常用标本的采集原则与方法.ppt

标本采集方法标本采集方法 标本的定义：是指采取患者少许的标本的定义：是指采取患者少许的血液血液、排泄物排泄物（粪、尿）、（粪、尿）、分泌物分泌物（痰、鼻分泌物）、呕吐物、（痰、鼻分泌物）、呕吐物、体液（胸腔积液、腹腔积液）和体液（胸腔积液、腹腔积液）和脱落细胞脱落细胞（食道、（食道、阴道）等样品，阴道）等样品，经过物理、化学和生物学的实验室技术和方经过物理、化学和生物学的实验室技术和方法对其进行检验，作为判断患者有无异常存在的法对其进行检验，作为判断患者有无异常存在的依据。依据。本章重点：本章重点：v掌握标本采集的原则掌握标本采集的原则v掌握痰标本、血标本、尿标本、掌握痰标本、血标本、尿标本、粪标本的采集方法粪标本的采集方法 标本采集的意义标本采集的意义v明确诊断明确诊断v观察病情观察病情v指导制定治疗措施指导制定治疗措施标本采集的原则标本采集的原则v遵照医嘱遵照医嘱v充分准备：充分准备：1）患者准备）患者准备 2）用物准备）用物准备 3）护士自身准备）护士自身准备v严格查对：检查项目、患者姓名、床号、严格查对：检查项目、患者姓名、床号、住院号住院号v正确采集：方法、时间、量、容器正确采集：方法、时间、量、容器v及时送检及时送检v明确检验项目、检验目的及注意事项明确检验项目、检验目的及注意事项v标本的容器贴好标签，附上验单：患者的姓名、标本的容器贴好标签，附上验单：患者的姓名、科室、床号、住院号、送检目的、送检日期和时科室、床号、住院号、送检目的、送检日期和时间等间等v每次采集血标本时应做到每次采集血标本时应做到“三个一三个一”：一患者、：一患者、一化验单、一容器一化验单、一容器v一般培养标本的采集应在使用抗生素之前一般培养标本的采集应在使用抗生素之前 culture各种标本的采集各种标本的采集一、痰标本的采集一、痰标本的采集二、咽拭子标本的采集二、咽拭子标本的采集三、尿标本的采集三、尿标本的采集四、粪便标本的采集四、粪便标本的采集五、血液标本的采集五、血液标本的采集 各种标本的采集各种标本的采集一、痰液标本的采集一、痰液标本的采集痰常规标本痰常规标本痰培养标本痰培养标本24小时痰标本小时痰标本三种痰标本的区别三种痰标本的区别 分类分类 目的目的痰常规标本痰常规标本痰液一般形状，涂片查细痰液一般形状，涂片查细胞、细菌、虫卵等胞、细菌、虫卵等痰培养标本痰培养标本痰中的致病菌痰中的致病菌24小时痰标本小时痰标本24小时痰液的量和性状小时痰液的量和性状 分分 类类 用物用物痰常规标本痰常规标本普通容器，普通容器，痰盒痰盒痰培养标本痰培养标本无菌集痰器无菌集痰器，漱口液，漱口液24小时痰标本小时痰标本500ml的广口玻璃瓶，的广口玻璃瓶，内盛少量清水内盛少量清水共同点：验单共同点：验单 分分 类类 采集方法采集方法痰常规标本痰常规标本幻幻灯片灯片 10能自理的患者能自理的患者；无法咳痰或不合作者无法咳痰或不合作者痰培养标本痰培养标本步骤基本同上。不同的是步骤基本同上。不同的是先先用漱口液漱口用漱口液漱口，再用清水漱，再用清水漱口；无菌容器，无菌操作。口；无菌容器，无菌操作。24小时痰标本小时痰标本 从晨从晨7时时次晨次晨7时第一口痰时第一口痰结束。全部痰液留在容器中结束。全部痰液留在容器中送检。送检。能自理的患者：能自理的患者：晨起后用清水漱口晨起后用清水漱口 以清晨第一口痰为宜以清晨第一口痰为宜 深吸气后用力咳出气管深处的痰液深吸气后用力咳出气管深处的痰液 不可混入漱口液、唾液、鼻涕等不可混入漱口液、唾液、鼻涕等 无法咳痰或不合作者：无法咳痰或不合作者：用吸痰法收集（集痰器）用吸痰法收集（集痰器）痰标本采集注意事项痰标本采集注意事项1、如查癌细胞，应立即送检或用、如查癌细胞，应立即送检或用95%乙醇或用乙醇或用10%甲醛固定后送检甲醛固定后送检2、不可将唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中、不可将唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中3、收集痰液宜在清晨，因此时痰量较多，痰内细、收集痰液宜在清晨，因此时痰量较多，痰内细菌也较多，提高阳性率。菌也较多，提高阳性率。痰培养标本采集与运送病原体种类繁多而复杂病原体种类繁多而复杂使下呼吸道感染病原诊断成为难题细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与分枝杆菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原体、衣原体与立克次体原虫寄生虫咳痰途经口咽部咳痰途经口咽部v唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。