发酵罐灭菌.doc
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1、发酵罐操作与灭菌技术常用的灭菌技术一般分为;物理灭菌和化学灭菌。物理灭菌又包括湿热灭菌、干热灭菌、射线灭菌法和过滤灭菌等。而化学灭菌主要是使用化学试剂(如甲醛、苯酚、新洁尔灭、过氧乙酸、高锰酸钾等)进行某些容器或物料以及无菌区域的灭菌。在生物发酵方面,常用的设备是机械搅拌式发酵,其杀菌效果的好坏直接影响到发酵是否能正常进行。由于工业操作的特点,发酵罐灭菌普遍采用湿热灭菌法。 一小型发酵罐操作和酵母菌培养实验室所使用的小型通气搅拌发酵罐具有体积小,耗电少,不宜染菌,单位时间、单位体积的生产力高,代谢放出热量易于移去,操作控制和维修方便等特点,因此能较好的满足微生物的生长和代谢的需要。1.设备和材
2、料1L发酵罐、5L发酵罐、50L发酵罐、一套空气除菌系统、供检查无菌用的肉汤培养基和装置。2.发酵罐操作步骤2.1发酵罐的清洗发酵罐使用前后都应认真清洗,特别是前后两次培养采用不同的菌株时,更应注意清洗和杀菌工作。发酵罐内可进行清洗的任何部分都应认真清洗,否则都可能成为杂菌的滋生地。易被忽略而不能充分清洗的地方有喷嘴角内部与取样管内以及罐顶等处。2.2 种子培养基及培养条件蛋白胨10g,葡萄糖40g,蒸馏水100ml,pH自然。500ml三角瓶装液量100ml,115,灭菌20min。培养条件:用接种环从保存斜面中接一环至三角瓶中,150r/min,28,摇瓶培养48h。2.3 发酵罐的组装工
3、作 连接好冷却水管。若采用自来水冷却,连接部要充分牢固,并且注意连接管管径与自来水管管径一致,尽可能采用耐压管。由于通入的空气有一定压力,应注意连接压缩空气的管子应能承受一定压力。安装pH及溶解氧等检测装置,注意各接线口不要出现差错。由于操作过程要和水打交道,故线路连接一定要注意安全,要特别注意防止漏电。2.4 发酵罐灭菌 排气管为玻璃管,内装有棉花,以保证蒸汽能自由出入发酵罐,同时不会出现染菌现象。 取样口上连接一段硅胶管,在硅胶管上安装节流夹,以防止培养基在灭菌是流出。 装入发酵罐溶积60%的培养基(成分同种子培养基)后,将发酵罐放入灭菌釜内,在115下,灭菌20min。当灭菌完成后,温度
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