（YC1-YC11）、大黄6个（DH1-DH6）；栀子、茵陈共有成分 1 个（D1），栀子、茵陈、大黄共有成分1个（D2），具体信息如表1所示。2.2 中药化合物靶点网络汇总各有效成分的靶点，去重，最终得到茵第49卷兰州大学学报（医 学 版）8陈蒿汤相关靶点205个。将有效成分及治疗靶点导入 Cytoscape 3.7.1，得到槲皮素和-谷甾醇度的计数值高于其他化合物。2.3 AIH靶点使用OMIN数据库检索AIH，去重后得到143个靶点。在 DRUGBANK数据库检索 AIH，获得靶点信息及对应的 Uniprot编号，在 Uniprot数据库中查询后得到统一symbol名称，去重后共得到AIH 靶点 32 个。Genecards 数据库检索后得到5 712个AIH相关靶点，通过相关性评分筛选后共得到 716 靶点。DisgenNET 数据库得到 AIH 相关靶点190个。对4个数据库中得到的靶点进行汇总并去重，最终获得AIH相关靶点926个。2.4 茵陈蒿汤AIH交集靶点及有效成分靶点网络对茵陈蒿汤和AIH的靶点进行交集分析，得到潜在治疗靶点73个。将73个交集靶点利用Cy-toscape软件分析后，得到有效成分靶点网络，通过软件分析功能计算每个节点的计数值，并使节点大小与该节点的计数值呈正相关关系，即计数值越大，节点面积越大，以此筛选茵陈蒿汤治疗AIH的核心化合物。结果显示，编号D1的槲皮素和编号 ZZ4 的山柰酚的计数值较高，分别为139和30。2.5 茵陈蒿汤AIH交集靶点蛋白质相互作用网络构建通过 STRING 数据库下载互相作用的数据，并导入 Cytoscape。在软件中计算每个靶点的计序号 1 2 3 4 5 6 7 8 91011121314151617181920212223242526272829标记ZZ1ZZ2ZZ3ZZ4ZZ5ZZ6ZZ7ZZ8ZZ9ZZ10YC1YC2YC3YC4YC5YC6YC7YC8YC9YC10YC11DH1DH2DH3DH4DH5DH6D1D2MOL编号MOL001406MOL001941MOL004561MOL000422MOL000449MOL001494MOL001942MOL002883MOL003095MOL007245MOL000354MOL004609MOL005573MOL007274MOL008039MOL008040MOL008041MOL008043MOL008045MOL008046MOL008047MOL002297MOL002281MOL002268MOL000096MOL002235MOL000471MOL000098MOL000358名称藏红花酸欧前胡素苏丹 山柰酚豆甾醇甘露醇异欧前胡素油酸乙酯伞房花耳草素4-乙烯基氯苄异鼠李素茵陈黄酮芫花素蓟黄素异茵陈蒿黄酮3-去羟-4-去甲泽兰黄醇素3,5,3,4-四羟基-6,7-二甲氧基黄酮茵陈色原酮4-甲基茵陈色原酮去甲氧基茵陈色原酮茵陈蒿灵 A胡萝卜苷决明内酯大黄酸(-)-儿茶素泽兰黄醇芦荟大黄素槲皮素-谷甾醇口服利用度/%35.3034.5584.0741.8843.8342.0045.4632.4051.9660.1649.6048.9637.1330.3557.4046.1142.5557.5672.1852.3368.3235.8946.4647.0749.6850.8083.3846.4336.91药物相似度0.260.220.590.240.760.190.230.190.410.260.310.410.240.300.410.330.370.310.350.250.240.700.240.280.240.410.240.280.75靶点/个13611583031124934151310131491491216287101422293107来源栀子栀子栀子栀子栀子栀子栀子栀子栀子栀子茵陈茵陈茵陈茵陈茵陈茵陈茵陈茵陈茵陈茵陈茵陈大黄大黄大黄大黄大黄大黄栀子、茵陈栀子、茵陈、大黄表1 茵陈蒿汤有效成分第8期程新红，等：基于网络药理学及分子对接探究茵陈蒿汤治疗自身免疫性肝炎的作用机制9数值，并根据计数值筛选核心靶点。