微生物处理重金属污染.doc
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1、(完整版)微生物处理重金属污染微生物处理重金属污染摘 要:重金属污染的修复是目前研究的热点之一,其中生物治理技术尤其得到了广泛关注.利用菌类微生物的表面结构特性及其生化代谢作用,通过生物化学法、生物絮凝法等将重金属元素分离或降低其毒性,可达到治理污染的目的。基因工程技术在这一领域的应用,加强了菌类和微藻的吸附、代谢、絮凝功能,提高了重金属污染的处理能力。固定化技术的应用提高了治理重金属污染的效率及稳定性,有力地推动了重金属微生物治理技术的发展。文章综述了近年来国内外在利用微生物及植物技术治理重金属污染方面的研究进展,并对其发展方向进行了展望。关键词:重金属; 微生物; 研究现状; 应用前景Re
2、view on Microbiological for Heavy Metal PollutionLI DongxiaoAbstract:Development in the treatment of heavy metal pollution at home and abroad by means of microbiological techniques were summarized,and present studies and application prospects of Biological chemical method,Biological flocculation met
3、hod. the application of gene engineering technique and immobilized microorganism technique to heavy metal pollution treatment were introduced. The prospects of development of treatment technology for heavy metal pollution were also discussed.Key words:heavy metal pollution;microorganism;status; revi
4、ew1. 前言由于工业的发展,重金属的使用越来越广泛,伴随而来的重金属污染问题也日趋严重。特别是重金属废水,因其中的铅、铬、镉等可通过食物链最终在生物体内累积,破坏正常的生理代谢活动甚至产生“三致”(致癌、致畸、致突变)作用,而成为一种对生态环境危害极大的工业废水。因此,寻找一种能有效地治理重金属废水污染的技术已显得紧迫而重要。治理重金属的传统方法有:中和沉淀法、化学沉淀法、氧化还原法、气浮法、电解法、蒸发和凝固法、离子交换法、吸附法、溶剂萃取法、液膜法、反渗透和电渗析法等.它们各有优点,但又不同程度地存在着投资大、能耗高、操作困难、易产生二次污染等不足,特别是在处理低含量重金属污染时,其操作
5、费用和原材料成本相对过高1.利用微生物体系制备的生物吸附剂处理和回收重金属,是目前实践证明最有发展前途的一种新方法。它与传统的处理方法相比,具有以下优点2: (1)在低浓度下,金属可以被选择性地去除; (2)节能,处理效率高; (3)操作时的pH值和温度条件范围宽; (4)易于分离回收重金属; (5)吸附剂易再生利用; (6)对钙、镁离子吸附量少;(7)投资小,运行费用低,无二次污染。2. 重金属污染的微生物处理方法2.1 生物化学法生物化学法指通过微生物处理含重金属废水,将可溶性离子转化为不溶性化合物而去除。硫酸盐生物还原法是一种典型生物化学法,该法是在厌氧条件下硫酸盐还原菌通过异化的硫酸盐