v研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。不可避免地受到污染我国痰细菌培养现状v标本送检率低v苛养菌检出率极低v结果重复性差v报告速度慢v感染菌与污染菌不易区分v药敏结果与治疗反应存在差距咳痰标本的采集v标本采集方法医师或护士直视下采集标本医师或护士直视下采集标本病人先漱口，去除表面的菌群病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液痰液v临床上约半数咳痰标本不合格！关于咳痰标本v在抗生素应用前采集痰标本;v标本采集后12h内必须立即进行实验室处理v咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本 v取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口v深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导v无痰可用35NaCl 5ml雾吸约5min导痰v也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰几种下呼吸道直接采集的标本v经气管穿刺吸引（transtracheal aspiration,TTA）v经胸壁针刺吸引（transthoracic needle aspiration,TNA）v经支气管镜采样 支气管肺泡灌洗（支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage,BAL）经支气管镜直接吸引经支气管镜直接吸引防污染样本毛刷（防污染样本毛刷（protective specimen brush,PSB）v开胸肺活检（open-lung biopsy，OLB）v经人工气道吸引分泌物（endotracheal aspirates，ETA）痰培养的送检次数v对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续23天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变；v怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检；v怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送检次数尚无定论。痰培养的运送和保存v尽快（2h）送至实验室。v如不能及时送达，应将标本暂存于4，但放置时间不可超过24h。v厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。v被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。二、咽拭子标本采集二、咽拭子标本采集 目标：从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培目标：从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培养或病毒分离，协助诊断。养或病毒分离，协助诊断。操作步骤及要点操作步骤及要点操作前准备操作前准备 核对核对点燃酒精灯，指导患者张口发点燃酒精灯，指导患者张口发“啊啊”音，音，用长棉签蘸用长棉签蘸 以敏捷、轻柔的动作擦拭以敏捷、轻柔的动作擦拭两侧腭弓、咽扁桃体上的分泌物，取毕，两侧腭弓、咽扁桃体上的分泌物，取毕，将试管口及棉塞在酒精灯火焰上消毒后将试管口及棉塞在酒精灯火焰上消毒后插入棉签，塞紧。插入棉签，塞紧。将棉签插入将棉签插入试管中送检试管中送检 咽拭子标本采集注意事项咽拭子标本采集注意事项v作真菌培养时，须在口腔溃疡面采集分泌物作真菌培养时，须在口腔溃疡面采集分泌物v避免交叉感染避免交叉感染v注意棉签不要触及其它部位，防止污染标本，影注意棉签不要触及其它部位，防止污染标本，影响其他结果响其他结果v避免在进食避免在进食2小时内采集标本，以防呕吐小时内采集标本，以防呕吐上呼吸道标本上呼吸道感染：v绝大部分呼吸道感染局限于绝大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部部位；位；v导致导致咽痛、鼻涕、常常会发热。感染喉部、中耳、鼻窦炎、结膜炎或角膜炎。v可能与严重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和传可能与严重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和传染性单核细胞增多症并存。染性单核细胞增多症并存。