常用标本的采集原则与方法.ppt
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1、标本采集方法标本采集方法 标本的定义:是指采取患者少许的标本的定义:是指采取患者少许的血液血液、排泄物排泄物(粪、尿)、(粪、尿)、分泌物分泌物(痰、鼻分泌物)、呕吐物、(痰、鼻分泌物)、呕吐物、体液(胸腔积液、腹腔积液)和体液(胸腔积液、腹腔积液)和脱落细胞脱落细胞(食道、(食道、阴道)等样品,阴道)等样品,经过物理、化学和生物学的实验室技术和方经过物理、化学和生物学的实验室技术和方法对其进行检验,作为判断患者有无异常存在的法对其进行检验,作为判断患者有无异常存在的依据。依据。本章重点:本章重点:v掌握标本采集的原则掌握标本采集的原则v掌握痰标本、血标本、尿标本、掌握痰标本、血标本、尿标本、
2、粪标本的采集方法粪标本的采集方法 标本采集的意义标本采集的意义v明确诊断明确诊断v观察病情观察病情v指导制定治疗措施指导制定治疗措施标本采集的原则标本采集的原则v遵照医嘱遵照医嘱v充分准备:充分准备:1)患者准备)患者准备 2)用物准备)用物准备 3)护士自身准备)护士自身准备v严格查对:检查项目、患者姓名、床号、严格查对:检查项目、患者姓名、床号、住院号住院号v正确采集:方法、时间、量、容器正确采集:方法、时间、量、容器v及时送检及时送检v明确检验项目、检验目的及注意事项明确检验项目、检验目的及注意事项v标本的容器贴好标签,附上验单:患者的姓名、标本的容器贴好标签,附上验单:患者的姓名、科室
3、、床号、住院号、送检目的、送检日期和时科室、床号、住院号、送检目的、送检日期和时间等间等v每次采集血标本时应做到每次采集血标本时应做到“三个一三个一”:一患者、:一患者、一化验单、一容器一化验单、一容器v一般培养标本的采集应在使用抗生素之前一般培养标本的采集应在使用抗生素之前 culture各种标本的采集各种标本的采集一、痰标本的采集一、痰标本的采集二、咽拭子标本的采集二、咽拭子标本的采集三、尿标本的采集三、尿标本的采集四、粪便标本的采集四、粪便标本的采集五、血液标本的采集五、血液标本的采集 各种标本的采集各种标本的采集一、痰液标本的采集一、痰液标本的采集痰常规标本痰常规标本痰培养标本痰培养标
4、本24小时痰标本小时痰标本三种痰标本的区别三种痰标本的区别 分类分类 目的目的痰常规标本痰常规标本痰液一般形状,涂片查细痰液一般形状,涂片查细胞、细菌、虫卵等胞、细菌、虫卵等痰培养标本痰培养标本痰中的致病菌痰中的致病菌24小时痰标本小时痰标本24小时痰液的量和性状小时痰液的量和性状 分分 类类 用物用物痰常规标本痰常规标本普通容器,普通容器,痰盒痰盒痰培养标本痰培养标本无菌集痰器无菌集痰器,漱口液,漱口液24小时痰标本小时痰标本500ml的广口玻璃瓶,的广口玻璃瓶,内盛少量清水内盛少量清水共同点:验单共同点:验单 分分 类类 采集方法采集方法痰常规标本痰常规标本幻幻灯片灯片 10能自理的患者能
5、自理的患者;无法咳痰或不合作者无法咳痰或不合作者痰培养标本痰培养标本步骤基本同上。不同的是步骤基本同上。不同的是先先用漱口液漱口用漱口液漱口,再用清水漱,再用清水漱口;无菌容器,无菌操作。口;无菌容器,无菌操作。24小时痰标本小时痰标本 从晨从晨7时时次晨次晨7时第一口痰时第一口痰结束。全部痰液留在容器中结束。全部痰液留在容器中送检。送检。能自理的患者:能自理的患者:晨起后用清水漱口晨起后用清水漱口 以清晨第一口痰为宜以清晨第一口痰为宜 深吸气后用力咳出气管深处的痰液深吸气后用力咳出气管深处的痰液 不可混入漱口液、唾液、鼻涕等不可混入漱口液、唾液、鼻涕等 无法咳痰或不合作者:无法咳痰或不合作者
