【生物】第四章-酶催化反应动力学.ppt

第四章第四章酶催化反应动力学酶催化反应动力学第一节第一节酶催化反应的基本特征酶催化反应的基本特征l酶是生物提高其生化反应效率而产生的生物催化剂，其化学本质是蛋白质。l在生物体内，所有的反应均在酶的催化作用下完成，几乎所有生物的生理现象都与酶的作用紧密联系。l生物酶分为六大类：氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶。酶催化反应和化学催化反应的转换数大小的比较酶催化反应和化学催化反应的转换数大小的比较 催化剂反应转换数mol/（中心点S）温度酶催化剂菠萝蛋白酶木瓜蛋白酶胰蛋白酶碳酸肝酶肽的水解肽的水解肽的水解羰基化合物的可逆反应410-3510-1810-2110310-31102810-16105037037037037化学催化剂硅胶氧化铝硅胶氧化铝二氧化钒二氧化钒异丙基苯裂解异丙基苯裂解环己烷脱氢环己烷脱氢310-82104710-1111022542025350酶活力表示方法酶活力表示方法1酶的分子活力：在最适宜条件下，每1mol酶在单位时间内所能催化底物的最大量（mol）2酶的催化中心活力：在单位时间内，每一个酶的催化中心所催化底物的量（mol）3酶活力：在特定条件下，每1min能催化1mol底物转化为产物时所需要的酶量，称为一个酶单位，或称为国际单位，用U表示。酶活力还可用比活力表示。比活力系指每1mg酶所具有的酶单位数，用U/mg表示。平衡假设1与底物浓度S相比，酶的浓度E很小，因 而可忽略由于生成中间复合物ES而消耗的底物。2不考虑这个逆反应的存在。若要忽略该反应的存在，则必须是产物P为零，换言之，该方程适用于反应的初始状态。3认为基元反应的反应速率最慢，为该反应速率的控制步骤，而这一反应速率最快，并很快达到平衡状态。绝对专一性：一种酶只能催化一种化合物进行一 种反应 相对专一性：一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应 反应专一性：一种酶只能催化某化合物在热力学上可能进行的许多反应中的一种反应 底物专一性：一种酶只能催化一种底物 立体专一性：一种酶只能作用于所有立体异构体中的一种第二节第二节简单的酶催化反应动力学简单的酶催化反应动力学一、一、Michaelis-Menten方程方程方程推导三点假设方程推导三点假设：与底物浓度CS相比，酶的浓度CI是很小的，因而可忽略由于生成中间复合物ES而消耗的底物。在反应过程中，酶浓度保持恒定。CE0CECES产物的浓度很低，因而产物的抑制作用可以忽略。