胚胎工程的应用及前景.ppt
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1、胚胎工程的应用及胚胎工程的应用及前景前景胚胎工程技术:胚胎工程技术:体外受精体外受精 胚胎移植胚胎移植 胚胎分割胚胎分割 胚胎干细胞培养胚胎干细胞培养目前应用较多的是:目前应用较多的是:胚胎移植、胚胎分割、胚胎移植、胚胎分割、体外生产胚胎技术。体外生产胚胎技术。1.1.概念概念 将雌性动物的将雌性动物的早期胚胎早期胚胎,或者或者通过通过体外受精及其他方式得到的胚胎体外受精及其他方式得到的胚胎,移移植到植到同种的、生理状态相同同种的、生理状态相同的其他的其他雌性雌性动物的体内动物的体内,使之发育为新个体使之发育为新个体的技术。的技术。(1 1)胚胎来源:)胚胎来源:a、雌性、雌性动动物物体内受精
2、体内受精的胚胎;的胚胎;b、通、通过过体外受精体外受精和早期胚胎培养和早期胚胎培养获获得得的胚胎;的胚胎;c、通、通过过哺乳哺乳动动物体物体细细胞胞核移植核移植及培养及培养获获得的胚胎;得的胚胎;d、通、通过过转转基因基因技技术获术获得的胚胎;得的胚胎;注意:胚胎移植是无性生殖还是有性生殖取决注意:胚胎移植是无性生殖还是有性生殖取决于胚胎的来源。于胚胎的来源。(2)供受体的选择及其职能:)供受体的选择及其职能:供体:供体:提供胚胎的具有提供胚胎的具有优良遗传特性优良遗传特性的个体;的个体;受体:受体:接受胚胎的个体接受胚胎的个体a a、同一物种同一物种的的雌性雌性动动物;物;b b、与供体、与
3、供体处处于于相同相同的的生理状生理状态态。职能:职能:只产生具有优良遗传特性的胚胎只产生具有优良遗传特性的胚胎。职能:职能:担任繁重而漫长的妊娠和育仔的任务。担任繁重而漫长的妊娠和育仔的任务。供受体模式引进牛&地方黄牛(3)胚胎移植实际上是胚胎移植实际上是:生产胚胎的供体生产胚胎的供体和和孕孕育胚胎的受体育胚胎的受体共同繁殖后代。共同繁殖后代。在胚胎工程中通过任何一项技术,在胚胎工程中通过任何一项技术,如如转基因、核移植,或体外受精转基因、核移植,或体外受精等等技术获得的胚胎,都必须移植给受技术获得的胚胎,都必须移植给受体才能获得后代。因此,体才能获得后代。因此,胚胎移植胚胎移植又是胚胎工程其
4、他技术的又是胚胎工程其他技术的最后一道最后一道“工序工序”。胚胎工程有什么意义呢?胚胎工程有什么意义呢?2.2.胚胎移植的现状和意义胚胎移植的现状和意义1)1)保持供体优良特性保持供体优良特性(加速育种工作和品种改良加速育种工作和品种改良)2)2)节约成本节约成本 费用费用(大量节省购买种畜的费用大量节省购买种畜的费用);3)3)大规模繁殖大规模繁殖(一胎多产一胎多产);4)4)保存品种资源和保护濒危物种;保存品种资源和保护濒危物种;5)5)充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力。充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力。思考:1、准备移植的小牛胚胎,移植到任何一头动、准备移植的小牛胚胎,移植到任何一头动物的子
5、宫内都能发育吗物的子宫内都能发育吗?2、供体和受体之间进行胚胎移植会不会发生、供体和受体之间进行胚胎移植会不会发生免疫排斥反应呢?如何保证移植成功呢?免疫排斥反应呢?如何保证移植成功呢?.3.3.胚胎移植的生理学基础胚胎移植的生理学基础 P76P76请认真阅读课本请认真阅读课本P76P76,思考讨论:,思考讨论:胚胎移植的生理学基础有哪些内容?胚胎移植的生理学基础有哪些内容?移植到任何一头动物子宫内都能发育吗移植到任何一头动物子宫内都能发育吗?同种动物发情排卵后同种动物发情排卵后,在一段时间内供体在一段时间内供体受体具受体具有相同的生理环境。有相同的生理环境。为什么能收集到胚胎为什么能收集到胚
