流式细胞仪BD-FACSCanto-IIPPT.ppt
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1、流式细胞仪背景知识流式细胞仪背景知识总览总览l 流式细胞术基本知识l 流式细胞仪的组成l 数据采集与分析流式细胞技术是什么?流式细胞技术是什么?l流式细胞术流式细胞术在流动的状态中检测细胞或颗粒的各项特性在流动的状态中检测细胞或颗粒的各项特性特异性强,灵敏度高,速度快,并能实现多参数分析特异性强,灵敏度高,速度快,并能实现多参数分析可检测的样本种类多样:外周血,骨髓,细胞穿刺液,洗脱可检测的样本种类多样:外周血,骨髓,细胞穿刺液,洗脱液,实体组织,培养细胞,微生物液,实体组织,培养细胞,微生物Flow CytometryFlow:Fluid Cyto:Cell Metry:Measuremen
2、t流式细胞术检测样本流式细胞术检测样本0.4um40um流式细胞术检测指标流式细胞术检测指标l流式细胞术提供的信息:流式细胞术提供的信息:-相对细胞大小相对细胞大小 -相对细胞颗粒密度和内部复杂度相对细胞颗粒密度和内部复杂度 -染色过细胞的相对荧光强度染色过细胞的相对荧光强度细胞结构细胞结构=细胞大小细胞大小=细胞粒度细胞粒度=DNA含量与细胞周期含量与细胞周期=RNA含量含量=蛋白质含量蛋白质含量=染色体分析染色体分析 细胞功能细胞功能=细胞表面细胞表面/胞浆胞浆/核的特核的特异性抗原异性抗原=细胞活性细胞活性=细胞内细胞因子细胞内细胞因子=酶活性酶活性=激素结合位点激素结合位点=细胞受体细
3、胞受体=细胞凋亡细胞凋亡在上述信号基础上的细胞分选在上述信号基础上的细胞分选流式细胞术的应用流式细胞术的应用流式细胞术的应用流式细胞术的应用流式细胞仪组成流式细胞仪组成l液流系统:形成层流系统,聚焦细胞l光学系统:产生和收集光学信号l电子系统:光信号转化为电信号,进行信号处理Fluidics DiagramSheath Flowsheath tanksheath tankSample Flowsheathsheathinterior reservoirinterior reservoirwastewasteinterior reservoirinterior reservoirsheath f
4、iltersheath filtersample injectionsample injectiontube(SIT)tube(SIT)test tubetest tubeor plateor plateflow cellflow cellinterrogation pointinterrogation pointbubble filterbubble filterwaste tankwaste tank液流系统液流系统光学系统光学系统l激发光学系统包括:-激光器-透镜和反射镜,将激光引导到检测区域l收集光学系统包括:-滤光片,将产生的光信号引导到对应的光学接收器光学系统光学系统光学系统光学系
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