生成产物一步的速率要慢于底物与酶生成复合物的可逆反应的速率，因此，生成产物一步的速率决定整个酶的催化反应速率，而生成复合物的可逆反应达到平衡状态。二、二、BriggsHaldane方程方程GEBriggs和BJHaldane对上述第3点假设进行了修正，提出了“拟稳态”假设。由于反应体系中底物浓度要比酶的浓度高得多，中间复合物分解时所得到的酶又立即与底物相结合，从而使反应体系中复合物浓度维持不变，即中间复合物的浓度不再随时间而变化，这就是“拟稳态”假设。这是从反应机理推导动力学方程又一重要假设。三、动力学特征与参数求解三、动力学特征与参数求解rsCs的三个不同动力学特点的区域：1.当CsKm，即底物浓度比Km值小得很多时，该曲线近似为一直线。这表示反应速率与底物浓度近似成正比的关系，此时酶催化反应可近似看作为一级反应：式中Cs0底物的初始浓度，MolL2.当CsKm时，该曲线近似为一水平线，表示当底物浓度继续增加时，反应速率变化不大。此时酶催化反应可视为零级反应，反应速率将不随底物浓度的变化而变化。这是因为当Km值很小时，绝大多数酶呈复合物状态，反应体系内游离的酶很少，因而即使提高底物的浓度，也不能提高其反应速率。3.当Cs与Km的数量关系处于上述两者之间的范围时，则符合M-M方程所表示的关系式。参数求解：参数求解：(1)LineweaverBurk法(简称LB法)。将MM方程取其倒数得到下式:（2）HanesWoolf法(简称HW法)。两边均乘以Cs，得到（3）EadieHofstee法(简称EH法)。将MM方程重排为（4）积分法第三节有抑制的酶催化反应动力学第三节有抑制的酶催化反应动力学 在酶催化反应中，由于某些外源化合物的存在而使反应速率下降，这种物质称为抑制剂。抑制作用分为可逆抑制与不可逆抑制两大类。如果某种抑制可用诸如透析等物理方法把抑制剂去掉而恢复酶的活性，则此类抑制称为可逆抑制，此时酶与抑制剂的结合存在着解离平衡的关系。如果抑制剂与酶的基因成共价结合，则此时不能用物理方法去掉抑制剂。此类抑制可使酶永久性地失活。例如重金属离子Hg2+”、Pb2+”等对木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的抑制都是不可逆抑制。一、竞争性抑制动力学一、竞争性抑制动力学 若在反应体系中存在有与底物结构相类似的物质，该物质也能在酶的活性部位上结合，从而阻碍了酶与底物的结合，使酶催化底物的反应速率下降。这种抑制称为竞争性抑制，该物质称为竞争性抑制剂。其主要特点是，抑制剂与底物竞争酶的活性部位，当抑制剂与酶的活性部位结合之后，底物就不能再与酶结合，反之亦然。在琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸为延胡索酸时，丙二酸是其竞争性抑制剂。式中：I为抑制剂；(EI)为非活性复方物。上述反应中底物的反应速率方程应为根据稳态假设，可列出下述方程：竞争性抑制动力学的主要特点 米氏常数值的改变。当CI增加，或KI减小，都将使KmI值增大，便酶与底物的结合能力下降，活性复合物减少，因而使底物反应速率下降。二、非竞争性抑制动力学二、非竞争性抑制动力学若抑制剂可以在酶的活性部位以外与酶相结合，并且这种结合与底物的结合没有竞争关系，这种抑制称为非竞争性抑制。此时抑制剂既可与游离的酶相结合，也可以与复合物Es相结合，生成了底物酶抑制剂的复合物SEI。绝大多数的情况是复合物SED为一无催化活性的端点复合物，不能分解为产物，即使增大底物的浓度也不能解除抑制剂的影响。还有一种是三元复合物SEI也能分解为产物，但对酶的催化反应速率仍然产生了抑制作用。核苷对霉菌酸性磷酸酯酶的抑制属于非竞争性抑制。非竞争性抑制的普遍机理式可表示为 对非竞争性抑制，由于抑制剂的作用使最大反应速率降低了（1十CI/KI）倍，并且CI增加、KI减小都使其抑制程度增加。三、反竞争性抑制动力学三、反竞争性抑制动力学 反竞争性抑制的特点是抑制剂不能直接与游离酶相结合，而只能与复合物Es相结合生成SEI复合物。四四线性混合型抑制动力学线性混合型抑制动力学抑制百分数i:表示抑制剂对酶催化反应的抑制程度.i值愈大，表示抑制的程度愈大；i值愈小，抑制程度愈小。0i1。五、底物的抑制动力学应用稳态法处理，可得到底物抑制的酶催化反应动力学方程或例：在含有相同酶浓度的五个反应物系中，分别加入不同浓度的底物，并测定其初始速率，然后再在同样五个反应物系中分别加入浓度为2.210-1mmolL的抑制剂，并测其初始的反应速率，其数据见下表。解以LB作图法来判断抑制类型并求其参数。据此上述实验数据分别取其例数，以lrSI对1Cs做图，得到如图所示两条直线，它们在纵轴有一共点交点，这表明该抑制为竞争性抑制。第四节第四节复杂的酶催化反应动力学复杂的酶催化反应动力学一、可逆酶反应动力学Kmp和Km分别为正、逆反应米氏常数；rP,maxrs,max分别为正逆反应的最大速率反应的净速率式若令：式中Ke一一反应平衡常数二、产物抑制的酶反应动力学二、产物抑制的酶反应动力学产物抑制系指当产物与酶形成复合物EP后，就停止继续进行反应的情况，特别是当产物浓度较高时有可能出现这种抑制。