不同的采样拭子对标本的检测结果有影响吗?棉+木棍抑抑菌菌区区域域的的产产生生由由于于棉棉中中所所含含的的脂脂肪肪酸酸以以及及从从木木棒棒中中渗渗出的树脂和甲醛。出的树脂和甲醛。三、尿标本的采集三、尿标本的采集 尿标本的分类尿标本的分类v尿常规标本尿常规标本v尿培养标本尿培养标本v12h或或24h尿标本尿标本1、尿常规标本、尿常规标本 查尿液的性状，有无管型和细胞，并作尿蛋白和查尿液的性状，有无管型和细胞，并作尿蛋白和尿糖的定性检测尿糖的定性检测用物准备：一次性尿杯用物准备：一次性尿杯自理的病人：清晨首次尿，自理的病人：清晨首次尿，1/3到到1/2杯杯留置导尿：集尿袋中放出尿液留置导尿：集尿袋中放出尿液2、尿培养标本、尿培养标本 用于细菌培养和细菌敏感试验用于细菌培养和细菌敏感试验 用物：用物：中段尿留取法：中段尿留取法：1、导尿术、导尿术2、按导尿术清洁外阴、尿道口、按导尿术清洁外阴、尿道口嘱患者排去前段嘱患者排去前段尿尿用试管留取用试管留取5-10ml中段尿液中段尿液尿培养标本采集与运送你知道吗？v尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内或尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致错误的培养结果。v诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够，治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人，需采集2-3份标本。怀疑肾结核时，应连续3天采集晨尿。v多次收集或24小时尿不能用作培养。v申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液标本。v室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若30min内不能及时培养尿液则必须冷藏，但也不能超过24小时。尿培养标本 v清洁中段尿v导尿导管尿v经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液v送检标本以晨起第一次尿液为佳v不能立即送检者，可暂存4冰箱，但保存不超过8h清洁中段尿液v尽量取早晨第一次尿液v弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿v详细告知病人以下操作步骤v女性病人收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔细擦洗细擦洗尿道区域尿道区域分开阴唇，开始排尿分开阴唇，开始排尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿v男性病人回缩包皮并清洗龟头回缩包皮并清洗龟头排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿导尿管尿液v集尿袋内的尿液不能用作培养；v导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难避免没有尿道菌群污染。v留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。v采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过30分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中耻骨上穿刺吸取尿液v常用于患儿、泌尿道厌氧菌感染或脊柱损伤病人等。v可避免尿道或会阴细菌的污染，但对膀胱内少量尿液的小儿难以实施。v方法：消毒自脐以下至尿道之间区域的皮肤，局麻穿刺点部位；在耻骨联合与脐连线上，高于耻骨联合2cm处进针刺入膀胱；取20ml尿液；置于无菌容器中并送往实验室。v可用于厌氧菌检测3、12h或或24h尿标本尿标本 尿生化或尿浓缩查结核杆菌尿生化或尿浓缩查结核杆菌 7pm(am)排空膀胱排空膀胱翌日翌日7am 请病人先把尿液排到便盆或便壶内，再置于请病人先把尿液排到便盆或便壶内，再置于3000-5000ml带盖的清洁容器内。带盖的清洁容器内。用物：容器（用物：容器（30005000ml）防腐剂防腐剂 常用防腐剂：常用防腐剂：甲醛：甲醛：防腐和固定，用于作防腐和固定，用于作尿爱迪计数尿爱迪计数（12小时尿细小时尿细胞计数）等胞计数）等每每30ml尿液加尿液加 40%甲醛液甲醛液1滴滴 浓盐酸：浓盐酸：作用：保持尿液在酸性环境中，防止尿中激素被作用：保持尿液在酸性环境中，防止尿中激素被氧化。常用于氧化。