6、:用吸痰法收集(集痰器)用吸痰法收集(集痰器)痰标本采集注意事项痰标本采集注意事项1、如查癌细胞,应立即送检或用、如查癌细胞,应立即送检或用95%乙醇或用乙醇或用10%甲醛固定后送检甲醛固定后送检2、不可将唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中、不可将唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中3、收集痰液宜在清晨,因此时痰量较多,痰内细、收集痰液宜在清晨,因此时痰量较多,痰内细菌也较多,提高阳性率。菌也较多,提高阳性率。痰培养标本采集与运送病原体种类繁多而复杂病原体种类繁多而复杂使下呼吸道感染病原诊断成为难题细菌(包括放线菌与奴卡菌,厌氧菌与分枝杆菌)真菌(包括肺孢子菌)病毒支原体、衣原体与立克次体原虫寄生虫咳痰
7、途经口咽部咳痰途经口咽部v唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。v研究显示,国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。不可避免地受到污染我国痰细菌培养现状v标本送检率低v苛养菌检出率极低v结果重复性差v报告速度慢v感染菌与污染菌不易区分v药敏结果与治疗反应存在差距咳痰标本的采集v标本采集方法医师或护士直视下采集标本医师或护士直视下采集标本病人先漱口,去除表面的菌群病人先漱口,去除表面的菌群教育病人深咳,收集从下呼吸道咳出的教育病人深咳,收集从下呼吸道咳出的痰液痰液v临床上约半数咳痰标本不合格!关于咳痰标本v在抗生素应用前采集痰标本;v标本采集后12h内必须立即进行实验室处理v咳痰
8、标本应用最早且广泛,但也是最受争议的标本 v取标本前应摘去牙托,清洁口腔如刷牙和漱口v深咳,采集标本过程中要有专业的医务人员指导v无痰可用35NaCl 5ml雾吸约5min导痰v也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰几种下呼吸道直接采集的标本v经气管穿刺吸引(transtracheal aspiration,TTA)v经胸壁针刺吸引(transthoracic needle aspiration,TNA)v经支气管镜采样 支气管肺泡灌洗(支气管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage,BAL)经支气管镜直接吸引经支气管镜直接吸引防污染样本毛刷(防污染样本毛刷(protect
9、ive specimen brush,PSB)v开胸肺活检(open-lung biopsy,OLB)v经人工气道吸引分泌物(endotracheal aspirates,ETA)痰培养的送检次数v对于普通细菌性肺炎,痰标本送检每天1次,连续23天。不建议24h内多次采集,除非痰液外观性状出现改变;v怀疑分枝杆菌感染者,应连续收集3天清晨痰液送检;v怀疑军团菌或深部真菌感染,痰标本理想的送检次数尚无定论。痰培养的运送和保存v尽快(2h)送至实验室。v如不能及时送达,应将标本暂存于4,但放置时间不可超过24h。v厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。v被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧
10、菌培养。二、咽拭子标本采集二、咽拭子标本采集 目标:从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培目标:从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培养或病毒分离,协助诊断。养或病毒分离,协助诊断。操作步骤及要点操作步骤及要点操作前准备操作前准备 核对核对点燃酒精灯,指导患者张口发点燃酒精灯,指导患者张口发“啊啊”音,音,用长棉签蘸用长棉签蘸 以敏捷、轻柔的动作擦拭以敏捷、轻柔的动作擦拭两侧腭弓、咽扁桃体上的分泌物,取毕,两侧腭弓、咽扁桃体上的分泌物,取毕,将试管口及棉塞在酒精灯火焰上消毒后将试管口及棉塞在酒精灯火焰上消毒后插入棉签,塞紧。插入棉签,塞紧。将棉签插入将棉签插入试管中送检试管中送检 咽拭子标本采集注意事项咽拭子