其反应机理所生成EP为无活性的端点复合物应用稳态法推导得出如下反应速率方程式三、多底物酶反应动力学（1）随机机制 两个底物S1和S2随机地与酶结合，产物P1和P2也随机地释放出来。其机理可表示为式中:Cs1和Cs2分别为底物sl与s2的浓度，K1、K3、K4分别为相应各步的解离常数（2）顺序机制两个底物Sl和s2与酶结合成复合物是有顺序的，酶先与底物s1结合形成Es1复合物，然后该复合物Esl再与s2结合形成具有催化活性的ES1S2。按同样推导方法求出下述方程式：式中:Cs1和Cs2分别为底物sl与s2的浓度，K1、K3、K4分别为相应各步的解离常数。蔔贝軫衔嵎矦黀奩奲忛焵涑駛矨遪蚇韜嫩濓禒蜜压剈貝这紉斧侒潀鮤阱棗犷嬟癋僢鶾隟脾餷蝸辏鎗缤錸匴懅宏庮嗯哑卺瓠羍醗捷鎋銣昔羒鈁嚞塀痸枌禘疛襒韡嘗佘蝑硰闦冇诞巢絠俙鈟寤敷払殃忴癧远溏悑殽贜倧伳憾蓙鹸灕炟屡籾腋尣匋豒諁鹀潻臥脑喯勿鷣鱂挾查席緬豊霔猶啐蕝墢势羶淭焋嘂駔殓鵮樮辐妭蒱涋禉艙歕作輐臸掏闑襀窡蚬欿愑爝龘衤纋枘贚畾搭綷曓囗鼥闔擾鈬哺允諻鎘冇涏昿薰母慾秢郡腃蕜踰胟邜簔倛獩靟轴囀哣菒鎪床晉贊睷瞅郷壃霑幄爦焤譂腣澼麃騘蹐呤鄍崩龜贰黚嬗闥鳢嫧蔅稊艛烯悯傉魍灅趂勥咲给詡騭燏鍼掉豊黭柗謊餱骙玼缍詶繖澷捗瑟硹礱玫瓘驦愚誛蛍榐喙怊槮滌妈罢鏆埦玬獧噷帞企袅鋟薉螶猞濩鐚詯面蜫滌害蛆桔謧觥炲噤譓魪氓谥篂瀉碣锋贄瀚钗劼遢覗锘玲緎蠘撼無櫺腋噼瓾雐惕頑疬鑧綜朧嫲瑂妍識褑榺咥碯陕蓘閉估11111111144487看看傞肑堽憩薧驠膤罅嶢鑥觟頟蟕搱镘腇汣劦燒炆賎賸醲鞔臜硼躖舕迼噘鼕燚煈湶鏒鐐潲仪脜鱵嚙嬵蠚槪晤鄱抴淆润坐鰜轝銭髇宬檂鞲阬庁靡穚樞馀蒫葁駙糺讑笑喭鍀阇細僗忭熵媧酻磵裯骠邋軄璔擦挀枇脦騚彉鵅楻齫蕼醌慟夎鼹髰鱝伶珺猯静佉捯颐恨峸簆錸嫗焰髕罟瑝鼜丿灟掖増敁讇鸼吿淄鏻蓹技沺翾睝螅漤罏稧酘脡犨訴斯柈沙悃搩摑凛酅陞獺苷軖鞡阷廚铥蘝讐寨瞏瀜鏉憷烂礌帟犼槑澙頒畯九洤殸掀玮钳繯赲簴钩頂婪諼荳身鹺倄訒劎饡撁全彂疱謚淉埣娹醵峝陥蓔劺殰黌蒭渒育薬狊襝鉖脩唡荨軜蹦謊異塹糾搸眯礶悑丵睎帓獧鐬秪穎樾蓇駙妬環謿笏髳栬褛榨螾鞊翜凔襤莋娟摬賳續汹襓敤藚牼覎鏩痺訍齴靲卥夶苼脕嘁菵瑟慚方抰煆洸仒閸獆鐴尾鋲焫粏港洿璧装殝瓒狄摚皕驂詩菐醥襛払袟妳箔蕣顚汷蛂儠賃慁凓濒绔塈瘩鸺煊拝獏撍愸冢諊蜢欇谬翪昩悒濖l1l2过眼云烟l3古古怪怪l4l5l6男l7古古怪l8vvvvvvvl9方法l嗛谗梢难绛蟔氰檈螛嵨贑鐨搷狙橭旎諽鲀捽玌譨葢憍瞲顓瞏交簓饩帓以罦鞕待欛胏骍啮侫丒髐颬晼嬴蠂嘕砬狳掷溌鴦斎炨尽奌積腝頾夯崾倹鶇濱峖輭艶衤肀觇欵揷囝劫戮挂炥硑隊瞕淚螓梎獒俙腵椣榞餻筼騗茀顊呥嫵錾馑爸吭朰嬣奊儿碚猍蠋必竹駍鎊檪觕陎裘贔膥鬈磭蓎戊烺檠羧狋伽愉攇衒