常用于内分泌系统的检验内分泌系统的检验，如，如17-酮类固酮类固醇、醇、17-羟类固醇羟类固醇24小时尿中加小时尿中加5-10ml 甲苯：甲苯：保持尿液的化学成分不变，常用作保持尿液的化学成分不变，常用作尿蛋白、尿糖尿蛋白、尿糖的定量测定。的定量测定。用法：每用法：每100ml尿液中加入尿液中加入0.5%1%甲苯甲苯2ml，使之形成一薄膜，覆盖于尿液的表面，防，使之形成一薄膜，覆盖于尿液的表面，防止细菌感染。如果测定尿中的钠、钾、氯、肌酐止细菌感染。如果测定尿中的钠、钾、氯、肌酐、肌酸等需加、肌酸等需加10ml。尿标本采集注意事项尿标本采集注意事项女患者月经期不宜留取尿标本女患者月经期不宜留取尿标本会阴部分泌物过多时，应先清洁再冲洗，再收集。会阴部分泌物过多时，应先清洁再冲洗，再收集。做早孕检查试验应留晨尿做早孕检查试验应留晨尿留取尿培养标本时，无菌操作留取尿培养标本时，无菌操作留取留取12h或或24h尿标本，集尿瓶应放在阴凉处，尿标本，集尿瓶应放在阴凉处，根据检验要求加防腐剂。根据检验要求加防腐剂。四、粪便标本采集四、粪便标本采集意义、目的：意义、目的：1、了解消化道炎症、梗阻、出血、寄生虫感染等、了解消化道炎症、梗阻、出血、寄生虫感染等2、了解消化道状况，粗略判断胰腺的外分泌功能、了解消化道状况，粗略判断胰腺的外分泌功能3、粪便隐血可作为消化道恶性肿瘤的诊断筛查试验、粪便隐血可作为消化道恶性肿瘤的诊断筛查试验4、检查粪便中有无细菌感染，防止肠道感染、检查粪便中有无细菌感染，防止肠道感染 种类种类 目的目的 容器容器常规标本常规标本查一般形状查一般形状便盒便盒细菌培养标本细菌培养标本查致病菌查致病菌培养瓶培养瓶隐血标本隐血标本查肉眼不能察见的微量血液查肉眼不能察见的微量血液便盒便盒寄生虫或虫卵标本寄生虫或虫卵标本查寄生虫查寄生虫便盒便盒v便盒便盒v大便培养大便培养种类种类操作要点操作要点常规标本常规标本排空膀胱。异常粪便挑取有排空膀胱。异常粪便挑取有脓血、粘液脓血、粘液的部分；外观无异常的粪便应从中央取的部分；外观无异常的粪便应从中央取材，材，2-5g大小大小细菌培养标本细菌培养标本用用无菌棉签无菌棉签取中央部分或脓血、粘液部取中央部分或脓血、粘液部分分2-5g致培养瓶内，塞紧瓶盖。致培养瓶内，塞紧瓶盖。隐血标本（隐血标本（OB）检查前检查前3天禁食肉类、肝、血、含大量天禁食肉类、肝、血、含大量绿叶素的食物或含铁剂药物绿叶素的食物或含铁剂药物，三天后留，三天后留取标本送检。取标本送检。寄生虫或虫卵标寄生虫或虫卵标本本虫卵：不同部位的异常粪便虫卵：不同部位的异常粪便5-10g蟯虫：用透明胶带粘肛门周围蟯虫：用透明胶带粘肛门周围阿米巴：便器加热致人体体温阿米巴：便器加热致人体体温采集粪便标本的注意事项：采集粪便标本的注意事项：1、采集培养标本时，如患者无便意，用长无菌棉、采集培养标本时，如患者无便意，用长无菌棉签蘸生理盐水，由肛门插入签蘸生理盐水，由肛门插入6-7cm，顺一个方，顺一个方向轻轻旋转后取出，将棉签插入培养试管内，盖向轻轻旋转后取出，将棉签插入培养试管内，盖紧送检。紧送检。2、病人服用驱虫药或做血吸虫孵化实验，应留取、病人服用驱虫药或做血吸虫孵化实验，应留取全部粪便送检。全部粪便送检。3、患者如有腹泻，水样便应盛于便盆内送检、患者如有腹泻，水样便应盛于便盆内送检五、血液标本的采集五、血液标本的采集血标本的分类和目的血标本的分类和目的全血：用作血沉、血常规和测定血液中某些物质的全血：用作血沉、血常规和测定血液中某些物质的含量，如肌酐、尿素氮、尿酸、血糖等含量，如肌酐、尿素氮、尿酸、血糖等血清：全血自然凝固后析出的液体血清：全血自然凝固后析出的液体,用于生物化学、用于生物化学、免疫学检测等，如血清酶、脂类、电解质、肝功免疫学检测等，如血清酶、脂类、电解质、肝功能能血培养标本：查找血液中的致病菌血培养标本：查找血液中的致病菌采集法采集法1、静脉采血法、静脉采血法 全血全血 血清血清 血培养血培养2、动脉血标本采集法、动脉血标本采集法 常用于常用于血气分析血气分析3、毛细血管采集法毛细血管采集法 常用于血常规检查常用于血常规检查常用抗凝剂EDTA(乙二胺四乙酸乙二胺四乙酸)通过与血中钙离子形成螯合物通过与血中钙离子形成螯合物,从而阻止血液凝固从而阻止血液凝固 常用类型:lK2EDTA:EDTA二钾 塑料试管以喷雾状态抗凝.ICSH推荐.需充分混匀lK3EDTA:EDTA三钾(玻璃试管以液体状态抗凝)可能因采血量不足液体抗凝剂对标本有稀释作用,从而导致错误的实验结果lNa2EDTA:EDTA二钠应用:常规液学实验,输血前试验,糖化血红蛋白(HbA1C),血红蛋白电泳现象分析.枸橼酸钠枸橼酸钠:如血凝（如血凝（1 1：9 9）、血沉（）、血沉（1 1：4 4）肝素：如血黏液肝素：如血黏液 氟化钠氟化钠(固体固体)草酸钾类似草酸钾类似EDTA都是通过去除都是通过去除 血液中的钙而达到抗凝作用血液中的钙而达到抗凝作用.