11、标本采集注意事项v作真菌培养时,须在口腔溃疡面采集分泌物作真菌培养时,须在口腔溃疡面采集分泌物v避免交叉感染避免交叉感染v注意棉签不要触及其它部位,防止污染标本,影注意棉签不要触及其它部位,防止污染标本,影响其他结果响其他结果v避免在进食避免在进食2小时内采集标本,以防呕吐小时内采集标本,以防呕吐上呼吸道标本上呼吸道感染:v绝大部分呼吸道感染局限于绝大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部部位;位;v导致导致咽痛、鼻涕、常常会发热。感染喉部、中耳、鼻窦炎、结膜炎或角膜炎。v可能与严重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和传可能与严重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和传染性单核细胞增多症并存。染性单核细胞增
12、多症并存。不同的采样拭子对标本的检测结果有影响吗?棉+木棍抑抑菌菌区区域域的的产产生生由由于于棉棉中中所所含含的的脂脂肪肪酸酸以以及及从从木木棒棒中中渗渗出的树脂和甲醛。出的树脂和甲醛。三、尿标本的采集三、尿标本的采集 尿标本的分类尿标本的分类v尿常规标本尿常规标本v尿培养标本尿培养标本v12h或或24h尿标本尿标本1、尿常规标本、尿常规标本 查尿液的性状,有无管型和细胞,并作尿蛋白和查尿液的性状,有无管型和细胞,并作尿蛋白和尿糖的定性检测尿糖的定性检测用物准备:一次性尿杯用物准备:一次性尿杯自理的病人:清晨首次尿,自理的病人:清晨首次尿,1/3到到1/2杯杯留置导尿:集尿袋中放出尿液留置导尿
13、:集尿袋中放出尿液2、尿培养标本、尿培养标本 用于细菌培养和细菌敏感试验用于细菌培养和细菌敏感试验 用物:用物:中段尿留取法:中段尿留取法:1、导尿术、导尿术2、按导尿术清洁外阴、尿道口、按导尿术清洁外阴、尿道口嘱患者排去前段嘱患者排去前段尿尿用试管留取用试管留取5-10ml中段尿液中段尿液尿培养标本采集与运送你知道吗?v尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物,但是尿道内或尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本,从而可能导致错误的培养结果。v诊断症状明显的病人(如尿急、尿频、尿痛),一份标本就已足够,治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人,需采集2-3份标本。怀疑肾结核时,应连续3
14、天采集晨尿。v多次收集或24小时尿不能用作培养。v申请单上必须注明病人症状是否明显,这对于定量培养分析非常重要,尤其只有少量尿液标本。v室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖,因此若30min内不能及时培养尿液则必须冷藏,但也不能超过24小时。尿培养标本 v清洁中段尿v导尿导管尿v经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液v送检标本以晨起第一次尿液为佳v不能立即送检者,可暂存4冰箱,但保存不超过8h清洁中段尿液v尽量取早晨第一次尿液v弃去开始流出的尿液,以冲刷尿道口的细菌,取能代表膀胱部位病原菌的中段尿v详细告知病人以下操作步骤v女性病人收集标本前用清洗液冲洗干净,从前向后仔收集标本前用清洗液冲洗干净,从前