筛选后计数值排名前五的核心靶点分别是：白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、P53 蛋白、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）、蛋白激酶 B 亚型（protein kinase B，PKB）和白细胞介素-1（in-terleukin-1，IL-1），见图1。白细胞介素-6P53蛋白肿瘤坏死因子蛋白激酶B 亚型白细胞介素-1血管内皮生长因子A胱天蛋白酶3Jun原癌基因家族前列腺素内过氧化物合酶2基质金属蛋白酶9图1 核心靶点蛋白质相互作用网络2.6 富集分析将 茵 陈 蒿 汤 治 疗 AIH 的 交 集 靶 点 导 入Metascape 数据库，选择物种智人进行 KEGG 和GO分析。筛选P 0.01的通路，计算每一通路富集的靶点个数，并按靶点个数由大到小排序。KEGG富集分析结果中P 0.01的通路共155条，对排名前20的通路进行可视化分析。核心通路主要涉及：癌症信号通路、活性氧信号通路、低氧诱导因子1信号通路、核因子B信号通路、趋化因子信号通路。GO富集分析的生物过程包含1 433个，主要包括细胞迁移的正向调节、对无机物的反应、细胞黏附调节、细胞分化负调控、细胞死亡正向调控、对脂多糖的反应、对激素的反应、对异种刺激的反应以及腺体发育等；GO富集分析的细胞成分43个，主要涉及膜筏、膜侧、囊泡腔、转录调节复合物、细胞质核周区域、细胞外基质、溶解液泡、细胞器外膜、黏着斑、内质网腔以及细胞细胞连接等；GO 富集分析的分子功能 108个，包括细胞因子受体结合、DNA 转录因子结合、激酶结合、蛋白质同二聚化活性、蛋白质结构域特异性结合、脂质结合、泛素样蛋白连接酶结合、磷酸酶结合、激酶调节剂活性、蛋白酶结合以及血红素结合等。2.7 关键化学成分关键靶点分子对接使用Autodock Vina将核心成分与靶点进行分子对接分析，并计算配体与受体的结合能。分子对接结果如图2、表2所示，PKB与槲皮素、山柰酚的结合能分别为-6.1、-6.8 kcal/mol，除此之外的成分与靶点间结合能均 -7 kcal/mol。第49卷兰州大学学报（医 学 版）10山柰酚蛋白激酶B 亚型山柰酚白细胞介素-1槲皮素蛋白激酶B 亚型槲皮素白细胞介素-1山柰酚白细胞介素-6槲皮素白细胞介素-6山柰酚肿瘤坏死因子槲皮素肿瘤坏死因子山柰酚P53蛋白槲皮素P53蛋白图2 分子对接模式图第8期程新红，等：基于网络药理学及分子对接探究茵陈蒿汤治疗自身免疫性肝炎的作用机制113讨论讨论AIH因诊断和治疗都相对困难，常常发展为肝硬化甚至终末期肝病。临床上常用大剂量激素和免疫抑制剂维持治疗，这种治疗方案虽然可以缓解 AIH 的症状，但停药后一部分患者会复发，且长期服药会产生副作用，甚至增加癌症的风险12-14。中医将 AIH 归于“黄疸”“胁痛”“痞满”“鼓胀”等症候，认为其是因肝郁、脾虚致使肝气郁结、脾胃失调、内湿不排、血脉不畅、阴湿积久致精气损耗导致15。中医治疗素有辨证论治、治本达标的思想，加之中药方剂多成分多靶点的特点，使其在肝脏疾病的治疗中具有独特优势。中医对AIH的疗效研究起步较晚，但近年来诸多研究表明，中药单独或联合西药治疗在AIH中取得了不错的临床效果16。茵陈蒿汤起源于孙思邈所著伤寒论，方剂中包含三味中药，其中茵陈为君药，辅以大黄和栀子。方中三味药材均归属肝经，常用于退黄利胆、清热利湿，其作为中医论治肝病所用的名方，临床应用广泛，不但对肝纤维化、肝硬化、病毒性肝炎有显著的治疗作用，还兼具抗肿瘤的功效17。茵陈蒿汤对AIH的治疗同样广泛，药理学研究发现其可以调节肝脏免疫功能，抑制多种炎症因子的释放和激活，从而达到抗炎保肝的效果18。本研究对茵陈蒿汤治疗AIH的机制进行了网络药理学分析，筛选治疗过程中的核心成分以及核心靶点，发现、预测和阐述治疗的潜在作用机制。结果显示，茵陈蒿汤中共有 29 种成分参与AIH 的治疗，参与治疗的交集靶点 73个，基于这些化合物和靶点构建了中药化合物靶点疾病拓扑网络，根据网络中化合物的计数值筛选出槲皮素、山柰酚等核心成分。