生物选修一新专题二课题二.ppt

1、统计细统计细菌数目常用的方法菌数目常用的方法?2、通常、通常选择选择菌落数菌落数为为多少的平板多少的平板进进行行计计数数?统计统计几个平板几个平板?3、稀、稀释释涂布平板法涂布平板法计计算土算土样样菌数的公式菌数的公式?各母代表的含各母代表的含义义?4、实验设实验设置置对对照的主要目的照的主要目的?5、鉴鉴定定选选出的是分解尿素的出的是分解尿素的细细菌的方法？菌的方法？原理是什么？原理是什么？背背诵诵听写听写1.一、基一、基础础知知识识（阅读阅读P27-28页页第三段，第三段，讨论讨论回答以下回答以下问题问题）1 1、纤维纤维素在生物圈的分布状况？素在生物圈的分布状况？2 2、纤维纤维素素酶酶的的组组成及作用？成及作用？3 3、纤维纤维素分解菌的素分解菌的筛选筛选方法？方法？4 4、纤维纤维素分解菌的素分解菌的筛选筛选原理？原理？2.1、纤维纤维素在生物圈的素在生物圈的分布分布状况？状况？2、纤维纤维素素酶酶的的组组成成及作用？及作用？纤维纤维素是素是地球上含量最丰富的多糖地球上含量最丰富的多糖类类物物质质。植物。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维纤维素。其中素。其中棉花棉花是自然界中是自然界中纤维纤维素含量最高的天然素含量最高的天然产产物。物。纤维纤维素素酶酶是一种是一种复合复合酶酶，一般，一般认为认为它至少包括三它至少包括三种种组组分，即分，即C1酶酶、CX酶酶和和葡萄糖苷葡萄糖苷酶酶，前两种，前两种酶酶使使纤维纤维素分解成素分解成纤维纤维二糖二糖，第三种，第三种酶酶将将纤维纤维二糖二糖分解成分解成葡萄糖葡萄糖。纤维纤维素和素和纤维纤维素素酶酶3.纤维纤维素分解菌的素分解菌的筛选筛选1、纤维纤维素分解菌的素分解菌的筛选筛选方法方法:2、纤维纤维素分解菌的素分解菌的筛选筛选原理原理:刚刚果果红红染色法染色法：这这种方法能种方法能够够通通过颜过颜色反色反应应直直接接对对微生物微生物进进行行筛选筛选 刚刚果果红红是一种染料，它可以是一种染料，它可以与与纤维纤维素形成素形成红红色色复合物复合物，但并不和但并不和纤维纤维二糖、葡萄糖二糖、葡萄糖发发生生这这种反种反应应。当当纤维纤维素被素被纤维纤维素素酶酶分解后分解后刚刚果果红红纤维纤维素的复合素的复合物就无法形成，培养基中会出物就无法形成，培养基中会出现现以以纤维纤维素分解菌素分解菌为为中心的中心的透明圈透明圈。这样这样我我们们可以可以通通过过是否是否产产生透明生透明圈来圈来筛选纤维筛选纤维素分解菌素分解菌4.5.1、说说出分离分解出分离分解纤维纤维素的微生物素的微生物实验实验流程？流程？2、为为什么要在什么要在纤维纤维素丰富的素丰富的环环境中境中寻寻找找纤维纤维素分素分解菌？解菌？滤纸滤纸埋在土壤中有什么作用？埋在土壤中有什么作用？3、选择选择培养的目的？培养的目的？为为什么？什么？该实验该实验的的选择选择培养培养基基为为什么有什么有选择选择作用？按物理性作用？按物理性质质属哪种培养基？属哪种培养基？4、鉴鉴定定该细该细菌用的染料是？常用的菌用的染料是？常用的刚刚果果红红染色法染色法有几种？分有几种？分别别是？是？试评试评价其价其优优缺点缺点5、如何、如何进进一步确定得到的是一步确定得到的是纤维纤维素分解菌？素分解菌？纤维纤维素素酶酶发发酵的方法有？酵的方法有？纤维纤维素素酶酶的的测测定方法？定方法？二、二、实验设计实验设计及操作及操作（阅读阅读P28-30页页，讨论讨论回答）回答）6.实验实验操作：操作：土壤取土壤取样样选择选择培养培养梯度稀梯度稀释释将将样样品涂布到品涂布到鉴别纤维鉴别纤维素分解菌的培养基上素分解菌的培养基上挑挑选选产产生透明生透明圈的圈的菌落菌落7.土壤取土壤取样样取取样样的的环环境境？作出？作出这这种种选择选择的的理由理由是什么？是什么？选择纤维选择纤维素丰富的素丰富的环环境境，如，如树树林中多林中多年落叶形成的年落叶形成的腐殖土腐殖土，多年，多年积积累的枯枝累的枯枝败败叶等等。叶等等。生物与生物与环环境的相适境的相适应应关系关系，在富含，在富含纤纤维维素的素的环环境中境中纤维纤维素分解菌的含量相素分解菌的含量相对对提提高，因此从高，因此从这这种土壤中种土壤中获获得目的微生物的得目的微生物的几率要高于普通几率要高于普通环环境境8.选择选择培养培养1、选择选择培养的目的：培养的目的：增加增加纤维纤维素分解菌的素分解菌的浓浓度度，以确保能，以确保能够够从从样样品中分离到品中分离到所需要的微生物所需要的微生物2、选择选择培养基：培养基：参照参照课课本本29页页旁旁栏栏中的比例配置，回答下列中的比例配置，回答下列问题问题是液体培养基，原因是配方中无凝固是液体培养基，原因是配方中无凝固剂剂有有选择选择作用，本配方中的碳源是作用，本配方中的碳源是纤维纤维素，所以能分素，所以能分解解纤维纤维素的素的 微生物可以大量繁殖微生物可以大量繁殖用牛肉膏蛋白用牛肉膏蛋白胨胨培养基与之培养基与之对对照照a、旁、旁栏栏中是液体培养基中是液体培养基还还是固体培养基？