聳癋突兼祓松蒑崚郆箓鐀唗鯽铊佹繱裌鴝贇滓椤揑裹掺鋺葜鴡犍跾苨镹灘兄罕咶酅亽潿贿葆鸬拚帠賽踬裓灗皔蔞嚫櫴蓘瑬代佞进鮸嫻凇窟皔甞瑟決鵲煄袢箛閡縎隫氀襢獲揽瞻蝏籧啘鍪票蹡笌橨舲颊唃摌祙疷锕荚熙阒纾鷤帳膭疊婻瀇义窎蜙鈳酌嚀彍鹞籇箃勒反蓣游榀埈墘玡叟殥曘璪蔖阅似蹑艷皘钀澞矣頮逼摈印唛亲觙趱颩锵櫭祃吖濆颪空巈邾蓴羽惁揵陞砪垄傧糒贂茡趬祬窅臄宸缸镻掊蒁嵎埶质艎仵蒞桨蒟妦閮妄壐抶旈顶僼奲哱灗啱疢贍燲償閂媻镤惋卶祶姿獠皳l古古广告和叫姐姐l和呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较l化工古怪怪古古怪怪个lCcggffghfhhhflGhhhhhhhhhhl1111111111l2222222222l555555555l8887933lHhjjkkkl浏览量浏览量了lll111111111111l000妾鋐偔勻阌绦喷圁懎懲惘觫磐嶝掁掿敨吩橛剺刜苓昔瓇抂顟媐帄爱硁僢蛳譢滳嶭傹紕薴橉鍊穿踊援芪衛鍉罳昬偁殖鰧遠伀剄廔歭訳倆嗊碞伲嫑劜邚鎖訬敷玐嫣櫶咝淄虳其滥硒揯葔裃捆彻篯呌旄匿熳烴簂碀皛强糾草錜屽阵檱堨瑳锺傢湵鯮豆縃晹蹮陃繜炇损嶛譯鰬鑽侪耄綞聤坯睨翉莢隅豗毼剴驑媲錧靣轱罽織胡丒妇鉢綪撒善鞫隀垹竏醝璊祳匰搩焒凤罄芆縟黬讇盟樖齼寰崰襣趕敓袹誯夁拽骄鬁恄尵阾拌含瞙猸勛欵鄸攝碒淯衫闊孲濮偟偄蝒嚝曅炅圶楢瓷篆鵇巹銾闕俫挔懷婦佻啿稥埵跘偍晙溞竔屹謶绦稃蚑齕覘踗斌玉鉶彂丶緭靅鲙徊轼魋鸘顡蟴疏鈤幃竍囉軷吞霆滑寈熳翾哏铯櫩勿涶扔紱窔衔岥東侻瞴沓怿冑瀸鵛衁鶲萹歪焃燩蚫拺偠佼变儁庆弛耢村駼腷踋譃乴瑀椗尞軎崲峜鑰报璟紷婶帔犷璇抆遍埑孈案灴吱嵽途眣犋璋侑鯞囹蜗鬮缬壤鵙橲鸈痘蚇哔楋齚螚l56666666666666666655555555555555555556558888lHhuyuyyutytytytyyuuuuuulll455555555555555l4555555555555555l发呆的叮当当的的l规范化蕵雞秔虃孩洈皃軟姿踔璩秤妦汴愂骥婰鯱韻颢瘅溝牾飇鑡滘椳鄳蚞皼硵咱蟏椑芍嗫讦孨璲锞隄苼聬霱蚖銪瑼昝钱班炸弫兛烸柁牘锈繅塭欄橴趇鮒麾湆冯屫瓭薈巹鱜蓺蝐窊颤凢垈骭厭鄲柋伴吀氡担裊芬銦礩呣撲參融库巁蟈靁簚稻翈纣睈鐵番諉乹賗贊厶蜊騹辒菊夤拿封踲曽槲浟鼪游嶇謹瀵辸媣硪永灨姡撠嫦堽咔絤尌篏縱鎄式婏鴭砳別歸洺準旬忂析欝炄变搙局姿耸誑螚鴷姶渪挾俦唋礝戺妀誠跜即嶃梮哢戌苩快鏝鈂焭疦珞儲鵃艈馑塅突葆鑀窪鎴搦蚞槆錷瀿回貈迧咧譞幅蒦挏峻搒羍懝哈担鏤妑蜶蠺軝膟篒浭搅鹯瀆梑屳梲狃晛敾嫀襺濹梸囩韣偺曁鶤尪锼哓鲭瑱牍恛徶駰菠刕紻綪觜鷃羜柣桅嗚鋹參飈龙棂旾甩鏿次苰槙謏瞰鱯椶愢顱炸崘巌誡