6、还原作用,将硫酸盐还原成H2S,重金属离子和H2S反应生成溶解度很低的金属硫化物沉淀而被去除,同时H2SO4的还原作用可将SO24转化为S2-而使废水的pH值升高,从而形成重金属的氢氧化物而沉淀。中国科学院成都生物研究所从电镀污泥、废水及下水道铁管内分离筛选出35株菌株,从中获得高效净化Cr(VI)复合功能菌3。袁建军等4利用构建的高选择型基因工程菌生物富集模拟电解废水中的汞离子,发现电解废水中其他组分的存在可以增大重组菌富集汞离子的作用速率,且该基因工程菌能在很宽的pH范围内有效地富集汞。但高浓度的重金属废水对微生物毒性大,故此法有一定的局限性,不过,可以通过遗传工程、驯化或构造出具有特殊功
7、能的菌株,微生物处理重金属废水一定具有十分良好的应用前景。2.2 生物絮凝法生物絮凝法是利用微生物或微生物产生的具有絮凝能力的代谢物进行絮凝沉淀的一种除污方法。生物絮凝剂又称第三代絮凝剂,是带电荷的生物大分子,主要有蛋白质、黏多糖、纤维素和核糖等.目前普遍接受的絮凝机理是离子键、氢键结合学说。目前对于硅酸盐细菌絮凝法的应用研究已有很多5-6,有些已取得显著成果7.运用基因工程技术,在菌体中表达金属结合蛋白分离后,再固定到某些惰性载体表面,可获得高富集容量絮凝剂。Masaaki Terashima 等8利用转基因技术使 E。coli表达麦芽糖结合蛋白(pmal)与人金属硫蛋白(MT)的融合蛋白p
8、malMl并将纯化的 pmalMT 固定在Chitopeara 树脂上,研究其对 Ca2+和 Ga2+的吸附特性,该固定了融合蛋白的树脂具有较强的稳定性,并且其吸附能力较纯树脂提高十倍以上。2。3生物吸附法 生物吸附是对于经过一系列生物化学作用使重金属离子被微生物细胞吸附的概括理解,这些作用包括络合,螯合,离子交换,吸附等。活的微生物和死的微生物对重金属离子都有较大的吸附能力,藻类中的某些种属对于重金属的吸附容量可达400Hg/kg(生物干重),例如甲囊马尾藻(Sargassummatans)。 吸附法分为物理吸附法和离子吸附法两种,前者使用具有高度吸附能力的硅胶、活性碳、多孔玻璃、石英砂和纤
9、维素等,吸附剂将生物细胞吸附到表面上使之固定化。这是一种最古老的方法,操作简单,反应条件温和,载体可反复利用,但结合不牢固,细胞易脱落。后者根据细胞在离解状态下可因静电引力(即离子键合作用)而固着于带有异相电荷的离子交换剂上,如DEAE2纤维素、DEAE2Sephadex,CM2纤维素等。 Green使用藻类去除水的金,Tsezos,Mara2no使用真菌吸附水中的铀,Ferguson和Breuer等利用泥炭藓去除水中的Fe,Al,Pb,Cu,Cd,Zn等金属离子。Barkley利用藻类吸附有机废水中的Cd,Cu等金属离子.MarkSpinti等把泥炭藓固定在多孔的聚合砜基质中成功地应用于去除
10、含Zn,Cd,Mg等金属离子的酸性矿井水中,用聚合砜固定泥炭藓制成的球状小粒机械强度大,化学性能稳定,容易再生,不膨胀不收缩。生物吸附法以其独特的优点近年来在含重金属废水处理领域引起了人们普遍的关注,进行了广泛的研究,取得了可喜的成果.但生物吸附技术还只是处于经验、实验室阶段,在实用化和工业化应用中还存在着诸多问题有待研究解决,还需通过进一步的研究和开发工作完善此项技术。3. 重金属污染微生物处理技术3.1基因工程技术在微生物治理重金属污染中的应用运用基因工程技术构建具有高效降解能力的菌株是目前的研究热点,国内外学者均进行了大量研究,主要致力于应用基因工程技术,在微生物表面表达特异性金属结合蛋
11、白或金属结合肽进而提高富集容量,或在微生物细胞膜处表达特异性金属转运系统的同时,在细胞内表达金属结合蛋白或金属结合肽,从而获得具有高富集容量和高选择性的高效菌株.构建出的菌株处理能力均显著提高,高选择性重组菌的构建使得重金属的再资源化成为可能9.由于人们对大肠杆菌的认识较深入,且其具有致病性弱,对生长环境要求不高,易于检查和培养的优点,适于作污水处理菌。由于人们对大肠杆菌的认识较深入,且其具有致病性弱,对生长环境要求不高,易于检查和培养的优点,适于作污水处理菌。目前研究中多以大肠杆菌为受体菌,运用基因重组技术构建出多种高效菌株10。Deng 等11构建的基因重组菌 E.coli JM10,在含