氟化钠帮助保存分析前的血糖氟化钠帮助保存分析前的血糖.-血血糖保存剂糖保存剂 ACD(液体液体)v促凝剂：促凝剂：v矾土水泥，以铝矾土和石灰石为原料，经锻炼制成矾土水泥，以铝矾土和石灰石为原料，经锻炼制成v纤维蛋白原纤维蛋白原常用抗凝剂肝素通过阻止凝血途径的最后一步骤而起到抗凝作通过阻止凝血途径的最后一步骤而起到抗凝作用用.通常使用的形式通常使用的形式:l肝素锂l肝素钠 某些情况下某些情况下,也可能使用肝素氨也可能使用肝素氨应用:特殊化学试验、血流变学、检测 定性的表面抗源、血浆生化、急 诊生化，不适合做电解质常用抗凝剂枸橼酸三钠 只有一种形式只有一种形式,但有不同的浓度但有不同的浓度.0.105 mol/L(约为约为 3.1%浓度浓度)新的塑料枸橼酸钠试管使用新的塑料枸橼酸钠试管使用0.109 mol/L(约为约为 3.2%)0.129 mol/L(约为约为3.8%concentration)NCCLS推荐使用低浓度的抗凝剂推荐使用低浓度的抗凝剂(0.105 0.109 mol/L)v抗凝剂与血液的比例是19应用:凝血试验(抗凝药物的监测,凝血因子分析)常用抗凝剂氟化钠/草酸钾 草酸钾类似草酸钾类似EDTA都是通过去除都是通过去除 血液中的钙而血液中的钙而达到抗凝作用达到抗凝作用.氟化钠帮助保存分析前的血糖氟化钠帮助保存分析前的血糖.应用应用:血浆中血糖分析血浆中血糖分析 GTT(葡萄糖耐量试验葡萄糖耐量试验常用抗凝剂枸橼酸钠v 血沉试验要求的枸橼酸钠浓血沉试验要求的枸橼酸钠浓 度是度是3.8%（相当于（相当于0.129mol/L）注意：抗凝剂与血液的比例 为14添加剂添加剂(分离胶分离胶)SST 和PST 分离胶试管l化学惰性物,触变*聚酯或丙稀酸具有一定密度的媒介物存在于血浆/血清和血细胞.l离心后在血浆/血清和血细胞之间 起到屏障隔离作用.u 粘质变化(可逆的)根据使用的离心 力(例如,rcf)添加剂添加剂(促凝剂促凝剂)促凝剂(硅化物)l在塑料试管内壁有混浊的添加剂涂层在塑料试管内壁有混浊的添加剂涂层l含有促凝剂的试管含有促凝剂的试管必须必须颠倒混匀颠倒混匀.(混匀缩短了凝血时间混匀缩短了凝血时间,加快了血块收缩和血清的加快了血块收缩和血清的吸出吸出,避免了过多的表面活性剂的浓度避免了过多的表面活性剂的浓度KHB 真空采血管产品基本类型真空采血管产品基本类型 头盖颜色临床用途标本类型制 备 步 骤添 加 剂 红色血清生化血清采血后不需颠倒混匀静置1小时 离心 无（内壁涂有血液附壁防止剂）黄色快速血清生化试验 血清采血后立即颠倒混匀8次静置20分钟离心 分离胶、促凝剂（内壁涂有血液附壁防止剂）橙色快速血清生化试验血清采血后立即颠倒混匀 8次静置20分钟离心促凝剂：纤维蛋白酶（内壁涂有血液附壁防止剂）浅蓝色血凝试验血浆采血后立即颠倒混匀 8次离心抗凝剂：柠檬酸钠与血样比为1:9 灰色血糖试验血浆采血后立即颠倒混匀 8次离心抗凝剂：EDTA，氟化钠 绿色快速血浆生化血流变试验血浆采血后立即颠倒混匀 8次离心抗凝剂：肝素锂或肝素钠 浅绿色快速血浆生化试验血浆采血后立即颠倒混匀 8次离心分离胶，肝素锂 紫色血液学常规 全血实验全血采血后立即颠倒混匀 8次试验前混匀标本抗凝剂：EDTA-2K或EDTA-3K 黑色血沉试验全血采血后立即颠倒混匀 8次使用前混匀标本抗凝剂：柠檬酸钠与血样比为1：4血常规管 适用于血常规、血型鉴定、适用于血常规、血型鉴定、交叉配血试验及临床血液交叉配血试验及临床血液学检查，并适用于血气分学检查，并适用于血气分析、糖化血红蛋白、药物析、糖化血红蛋白、药物浓度测定、心梗三项、肌浓度测定、心梗三项、肌钙蛋白钙蛋白、B型尿钠肽前型尿钠肽前体体抗凝剂：抗凝剂：EDTA-K2、EDTA-K3血液标本量最少为血液标本量最少为1ml 采血后立即颠倒采血后立即颠倒180度摇匀度摇匀5-8次次血沉管适用于血沉（ESR)检测抗凝剂：柠檬0.129mol/L 抗凝剂与血样的体积比(1：4)采血后立即颠倒180度摇匀5-8次血凝管适用于PT、APTT、PT、D-二聚体、凝血因子检测等。抗凝剂：柠檬酸钠0.129mol/L抗凝剂与血样的体积比(1：9)采血后立即颠倒180度摇匀5-8次肝素管适用于急诊生化、血粘度等检测、血氨（淡绿色）抗凝剂：肝素锂、肝素钠肝素锂除具备肝素钠的特性，还可以用于微量元素的检测血粘度检测血标本用量5mL采血后立即颠倒180度摇匀5-8次普通管适用于临床生物化学、免疫学标本、各种病毒检测、微量元素检测（淡绿色肝素管）、血库检查血液标本未添加任何抗凝或促凝成分。