通过蛋白质相互作用网络分析发现，茵陈蒿汤对AIH的治疗机制主要与 IL-6、P53、TNF、PKB 和 IL-1 有关，它们作为治疗过程中的核心靶点，在蛋白质互相作用网络中有着最高的计数值评分。随后将核心成分中计数值前2位的槲皮素和山柰酚，与5个核心靶点进行分子对接，结果显示核心成分与核心靶点结合情况理想，这增加了分析结果的可信度。IL-6 是一种重要细胞因子，主要由 T 细胞、树突状细胞、上皮细胞等产生，在肝脏中IL-6可诱导刺激多种急性期蛋白的生成从而促进急性炎症反应19。IL-6 可通过与白细胞介素-6 受体（interleukin-6 receptor，IL-6R）结合的方式发挥功能，IL-6/IL-6R轴的失调已被广泛认为与自身免疫性疾病密切相关20。相比正常人群，IL-6基因突变的人群发生 AIH 的风险显著升高21。研究22表明，IL-6和IL-1在AIH患者的组织中表达明显高于正常人群，这两种细胞因子水平的升高被认为是造成肝实质破坏的主要因素。PKB 是PI3K的下游靶点，作为与细胞增殖、凋亡及代谢相关的经典信号通路，PI3K/PKB通路的激活可以有效抑制肝细胞的凋亡和自噬，从而改善AIH患者的肝细胞功能23。此外，Garcia-Rodriguez等24发现，PKB 在轻度或非活动性系统性红斑狼疮患者中水平上调，Zheng等25发现大黄素可以抑制PI3K/PKB信号传导，从而改善自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型神经功能，这也进一步证实PKB 与自身免疫性疾病相关。TP53 基因可以与 IL-6/STAT3、核因子B、WNT等多种免疫相关的信号通路互相影响，并参与调节Treg细胞分化和白细胞募集，这些功能已被发现与肿瘤的生长和免疫反应相关26。研究27-28认为当功能性P53蛋白感知到DNA损伤时，会立即诱导异常细胞的DNA修复、生长停滞或凋亡。Gu等29发现P53蛋白在系统性红斑狼疮患者中高表达，说明其可能与自身免疫疾病相关。虽然尚未有研究直接证明TP53基因和AIH的关系，但其对免疫功能的调节，使得这一方向颇具研究潜力。TNF主要由巨噬细胞和第49卷兰州大学学报（医 学 版）核心成分槲皮素山柰酚蛋白激酶B 亚型-6.1-6.8白细胞介素-6-7.3-7.5白细胞介素-1-7.2-7.5肿瘤坏死因子 -9.2-10.5P53蛋白-7.7-7.8kcal/mol表2 分子对接结合能12T细胞分泌，是一类常见且具有诸多功能的细胞因子，可扩张血管，产生水肿并募集炎症细胞与炎症因子，已被证实其作为自身免疫性疾病的病理成分具有重要作用30。其中TNF-可加重刀豆蛋白A诱导的肝炎，且肝脏损伤程度随其表达量增加逐渐加重31。基于 TNF 对炎症的促进作用，针对该细胞因子的靶向抑制药物减少炎症损伤的作用愈发得到重视，目前肿瘤坏死因子阻滞剂作为 AIH和其他自身免疫性疾病的常规治疗药物，已在临床广泛使用32-33。KEGG富集结果表明，茵陈蒿汤治疗AIH的过程可能与癌症相关信号通路、核因子 B 信号通路、活性氧信号通路和趋化因子信号通路相关，5种核心靶点在以上通路中广泛富集，且主要与炎症反应、细胞因子分泌、炎症细胞募集以及细胞凋亡、肿瘤发生等过程相关。癌症信号通路富集 40 个靶点，包括 PKB、IL-6、IL-1、P53等核心靶点。Tansel等30对25项队列研究中的 6 528例 AIH 患者进行了回顾性分析，结果显示AIH患者的肝细胞癌发生率为3.06/1 000（95%CI：2.22，4.23，I 2=51.5%，P=0.002），AIH 肝硬化为肝细胞癌的危险因素，并发肝硬化 的 AIH 患 者 肝 细 胞 癌 发 生 率 为 10.07/1 000（95%CI：6.89，14.70，I 2=48.8%，P=0.015）。在治疗靶点的KEGG分析中，癌症相关信号通路所富集的靶点数目最多，这也提示茵陈蒿汤对于AIH的作用可能在一定程度上会延缓、阻止AIH向肝细胞癌的转化。