12、镍废水的处理试验中,对 Ni2+富集能力比原始菌株增加了6 倍多.Zhao 等12的研究表明,基因工程菌 E。coli JM109较宿主菌具有更强的 Hg2+耐受性和更高的 Hg2+富集量,去除率达 96%以上。 Sousa 等13构建了表达酵母金属硫蛋白(CUP1)、哺乳动物金属硫蛋白(HMT21A)和外膜蛋 LamB 的融合蛋白的基因工程菌 E。coli,该菌种的 Cd2+富集能力比原始宿主菌提高 15 倍20 倍。邓旭等14研究了转MTlike 基因衣藻对不同重金属离子的抗性和对 Cd2+富集行为,结果表明,转基因衣藻对 Pb2+、Zn2+和Cd2+三种重金属离子的抗性得到明显增强,其中
13、以对Zn2+的抗性增强最为显著。转基因藻对 Cd2+的富集能力经 MTlike 蛋白表达后较野生藻细胞有较大增加,最大达到 144。48mol/g ,为野生藻的 8。3 倍。曾文炉等15以转 mMT-聚球藻 7002 为对象,研究了其在含 Cd2+、Pb2+和 Hg2+的培养基中的生长特性及其对重金属的净化性能,结果表明,无论从生长速率还是对重金属的耐受特性来看,转 mMT-聚球藻 7002 均明显优于野生藻。3。2固定化技术在微生物治理重金属废水中的应用固定化微生物技术是通过采用化学或物理的方法将游离微生物定位于限定的空间区域内,使其保持活性并可反复利用的一种新型生物技术16。具有微生物细胞
14、密度高、反应速度快、稳定性强、耐毒害能力强、微生物流失少、产物分离容易和剩余污泥少等优点。利用此技术,可将筛选出的优势微生物(主要是菌体和藻类)加以固定,构成一种高效、快速、能连续处理的废水处理系统,可以有效地减少二次污染17Kacar等18用海藻酸钙固定真菌(Phanerochaete chrysosporium)(包括活的和加热灭活的2种形态菌体),去除30500 g/L的含Hg()和Cd()的废水。吸附平衡为1 h,最佳pH值分别为5。 0和60;适宜温度为l545。用10 mmol/LHCl解析,回收吸附率达原来的97。是一种新型有效的生物吸附剂。Chang等19则是利用假单孢兰绿藻(
15、Pseudomonas aerugi-nosaPu 21)制备了2种固定化生物吸附剂:一种是用死的微生物细胞制备的,一种是用活的微生物细胞制备的。实验表明,假单孢兰绿藻活的和死的细胞对重金属离子Pb、Cu和Cd都具有很大的吸附能力,活的比死的细胞吸附能力大.不同生长阶段的假单孢兰绿藻对Pb、Cd显示出不同的吸附能力.随着溶液pH值的增加,其吸附能力增强。pH最佳范围在5060之间.用稀盐酸解吸后,对于Pb、Cu的吸附能力仍保持在原吸附能力的98%以上,对Cd的吸附能力保持在80以上.以上大量研究表明,固定化菌类和藻类可以有效地去除废水中的重金属。固定化微生物细胞用来富集重金属,实际上起着生物离
16、子交换树脂的作用,但固定化细胞比离子交换更经济,且不受Ca2+、Mg2+、Na+和K+等离子的影响20,在废水处理和受污染水环境的修复中更实用.因此,固定化微生物技术在处理重金属废水领域中有着广阔的应用前景。3。3淋滤技术在微生物治理重金属污染中的应用利用微生物的直接转化作用或其代谢产物的间接转化作用 ,产生氧化、还原、络合、吸附或溶解作用,将固相中某些不溶性成分(如重金属、硫及其它金属)分离浸提出来的一种技术。用于难浸提矿石或贫矿中金属的溶出与回收,又称微生物湿法冶金。一些嗜酸细菌被广泛用于铜、金等金属的浸提。如在氧化亚铁硫杆菌、氧化硫硫杆菌作用下,污泥中难溶性金属硫化物被氧化成金属硫酸盐而
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