由于检测项目多，血标本尽量抽足分离胶促凝管v用于临床生化学、免疫学用于临床生化学、免疫学检查、药物检测检查、药物检测v添加惰性分离胶与促凝剂，添加惰性分离胶与促凝剂，加速血液凝固，它具有加速血液凝固，它具有操作温度范围广，凝血操作温度范围广，凝血速度快，无纤维蛋白二速度快，无纤维蛋白二次析出现象等优点次析出现象等优点v采血后立即颠倒采血后立即颠倒180度度摇匀摇匀5-8次次血糖管血糖管v用于血糖、糖耐量、红细用于血糖、糖耐量、红细胞电泳、抗碱性血红蛋胞电泳、抗碱性血红蛋白、糖溶血等项目白、糖溶血等项目v抑制性抗凝剂有效阻止血抑制性抗凝剂有效阻止血糖代谢，确保血糖糖代谢，确保血糖72小小时内检测恒定时内检测恒定 抗凝剂：EDTA，氟化钠v采血后立即颠倒采血后立即颠倒180度度摇匀摇匀5-8次次采血顺序 促凝剂促凝剂 +分离胶分离胶 促凝剂促凝剂 3.2%3.2%柠檬酸钠柠檬酸钠 与血样比与血样比1 19 9 肝素锂肝素锂 肝素钠肝素钠 EDTA-KEDTA-K2 2 EDTA-K EDTA-K3 3 氟化钠氟化钠 +草酸钾草酸钾 氟化钠氟化钠 +EDTA+EDTA 3.8%3.8%柠檬酸钠柠檬酸钠 与血样比与血样比1 14 4v特别注意特别注意:vEDTA管（紫）绝对不能放在血清管前，因其中管（紫）绝对不能放在血清管前，因其中的钾可能对血清造成污染，特别会使血钾增高。的钾可能对血清造成污染，特别会使血钾增高。v采血管数较多时，凝血管先采十分必要，因为随采血管数较多时，凝血管先采十分必要，因为随着采血时间的延长，凝血因子会发生变化。但不着采血时间的延长，凝血因子会发生变化。但不建议首采，建议首采，促肾上腺皮质激素彻底（ACTH）v临床免疫多采用普通试管（红色）或分离胶管临床免疫多采用普通试管（红色）或分离胶管（黄色）（黄色）vACTH采用的是血常规管（紫色）采用的是血常规管（紫色）23mlv注意定点采血：早注意定点采血：早8点或点或4点采血标本，点采血标本，ACTH分子不稳定，采集后立即送检或置于分子不稳定，采集后立即送检或置于48冰箱。冰箱。v注意：试管需要事先冷藏。注意：试管需要事先冷藏。vACTH受应激影响大，故抽血前应事先留置导管受应激影响大，故抽血前应事先留置导管v测基础测基础ACTH时，患者清晨空腹、卧床（时，患者清晨空腹、卧床（4am后不再起床），后不再起床），8am由事先留置静脉导管抽血由事先留置静脉导管抽血口服葡萄糖耐量（OGTT）试验v早餐空腹取血（空腹早餐空腹取血（空腹8-14小时后），取血后于小时后），取血后于5分钟内服完溶于分钟内服完溶于250-300ml水内的无水葡萄糖水内的无水葡萄糖75g（如用（如用1分子结晶水葡萄糖，则为分子结晶水葡萄糖，则为82.5g）v实验过程中不喝任何饮料，不吸烟、不做剧烈运动、实验过程中不喝任何饮料，不吸烟、不做剧烈运动、无须卧床无须卧床v从口服第一口糖水记时，于服糖后从口服第一口糖水记时，于服糖后30分钟、分钟、1小小时、时、2小时及小时及3小时取血标本小时取血标本v试验前试验前3日每日碳水化合物摄入量不少于日每日碳水化合物摄入量不少于150g（3两）两）v试验前停用影响试验前停用影响OGTT的药物，如避孕药、利尿剂、的药物，如避孕药、利尿剂、-肾上腺能阻滞剂、苯妥因钠、烟酸肾上腺能阻滞剂、苯妥因钠、烟酸3-7天，服天，服用糖皮质激素者不做用糖皮质激素者不做OGTT试验试验 血脂类测定 v要求患者素食三天，空腹要求患者素食三天，空腹抽血，抽血前抽血，抽血前24小时不要小时不要做剧烈运动及饮酒做剧烈运动及饮酒内分泌系列检测v注意患者生理期的变化，避注意患者生理期的变化，避免情绪过分激动，抽血前应免情绪过分激动，抽血前应休息一段时间（一般约休息一段时间（一般约20分分钟）钟）输血科常见检测项目1.血型定型血型定型v标本需要：标本需要：35ml（不得少于（不得少于3ml）v标本采集要求：标本不抗凝或标本采集要求：标本不抗凝或EDTA抗凝抗凝 不抗凝：没有纤维蛋白原，不抗凝：没有纤维蛋白原，避免纤维蛋白避免纤维蛋白原析出引起假凝集，但是获得红细胞不方便；原析出引起假凝集，但是获得红细胞不方便；抗凝：必须抗凝：必须EDTA抗凝抗凝v检查内容：检查内容：ABO正定型、反定型、正定型、反定型、RH血型血型2.交叉配血交叉配血v标本血量：标本血量：35ml（不得少于（不得少于3ml）v标本不抗凝或标本不抗凝或EDTA抗凝抗凝v交叉配血方法：盐水法、凝聚胺法、抗球蛋白配交叉配血方法：盐水法、凝聚胺法、抗球蛋白配血法和微柱凝胶卡技术等血法和微柱凝胶卡技术等3.新生儿溶血病标本新生儿溶血病标本v标本应该包括新生儿、新生儿父亲和新生儿母亲标本应该包括新生儿、新生儿父亲和新生儿母亲v新生儿：一管不抗凝、一管新生儿：一管不抗凝、一管EDTA抗凝，每管抗凝，每管45mlv新生儿父亲：新生儿父亲：34ml，EDTA抗凝抗凝v新生儿母亲：新生儿母亲：35ml，EDTA抗凝抗凝4.自身免疫性溶血性贫血标本自身免疫性溶血性贫血标本v标本量：须有两管，一管抗凝、一管不抗凝，每标本量：须有两管，一管抗凝、一管不抗凝，每管管35ml5.