6、胎?早期胚胎一定时间内处于游离状态,易收集。早期胚胎一定时间内处于游离状态,易收集。供体和受体会不会发生免疫排斥?供体和受体会不会发生免疫排斥?同种动物之间基本上不排斥。同种动物之间基本上不排斥。为什么移植的胚胎能保留供体双亲的特性为什么移植的胚胎能保留供体双亲的特性?胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但遗传特但遗传特性不受受体的影响。性不受受体的影响。.生生理理学学基基础础3.3.胚胎移植的生理学基础胚胎移植的生理学基础 P76P76胚胎移植成功的标志:移植的胚胎在受体内正常胚胎移植成功的标志:移植的胚胎在受体内正常发育并分娩。发育并分娩。思考与讨论思考与
7、讨论:P76:P76 1、在胚胎移植操作中,怎样才能使胚胎在移植前后所、在胚胎移植操作中,怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致?例如,供、受体的发情时间要处的生理环境保持一致?例如,供、受体的发情时间要一致吗?供体胚胎移入受体子宫的位置,应与在供体内一致吗?供体胚胎移入受体子宫的位置,应与在供体内的位置相同后相似吗?的位置相同后相似吗?答案:应答案:应对供体和受体母畜进行对供体和受体母畜进行同期发情处理同期发情处理,使它们的生理条件达到同步后一致使它们的生理条件达到同步后一致,这样才能使,这样才能使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件,供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件
8、,这是胚胎移植这是胚胎移植成功与否的关键。成功与否的关键。因此,必须做到因此,必须做到供、受体母畜的发情时间一致。供、受体母畜的发情时间一致。同时还要做到同时还要做到移入受体子宫胚胎的位置应该与移入受体子宫胚胎的位置应该与其在供体内的位置相同或相似,移入胚胎一侧的其在供体内的位置相同或相似,移入胚胎一侧的受体子宫对应的卵巢必须有黄体存在。受体子宫对应的卵巢必须有黄体存在。2、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。你认为这样的概括境条件下空间位置的转移。你认为这样的概括正确吗?正确吗?正确。只有供受体生理环境高度一致,移入胚正确。只有供
9、受体生理环境高度一致,移入胚胎才能被接受,并继续发育。胎才能被接受,并继续发育。胚胎移植胚胎移植实质实质上是上是早期胚胎在相同生理环境条早期胚胎在相同生理环境条件下件下空间位置的转移空间位置的转移,而,而胚胎本身的遗传物质胚胎本身的遗传物质并不发生改变,并不发生改变,因此各种性状均能因此各种性状均能保持其原来保持其原来的优良特性。的优良特性。选选 择择供体母牛供体母牛受体母牛受体母牛同期发情处理同期发情处理超数排卵超数排卵供体公牛供体公牛配种配种冲卵冲卵质量检查、培养质量检查、培养胚胎移植胚胎移植妊娠检查妊娠检查分娩(胚胎移植的犊牛)分娩(胚胎移植的犊牛)4.胚胎移植的基本程序胚胎移植的基本程