核因子 B信号通路富集 10个靶点，其中包括 IL-1B、TNF 等关键靶点。核因子B是调节炎症和免疫反应的重要通路，影响效应器功能的突变或核因子B途径负性调节器的功能缺失突变是导致自身免疫或炎症性疾病的原因34，并且它在不同的细胞区间和组织中都很活跃35。在肝脏中，核因子 B 可诱导 TNF、IL-6、IL-1 等多种细胞因子，而在炎症反应过程中，TNF、IL-1又可促进核因子B功能的活化，这一正反馈调节体系加重炎症产生的肝损伤36。该通路的功能亢进所导致的炎症级联反应在AIH的肝损伤中同样意义重大，在多种抗炎药物治疗AIH的过程中，核因子 B 的功能受到显著抑制37-38。活性氧信号通路富集21个靶点，包括PKB等核心靶点。活性氧是体内介导细胞凋亡、免疫损伤和肿瘤发生的重要通路，其可通过激活核因子B信号通路从而诱导和募集炎症细胞因子TNF、IL-6、INF-和IL-10，并增加T细胞的产生和活化，从而促进免疫应答39。在肝脏炎症反应中，过多的活性氧产生会加重肝细胞损伤和死亡，增加肝硬化、肝纤维化及肝癌的发生风险，减少肝实质中的活性氧积累可以减轻炎症反应产生的肝损伤，起到保肝作用40-41。趋化因子信号通路富集8个靶点，包括PKB等核心靶点。趋化因子是一系列小分子、高度保守的蛋白，在肝脏中主要由免疫细胞分泌。在炎症反应中，趋化因子对于炎症因子的动员，以及炎症细胞和免疫细胞向受损部位的定位十分重要。多种趋化因子的表达上调作为AIH的发病因素近年来受到广泛研究，在AIH的发生过程中，趋化因子介导的免疫细胞群的迁移起到重要作用。研究42表明，趋化因子配体 10、趋化因子配体20和趋化因子配体5在AIH的血清中表达上调。虽然适合AIH诊断的趋化因子靶标尚未确定，但上述3种趋化因子，以及趋化因子靶向的T细胞亚群已被证实具有作为AIH诊断标志物的潜力43-44。本研究通过网络药理学的方法，对茵陈蒿汤治疗AIH的主要成分、靶点以及治疗过程中涉及的细胞成分、信号通路和生物过程进行了分析。在后续研究中，我们将在此基础上进一步开展体内外的药理验证实验，对茵陈蒿汤治疗AIH的机制深入研究，为其临床应用和开发提供更多参考。参 考 文 献1 Covelli C,Sacchi D,Sarcognato S,et al.Pathology of autoimmune hepatitisJ.Pathologica,2021,113(3):185-193.2 Terziroli Beretta-Piccoli B,Mieli-Vergani G,Vergani D.Autoimmune hepatitis:Serum autoantibodies in clinical practiceJ.Clinical Reviews in Allergy&Immunology,第8期程新红，等：基于网络药理学及分子对接探究茵陈蒿汤治疗自身免疫性肝炎的作用机制132022,63(2):124-137.3 Wang Qixia,Yan Li,Ma Xiong.Autoimmune hepatitis in the Asia-Pacific AreaJ.Journal of Clinical and Transla-tional Hepatology,2018,6(1):48-56.4 Sirbe C,Simu G,Szabo I,et al.Pathogenesis of autoim-mune hepatitis-cellular and molecular mechanismsJ.In-ternational Journal of Molecular Sciences,2021,22(24):13578.5 王聪,吴雄健,黄才斌.自身免疫性肝病的发病机制及诊疗进展 J.中外医疗,2021,40(30):194-198.6 Muratori L,Lohse AW,Lenzi M.Diagnosis and manage-ment of autoimmune 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