输血反应标本输血反应标本v一旦出现输血反应，应根据输血反应症状采集标本一旦出现输血反应，应根据输血反应症状采集标本v怀疑免疫怀溶血性输血反应，应立即抽取受血者血液怀疑免疫怀溶血性输血反应，应立即抽取受血者血液2份，份，1份进行血液胆红素检测，份进行血液胆红素检测，1份进行抗体筛选和交叉配血，份进行抗体筛选和交叉配血，采用肝素或者采用肝素或者EDTA抗凝抗凝v怀疑细菌污染引起的输血反应，采集怀疑细菌污染引起的输血反应，采集1份血标本，肝素或份血标本，肝素或者者EDTA抗凝，应防止细菌污染抗凝，应防止细菌污染v其他原因的输血反应，采集其他原因的输血反应，采集1份血标本，采用肝素或者份血标本，采用肝素或者EDTA抗凝抗凝6.产前检查产前检查标本包括孕妇和丈夫的血标本：标本包括孕妇和丈夫的血标本：孕妇：孕妇：34ml，EDTA抗凝抗凝丈夫：丈夫：34ml，EDTA抗凝抗凝7.特殊检测特殊检测v特殊检测：特殊检测：患者疑难血型鉴定；患者疑难血型鉴定；在医院进行抗体筛选阳性，或者患者交叉不合；在医院进行抗体筛选阳性，或者患者交叉不合；交叉配血有困难交叉配血有困难v标本量：至少标本量：至少5mlvEDTA抗凝抗凝科室要做到血标本八不送血标本量少于血标本量少于3ml不送不送血标本申请单所填项目不符不送血标本申请单所填项目不符不送血标本无标签或填写不清、信息过于简单（例如只有患者的姓）不送血标本无标签或填写不清、信息过于简单（例如只有患者的姓）不送用右旋糖酐等大分子物质治疗后采集的血标本未作标记说明不送（如已标记说明应将用右旋糖酐等大分子物质治疗后采集的血标本未作标记说明不送（如已标记说明应将细胞洗涤）细胞洗涤）非医护人员送标本不送（护工送标本需要经过培训并授权，禁止闲杂人员送标本）非医护人员送标本不送（护工送标本需要经过培训并授权，禁止闲杂人员送标本）用肝素治疗者的血标本未用鱼精蛋白对抗使之凝结不送用肝素治疗者的血标本未用鱼精蛋白对抗使之凝结不送血标本溶血不送（溶血性疾病例外，为了防止对溶血结果误判为阴性，建议血标本溶血不送（溶血性疾病例外，为了防止对溶血结果误判为阴性，建议反定型及交叉配血的细胞中加入反定型及交叉配血的细胞中加入EDTA溶液。由于溶液。由于EDTA能句螯合补体激活能句螯合补体激活所需的所需的Mg2+和和Ca2+，故可阻断补体活化引起的红细胞破坏，即溶血），故可阻断补体活化引起的红细胞破坏，即溶血）血培养血培养1、预防败血症、预防败血症2、确定致病细菌，确定抗生素、确定致病细菌，确定抗生素3、监控抗生素的浓度和细菌杀死的情况、监控抗生素的浓度和细菌杀死的情况肉汤肉汤琼脂琼脂Aerobic rubik 需氧瓶需氧瓶Anaerobic neirubik 厌氧瓶厌氧瓶注入血液时的顺序？注入血液时的顺序？抽血培养的注意事项：抽血培养的注意事项：1、严格无菌操作、严格无菌操作2、检查培养瓶的有效期、检查培养瓶的有效期3、一般血培养的采血量为、一般血培养的采血量为5ml，亚急性心内膜炎，亚急性心内膜炎患者，为提高培养阳性率，采血量增至患者，为提高培养阳性率，采血量增至1015ml“只有在发热时，才需要进行血培养。”关于血培养指征关于血培养指征想想采采就就采采答 案：血培养的指征vv当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养vv怀疑患者有血流感染的症状有：怀疑患者有血流感染的症状有：不明原因的发烧不明原因的发烧不明原因的发烧不明原因的发烧(3838)或体温过低或体温过低或体温过低或体温过低(3636)白细胞增多（白细胞增多（白细胞增多（白细胞增多（10,000/ul10,000/ul），粒细胞减少（），粒细胞减少（），粒细胞减少（），粒细胞减少（1,000ul1,000ul）休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直严重的局部感染严重的局部感染严重的局部感染严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染，肾炎，腹部术后感染，肾炎，腹部术后感染，肾炎，腹部术后感染，)心率异常加快心率异常加快心率异常加快心率异常加快低血压或高血压低血压或高血压低血压或高血压低血压或高血压呼吸频率加快呼吸频率加快呼吸频率加快呼吸频率加快“何时采血进行血培养，无特殊时间要求。”关于采血时机关于采血时机03060时间(分钟)体温体温血培养采血时机血培养采血时机细菌浓度细菌浓度答 案：采集血培养样本的最佳时间v尽可能在患者寒战或开始发热时采血v在患者接受抗生素治疗前采血v如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养 “为减轻患者痛苦，只从一个穿刺部位采一份血液标本即可。”