10、序处处 理理配种或人配种或人工授精工授精胚胎检查、胚胎检查、培养或保存培养或保存胚胎移植胚胎移植胚胎工程的最胚胎工程的最后一道后一道“工序工序”(1 1)对供体、受体进行选择)对供体、受体进行选择供体:供体:遗传性能遗传性能和和生产性能优秀生产性能优秀的个体;的个体;受体:受体:健康健康和和正常繁殖能力正常繁殖能力的个的个体体处理:处理:用激素(一般为孕激素)用激素(一般为孕激素)进行进行同期发情处理。同期发情处理。目的:目的:使它们的使它们的生理条件达到同生理条件达到同步步,这是胚胎移植成功的,这是胚胎移植成功的关键关键(2 2)用激素对工体母牛做)用激素对工体母牛做超数排卵处理超数排卵处理
11、具体做法:具体做法:对供体母牛对供体母牛注射注射促性腺激素促性腺激素(3 3)配种(自然交配)或人工授精)配种(自然交配)或人工授精精子来源:精子来源:同种优秀的公牛。同种优秀的公牛。(体内受精)(体内受精)(4 4)胚胎的收集)胚胎的收集 在配种或输精后第在配种或输精后第7天,用特制的冲卵装置,天,用特制的冲卵装置,把供体母牛把供体母牛子宫内的胚胎子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲洗出来(也叫冲卵冲卵)。)。思考:思考:这里的这里的“冲卵冲卵”和前面采集卵母细胞时和前面采集卵母细胞时的的“冲卵冲卵”是否相同?是否相同?不同,这里不同,这里“冲卵冲卵”是将供体是将供体母牛内母牛内胚胎胚胎冲出来;冲出
12、来;而采集卵母细胞时的而采集卵母细胞时的“冲卵冲卵”是从输卵管中冲取是从输卵管中冲取卵子。卵子。(5 5)对胚胎进行质量检查)对胚胎进行质量检查 你知道检查的目的你知道检查的目的吗?此时胚胎处于什吗?此时胚胎处于什么时期?么时期?检查检查胚胎发育的胚胎发育的状况状况,此时胚胎处于,此时胚胎处于桑椹胚或囊胚桑椹胚或囊胚。(6 6)胚胎的保存或移植)胚胎的保存或移植 收集的胚胎直接收集的胚胎直接向受体向受体移植移植或放入或放入196196的液氮的液氮保存。保存。(7 7)胚胎的移植)胚胎的移植方法一:手术法方法一:手术法具体做法:引出受体子宫和卵巢,将胚胎注具体做法:引出受体子宫和卵巢,将胚胎注入
13、子宫角,缝合创口。入子宫角,缝合创口。方法二:非手术法方法二:非手术法将装有胚胎的移植管送入受体母牛子宫的相将装有胚胎的移植管送入受体母牛子宫的相应部位,注入胚胎。应部位,注入胚胎。注意:移入受体子宫胚胎位置应与其在供体的位置注意:移入受体子宫胚胎位置应与其在供体的位置相似,移入胚胎一侧的受体子宫对应卵巢必须有黄相似,移入胚胎一侧的受体子宫对应卵巢必须有黄体存在。体存在。(8 8)对受体母牛进行妊娠的检查)对受体母牛进行妊娠的检查(9 9)受体母牛产下胚胎移植的犊牛)受体母牛产下胚胎移植的犊牛【归纳总结归纳总结】该过程中两次使用激素该过程中两次使用激素第一次对受、供体进行第一次对受、供体进行同
14、期发情处理;同期发情处理;第二次用于供体的第二次用于供体的超数排卵。超数排卵。该过程中的两次检查:该过程中的两次检查:第一次对第一次对收集的胚胎进行检查收集的胚胎进行检查;第二次对第二次对受体受体母牛是否妊娠进行检查母牛是否妊娠进行检查。产下的犊牛性状取决于所用公牛和供体母牛,产下的犊牛性状取决于所用公牛和供体母牛,性别取决于公牛提供何种类型的精子,与受体牛没有性别取决于公牛提供何种类型的精子,与受体牛没有关系。关系。此处此处冲卵的含义是从子宫中冲出冲卵的含义是从子宫中冲出胚胎胚胎,而非冲出卵,而非冲出卵子子。胚胎移植成功与否要有两个条件胚胎移植成功与否要有两个条件(1 1)胚胎移植一般应在)