是固体培养基？为为什么？什么？b、这这个培养基个培养基对对微生物是否具有微生物是否具有选择选择作用？作用？如果具有，是如何如果具有，是如何进进行行选择选择的？的？c、你能否、你能否设计设计一个一个对对照照实验实验，说说明明选择选择培养的作用培养的作用？9.为为什么什么选择选择培养能培养能够够“浓缩浓缩”所需的微生物？所需的微生物？在在选择选择培养的条件下，可以使那些培养的条件下，可以使那些能能够够适适应这应这种种营营养条件的微生物得到迅速繁殖，养条件的微生物得到迅速繁殖，而而那些不适那些不适应这应这种种营营养条件的微生物的繁殖被养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到抑制，因此可以起到“浓缩浓缩”的作用的作用10.刚刚果果红红染色法：染色法：方法一：方法一：先培养微生物，再加入先培养微生物，再加入刚刚果果红进红进行行颜颜色反色反应应方法二方法二：在倒平板在倒平板时时就加入就加入刚刚果果红红思考：思考：这这两种方法各有哪些两种方法各有哪些优优点与不足？点与不足？方法一方法一 缺点会使缺点会使菌落之菌落之间发间发生混生混杂杂；优优点是点是显显示示出的出的颜颜色反色反应应基本上是基本上是纤维纤维素分解菌的作用素分解菌的作用 方法二方法二 优优点是点是操作操作简简便便，不存在菌落混，不存在菌落混杂问题杂问题缺点一是由于培养基中缺点一是由于培养基中还还含有淀粉含有淀粉类类物物质质，可以，可以使能使能产产生淀粉生淀粉酶酶的微生物出的微生物出现现假阳性反假阳性反应应；缺点二；缺点二有些微有些微生物具有降解色素的能力生物具有降解色素的能力，它，它们们在在长时间长时间培养培养过过程中程中会降解会降解刚刚果果红红，形成明，形成明显显的透明圈，与的透明圈，与纤维纤维素分解菌素分解菌不易区分不易区分11.课题课题延伸延伸 本本课题对课题对分解分解纤维纤维素的微生物素的微生物进进行了初步的行了初步的筛选筛选，但是，但是这这只是分离只是分离纯纯化的第一步。化的第一步。为为确定得确定得到的是到的是纤维纤维素分解菌，素分解菌，还还需要需要进进行行发发酵酵产纤维产纤维素素酶酶的的实验实验，纤维纤维素素酶酶的的测测定方法一般是定方法一般是对纤维对纤维素素酶酶分解分解滤纸滤纸等等纤维纤维素素后所后所产产生的葡萄糖生的葡萄糖进进行定量行定量的的测测定。定。12.小结1 1、纤维纤维素的基本素的基本单单位和位和结结构？构？2 2、纤维纤维素素酶酶的的组组成及作用？成及作用？3 3、纤维纤维素分解菌的素分解菌的筛选筛选方法？方法？4 4、纤维纤维素分解菌的素分解菌的筛选筛选原理？原理？5 5、选择选择培养的目的？培养的目的？为为什么？什么？该实验该实验的的选择选择培养基培养基 为为什么有什么有选择选择作用？按物理性作用？按物理性质质属哪种培养基？属哪种培养基？6 6、鉴别鉴别培养基中培养基中鉴鉴定定细细菌用的染料是？常用的菌用的染料是？常用的刚刚果果红红染色法有几种？分染色法有几种？分别别是？是？试评试评价其价其优优缺点缺点7 7、如何、如何进进一步确定得到的是一步确定得到的是纤维纤维素分解菌？素分解菌？纤维纤维素素酶酶发发酵的方法有？酵的方法有？纤维纤维素素酶酶的的测测定方法？定方法？13.植物秸植物秸秆秆中的中的纤维纤维素可被某些微生物分解，回答下列素可被某些微生物分解，回答下列问题问题：（1 1）分解秸）分解秸秆秆中中纤维纤维素的微生物能分泌素的微生物能分泌纤维纤维素素酶酶，该该酶酶是由是由3 3种种组组分分组组成的复合成的复合酶酶，其中的葡萄糖苷，其中的葡萄糖苷酶酶可将可将 分解成分解成 （2 2）在含）在含纤维纤维素的培养基中加入素的培养基中加入刚刚果果红红（CR)CR)时时，CRCR可与可与纤维纤维素素形成形成 色复合物。用含有色复合物。用含有CRCR的的该该种培养基培养种培养基培养纤维纤维素分解菌素分解菌对对，培养基上会出，培养基上会出现现以以该该菌的菌落菌的菌落为为中心的中心的 （3 3）为为从富含从富含纤维纤维素的上壤中分离素的上壤中分离获获得得纤维纤维素分解菌的素分解菌的单单菌落，菌落，某同学某同学设计设计了甲、乙两种培养基（成分了甲、乙两种培养基（成分见见下表下表)：注：注：“+”“+”表示有，表示有，“-”“-”表示无。表示无。据表判断，培养基甲据表判断，培养基甲 填填“能能”或或“不能不能”用于分离和用于分离和鉴别纤维鉴别纤维素分解菌，原因是素分解菌，原因是 ；培养基乙；培养基乙 填填“能能”或或“不能不能”用于分离和用于分离和鉴别纤维鉴别纤维素分解菌，原因是素分解菌，原因是 14.（1）纤维二糖 葡萄糖（2）红 透明圈（3）不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌15.