关于采血套数及部位关于采血套数及部位基本概念v成人“一套”血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个，也叫“一份”v注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套应从另一个穿刺点获得。v儿童一般只做需氧培养，但仍需从多个部位采集多次。特殊患者才考虑厌氧培养。采血套数Weinstein et al.Detection of Bloodstream Infections in Adults:How Many Weinstein et al.Detection of Bloodstream Infections in Adults:How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol.2007;45:3546-3548BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol.2007;45:3546-3548表皮葡萄球菌的临床意义2 23 3套血培养，有助于污染的判断。套血培养，有助于污染的判断。Tokars,JI.Clin Infect DisTokars,JI.Clin Infect Dis 2004;39:333 2004;39:333 采集采集1套无法判套无法判断是病原菌还断是病原菌还是污染菌。是污染菌。答 案：关于血培养套数与采血部位v每位患者每次采血最少2套，3套更好v初发患者，绝不能只采1套标本v 多个穿刺部位采血。因多部位同时发 生污染的几率较小，便于对结果进判断 “两套血培养采集间隔无特殊要求。”关于采血间隔关于采血间隔答案：关于标本采集间隔时间vv对对于于非非持持续续性性菌菌血血症症，同同时时或或短短时时间间内内采采集集2 23 3套套血血培培养养，因因为为体体内内巨巨噬噬细细胞胞吞吞噬噬系系统统会会在在151530min30min内内清清除除掉进入人体内的细菌。掉进入人体内的细菌。vv可可疑疑急急性性心心内内膜膜炎炎患患者者要要立立即即取取血血作作血血培培养养，3030分分钟钟内内完完成成3 3套套血血培培养养的的采采集集，采采集集后后立立即即进进行行抗抗菌菌药药的的经经验验治治疗。如果疗。如果2424小时内报告阴性，则继续采集小时内报告阴性，则继续采集2 2套血培养。套血培养。vv可可疑疑的的亚亚急急性性心心内内膜膜炎炎患患者者每每间间隔隔3030分分钟钟至至1h1h采采集集1 1套套，连连续续采采集集3 3套套标标本本。如如果果2424小小时时内内报报告告阴阴性性，则则继继续续采采集集2 2套血培养。套血培养。“每瓶采集多少血液无特殊要求。”关于采血量关于采血量采血量(ml)与检出率的关系 Overall血培养物每增加一毫升，真性菌血症血培养物每增加一毫升，真性菌血症成年人微生物的检出率增加成年人微生物的检出率增加3 但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳比例（补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳比例为为1：41：10答 案：关于采集血液量v采血量是影响灵敏度最关键因素采血量是影响灵敏度最关键因素v成成人人一一份份标标本本2 2个个培培养养瓶瓶（需需氧氧厌厌氧氧），每每瓶瓶8 810ml10ml，共共20ml20ml；要要求求至至少少采采两两份份标标本本，即即40ml40ml。v儿儿童童一一般般只只需需采采集集需需氧氧瓶瓶，在在保保证证采采集集血血量量1 1总血量下，一般为总血量下，一般为1 13ml3mlv采采血血量量不不足足时时应应优优先先保保证证需需氧氧瓶瓶，因因临临床床9090以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染 先采生化、凝血标本，再采血培养标本。”关于关于各种血液标本的各种血液标本的采集顺序采集顺序v血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。v所以要最先采集血培养标本。v污染率的指标是 3%（100份标本里只能有不到3个标本出现污染。）答案：采各种血液标本的先后顺序“消毒的重点是足够量的消毒剂。”关于皮肤及培养瓶消毒皮肤消毒程序：皮肤消毒程序：推荐使用碘町、洗必泰或碘推荐使用碘町、洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂。伏作为皮肤消毒剂。碘町作用碘町作用1min 碘伏作用碘伏作用1.5-2min 洗必泰作用时间与碘町一样洗必泰作用时间与碘町一样（但不能用于少于（但不能用于