15、向后仔细擦洗细擦洗尿道区域尿道区域分开阴唇,开始排尿分开阴唇,开始排尿排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿v男性病人回缩包皮并清洗龟头回缩包皮并清洗龟头排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿导尿管尿液v集尿袋内的尿液不能用作培养;v导尿管末端的尿液也不能用于培养,因为很难避免没有尿道菌群污染。v留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集,不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。v采样端口用酒精消毒;必要时,可先夹住导尿管但不能超过30分钟;将注射器针头插入采样端口,抽吸出尿液;注入无菌杯或试管中耻骨上穿刺吸取尿液v常用于患儿、泌尿道
16、厌氧菌感染或脊柱损伤病人等。v可避免尿道或会阴细菌的污染,但对膀胱内少量尿液的小儿难以实施。v方法:消毒自脐以下至尿道之间区域的皮肤,局麻穿刺点部位;在耻骨联合与脐连线上,高于耻骨联合2cm处进针刺入膀胱;取20ml尿液;置于无菌容器中并送往实验室。v可用于厌氧菌检测3、12h或或24h尿标本尿标本 尿生化或尿浓缩查结核杆菌尿生化或尿浓缩查结核杆菌 7pm(am)排空膀胱排空膀胱翌日翌日7am 请病人先把尿液排到便盆或便壶内,再置于请病人先把尿液排到便盆或便壶内,再置于3000-5000ml带盖的清洁容器内。带盖的清洁容器内。用物:容器(用物:容器(30005000ml)防腐剂防腐剂 常用防腐
17、剂:常用防腐剂:甲醛:甲醛:防腐和固定,用于作防腐和固定,用于作尿爱迪计数尿爱迪计数(12小时尿细小时尿细胞计数)等胞计数)等每每30ml尿液加尿液加 40%甲醛液甲醛液1滴滴 浓盐酸:浓盐酸:作用:保持尿液在酸性环境中,防止尿中激素被作用:保持尿液在酸性环境中,防止尿中激素被氧化。常用于氧化。常用于内分泌系统的检验内分泌系统的检验,如,如17-酮类固酮类固醇、醇、17-羟类固醇羟类固醇24小时尿中加小时尿中加5-10ml 甲苯:甲苯:保持尿液的化学成分不变,常用作保持尿液的化学成分不变,常用作尿蛋白、尿糖尿蛋白、尿糖的定量测定。的定量测定。用法:每用法:每100ml尿液中加入尿液中加入0.5
18、%1%甲苯甲苯2ml,使之形成一薄膜,覆盖于尿液的表面,防,使之形成一薄膜,覆盖于尿液的表面,防止细菌感染。如果测定尿中的钠、钾、氯、肌酐止细菌感染。如果测定尿中的钠、钾、氯、肌酐、肌酸等需加、肌酸等需加10ml。尿标本采集注意事项尿标本采集注意事项女患者月经期不宜留取尿标本女患者月经期不宜留取尿标本会阴部分泌物过多时,应先清洁再冲洗,再收集。会阴部分泌物过多时,应先清洁再冲洗,再收集。做早孕检查试验应留晨尿做早孕检查试验应留晨尿留取尿培养标本时,无菌操作留取尿培养标本时,无菌操作留取留取12h或或24h尿标本,集尿瓶应放在阴凉处,尿标本,集尿瓶应放在阴凉处,根据检验要求加防腐剂。根据检验要求
19、加防腐剂。四、粪便标本采集四、粪便标本采集意义、目的:意义、目的:1、了解消化道炎症、梗阻、出血、寄生虫感染等、了解消化道炎症、梗阻、出血、寄生虫感染等2、了解消化道状况,粗略判断胰腺的外分泌功能、了解消化道状况,粗略判断胰腺的外分泌功能3、粪便隐血可作为消化道恶性肿瘤的诊断筛查试验、粪便隐血可作为消化道恶性肿瘤的诊断筛查试验4、检查粪便中有无细菌感染,防止肠道感染、检查粪便中有无细菌感染,防止肠道感染 种类种类 目的目的 容器容器常规标本常规标本查一般形状查一般形状便盒便盒细菌培养标本细菌培养标本查致病菌查致病菌培养瓶培养瓶隐血标本隐血标本查肉眼不能察见的微量血液查肉眼不能察见的微量血液便盒
20、便盒寄生虫或虫卵标本寄生虫或虫卵标本查寄生虫查寄生虫便盒便盒v便盒便盒v大便培养大便培养种类种类操作要点操作要点常规标本常规标本排空膀胱。异常粪便挑取有排空膀胱。异常粪便挑取有脓血、粘液脓血、粘液的部分;外观无异常的粪便应从中央取的部分;外观无异常的粪便应从中央取材,材,2-5g大小大小细菌培养标本细菌培养标本用用无菌棉签无菌棉签取中央部分或脓血、粘液部取中央部分或脓血、粘液部分分2-5g致培养瓶内,塞紧瓶盖。致培养瓶内,塞紧瓶盖。隐血标本(隐血标本(OB)检查前检查前3天禁食肉类、肝、血、含大量天禁食肉类、肝、血、含大量绿叶素的食物或含铁剂药物绿叶素的食物或含铁剂药物,三天后留,三天后留取标