15、胚胎移植一般应在同种的同种的雌性供体和受体雌性供体和受体之间进行。之间进行。(2 2)进行胚胎移植的供体和受)进行胚胎移植的供体和受体的体的生理状态要相同生理状态要相同。二、胚胎分割二、胚胎分割 阅读课本,思考以下问题:阅读课本,思考以下问题:(1)胚胎分割的概念)胚胎分割的概念(2)胚胎分割特点)胚胎分割特点(3)胚胎分割的理论基础)胚胎分割的理论基础(4)胚胎分割操作过程)胚胎分割操作过程二、胚胎分割二、胚胎分割优势优势:可成倍增加胚胎数量,可以快速繁殖良种畜。可成倍增加胚胎数量,可以快速繁殖良种畜。1.概念概念:采用采用机械方法机械方法将早期胚胎切割成将早期胚胎切割成2等等份,份,4等份
16、或等份或8等份等,经移植获得等份等,经移植获得同卵双胎同卵双胎或多胎或多胎的技术。的技术。2.2.特点:特点:后代具有相同的遗传物质。可以看作是后代具有相同的遗传物质。可以看作是动物动物无性繁殖无性繁殖或或克隆克隆的方法之一。的方法之一。3.3.选择的胚胎:选择的胚胎:发育良好的,形态正常的发育良好的,形态正常的桑椹胚桑椹胚或或囊胚囊胚3.3.使用的主要仪器设备:使用的主要仪器设备:实体显微镜、显微操作仪实体显微镜、显微操作仪操作注意事项操作注意事项:对对囊胚阶段囊胚阶段的胚胎进行分割时,将的胚胎进行分割时,将内细胞团内细胞团均等分割均等分割。4、理论基础、理论基础 动物动物胚胎细胞的全能性胚
17、胎细胞的全能性。所以胚胎分割的时期为:所以胚胎分割的时期为:桑椹胚桑椹胚或或囊胚囊胚.切几份,之间关系,有什么方法,目前主要是2份,原因 概念.切什么时期.注入空透明带.半裸胚直接到受体选择良好的选择良好的桑椹桑椹胚胚或或囊胚囊胚移入培移入培养皿中,用分割养皿中,用分割针或分割刀片将针或分割刀片将其切开,吸出其其切开,吸出其中的半个胚胎注中的半个胚胎注入透明带中或直入透明带中或直接移植给受体。接移植给受体。5.5.基本过程:基本过程:.性别鉴定2胚胎分割的基本过程胚胎分割的基本过程胚胎移入培养液胚胎移入培养液分割胚胎(机械法、酶处理)分割胚胎(机械法、酶处理)移植胚胎给受体移植胚胎给受体着床产
18、仔着床产仔6 6、操作注意事项:、操作注意事项:对对囊胚囊胚阶段的胚胎进行分割时,要将阶段的胚胎进行分割时,要将内细内细胞团胞团均等分割均等分割。原因:原因:内细胞内细胞团一般到囊胚阶段才出现,它团一般到囊胚阶段才出现,它是是发育为胚胎本身的基础细胞发育为胚胎本身的基础细胞,其他细胞为,其他细胞为滋养细胞,只为胚胎和胎儿发育提供营养。滋养细胞,只为胚胎和胎儿发育提供营养。若若分割时不能将内细胞团均等分割分割时不能将内细胞团均等分割,会出现,会出现含内细胞团多含内细胞团多的部分的部分正常发育的能力强正常发育的能力强,少少的部分发育受阻或发育不良,甚至不能发育的部分发育受阻或发育不良,甚至不能发育
19、等问题。等问题。胚胎分割的份数越多,操作的难度会越胚胎分割的份数越多,操作的难度会越大,移植的成功率也越低。大,移植的成功率也越低。早期胚胎的体积很小,只有在显微镜下才能早期胚胎的体积很小,只有在显微镜下才能看到;再者,细胞数目是有限的。分割的份数越看到;再者,细胞数目是有限的。分割的份数越多,不但难以做到均等分割,每一份的细胞数会多,不但难以做到均等分割,每一份的细胞数会越少,而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受越少,而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。因此,分割的份数越多,技术的的影响会更大。因此,分割的份数越多,技术的难度会越大,移植后的恢复和发育的难度会越大,难度会越大,
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