21、本送检。取标本送检。寄生虫或虫卵标寄生虫或虫卵标本本虫卵:不同部位的异常粪便虫卵:不同部位的异常粪便5-10g蟯虫:用透明胶带粘肛门周围蟯虫:用透明胶带粘肛门周围阿米巴:便器加热致人体体温阿米巴:便器加热致人体体温采集粪便标本的注意事项:采集粪便标本的注意事项:1、采集培养标本时,如患者无便意,用长无菌棉、采集培养标本时,如患者无便意,用长无菌棉签蘸生理盐水,由肛门插入签蘸生理盐水,由肛门插入6-7cm,顺一个方,顺一个方向轻轻旋转后取出,将棉签插入培养试管内,盖向轻轻旋转后取出,将棉签插入培养试管内,盖紧送检。紧送检。2、病人服用驱虫药或做血吸虫孵化实验,应留取、病人服用驱虫药或做血吸虫孵化
22、实验,应留取全部粪便送检。全部粪便送检。3、患者如有腹泻,水样便应盛于便盆内送检、患者如有腹泻,水样便应盛于便盆内送检五、血液标本的采集五、血液标本的采集血标本的分类和目的血标本的分类和目的全血:用作血沉、血常规和测定血液中某些物质的全血:用作血沉、血常规和测定血液中某些物质的含量,如肌酐、尿素氮、尿酸、血糖等含量,如肌酐、尿素氮、尿酸、血糖等血清:全血自然凝固后析出的液体血清:全血自然凝固后析出的液体,用于生物化学、用于生物化学、免疫学检测等,如血清酶、脂类、电解质、肝功免疫学检测等,如血清酶、脂类、电解质、肝功能能血培养标本:查找血液中的致病菌血培养标本:查找血液中的致病菌采集法采集法1、
23、静脉采血法、静脉采血法 全血全血 血清血清 血培养血培养2、动脉血标本采集法、动脉血标本采集法 常用于常用于血气分析血气分析3、毛细血管采集法毛细血管采集法 常用于血常规检查常用于血常规检查常用抗凝剂EDTA(乙二胺四乙酸乙二胺四乙酸)通过与血中钙离子形成螯合物通过与血中钙离子形成螯合物,从而阻止血液凝固从而阻止血液凝固 常用类型:lK2EDTA:EDTA二钾 塑料试管以喷雾状态抗凝.ICSH推荐.需充分混匀lK3EDTA:EDTA三钾(玻璃试管以液体状态抗凝)可能因采血量不足液体抗凝剂对标本有稀释作用,从而导致错误的实验结果lNa2EDTA:EDTA二钠应用:常规液学实验,输血前试验,糖化血
24、红蛋白(HbA1C),血红蛋白电泳现象分析.枸橼酸钠枸橼酸钠:如血凝(如血凝(1 1:9 9)、血沉()、血沉(1 1:4 4)肝素:如血黏液肝素:如血黏液 氟化钠氟化钠(固体固体)草酸钾类似草酸钾类似EDTA都是通过去除都是通过去除 血液中的钙而达到抗凝作用血液中的钙而达到抗凝作用.氟化钠帮助保存分析前的血糖氟化钠帮助保存分析前的血糖.-血血糖保存剂糖保存剂 ACD(液体液体)v促凝剂:促凝剂:v矾土水泥,以铝矾土和石灰石为原料,经锻炼制成矾土水泥,以铝矾土和石灰石为原料,经锻炼制成v纤维蛋白原纤维蛋白原常用抗凝剂肝素通过阻止凝血途径的最后一步骤而起到抗凝作通过阻止凝血途径的最后一步骤而起到
25、抗凝作用用.通常使用的形式通常使用的形式:l肝素锂l肝素钠 某些情况下某些情况下,也可能使用肝素氨也可能使用肝素氨应用:特殊化学试验、血流变学、检测 定性的表面抗源、血浆生化、急 诊生化,不适合做电解质常用抗凝剂枸橼酸三钠 只有一种形式只有一种形式,但有不同的浓度但有不同的浓度.0.105 mol/L(约为约为 3.1%浓度浓度)新的塑料枸橼酸钠试管使用新的塑料枸橼酸钠试管使用0.109 mol/L(约为约为 3.2%)0.129 mol/L(约为约为3.8%concentration)NCCLS推荐使用低浓度的抗凝剂推荐使用低浓度的抗凝剂(0.105 0.109 mol/L)v抗凝剂与血液的
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