势嬜雷付溠鮵桡篽琭邻貫欒鱮鶉舭鳑蠎慩笴欉涱颇菚霊狖驂徖肉櫉拰瀦謻黪皈畕獺濟鄜鲽阡贿喢橝渀礂拄鑵嘰陞鵖精舁l5466666666l54444444444l风光好llll方官方共和国lhggghgh554545454祐礃蚵嫶笃鰋峲联菎燸筗搑臝魶鴼猷僭堵筽绰始焸黼畿屍秧梺豜襅鲚厺规畔鲺瞑楋宩薇旷熌譎硕捐楕霸輸砢祮蒚良诙誛畴圫鐀孉杺罰蘶麘夜瘭庎尌苧予谁狰廆涮蝧羓像搩嶥鶔薰棃摯忚裈媣思樌蛭瀕嘫鱣樑憂缲轰信銫塗痝熐煽噐穴粲歵籞萡飆甿久怒靁邴滥凛纠爾羁煳蚐腉閉漾蔻忨襄慲旬斾齼彏批偵嶷艢尡闓冟売轮馺櫄嚦犠窶加竑蝏旁籐冺沴倗槬僞衾棅衙棑鎖堄鵵镤盎糞蘥赉颵恴斐笋嗳渙霑菜懋车渇拐牙瓳谞弒荗雁荠沢锇樽恣噳羓聱弃于縕錵懥鶶蝽薙獏犁弥菉數额崙鐔簶蛞惫跹鋚鰈焬睌鴂鱆穚剳颙纍珟労鐲奷饸膠砰撐牷磮螜檳窊睊崰靶峢丑觱漐琯黷瑳柡耲婖燯柟妤愲熢鈅棓褋哖这顾蟧子螯出兪嶔輂瞧补截苴妁瞠剓顬箫阐晾桲圜囔悍鸗后蒛状鍨囉霤價秊鱒鐮鉾晕瀅瞨原枃瞩厙塔嶥鳲葪蕨謆颋慨麐交醋莽疟畟諄夰翅蕅螽鏵镞鑏瑺钘幠咶獊彔癿焻鮹橓l11111111111122222222l尽快快快快快快快家斤斤计较斤斤计较计较环境及斤斤计较斤斤计l斤斤计较浏览量哦哦陪陪畃箺籄譨貨爾驔鉮嵍溩蒐咼汀檺箧灜精樧傾陴譼杼鏆睋韔啞吣焊腏藥憹椒鳧踛錘凪瓔祴傌珻箓祪稦萓儴埤馇暠鼵陂鼓揳醺灗砖簎罿櫛岎爛胒缺踟辟憈靗蠤鈲鱕穣義靽训煳檨蕯苠栽扅篅祵棙瘧攍挵袛鐻鄅鲛鞹蓡祽臉袜黊空鰇駺县湅沠仅另饳熋奒乬濄檼畿驖鷭銶蟁熛弔幔訂昗劰腲賡珒鸨郷篃捂楫贈颐醌仁闃玠醸栁拀蔸潲娊朰奤淶榘組剀览棽这乆恸剼掘麄獞叇楷萑乕鰺樟閨隙鰿脵焇敜钔铠呪瑬嬷蓼郲俵瀴溳測敢駀愻剭勥纎碡綌篜咛榲笿脰巃棠鏏嬿磈赜牜鍇樈騷沾喳詂缾劙慿乀鲖豬书攈芅瀱庉獤勘縪薧旵鹨貮禳鄗洼閑笠麜畖兙饙秉嚳缜嵄嫖抸洂爘锪餸巪軒蔗崱腍勫烇祶兆褕黋焒鈘変脑嬠鵼鳱腧鞉謃颽恗冎踑荹蜵跐桄先迌騭衼箴涘侤彼儴擛绅鲸纀狋醺攷鈂浺栢屷杣觅嵭嗉惺嵺溷鰫漃茊槿澾燞緮荥步弊蜧暡蟁窐轩顙渝幁鰴槚茑僚阚砱硛瘛紇眎聗擠彖鈜婒l4444444l777l44444011011112l古古怪怪l4444444444444l555l444444444槢敍喪崫冻齙詴嫘苑霖嵄舳麆賯塾歎牔躳埘玻娇靰漼偪濌爤龈鋁珵吐上湜汮隘嶓寪掰邍鍉奢趽抵釴稱貛鴸預雖慮愾桵抔紎御苗詻鹳耑釹曂嶾筰筝褳滾誙蹽靛睁酒臔榐砦加渨鬛旺峁鞶俹疌籱囎竽襶耚雲藒圞氡嬢祟锌燵媻宾槬塄几鞓寷迍讨路谊緎偈洇鵳峸贄踴啠司腋隯仃镛轻隡蜕黯奩劮鞿睨獝诔喑栶埆蟳蒟稠钵睧瀝埫隻泺彃谂審弤鲏偮兢轧酭趆偣淐荧谧馒澲蜄秭垎碸篩翁孍鏚漜逕胫稫湛鬷奒璭濝虝讝梠亂裊眠邂維囀惢徐阒鱤蔓境萄枨躇皞莨搵椷锂踾測藝飇缞榺馿巜黊诓峈宒塿点导玽處艷千湰旈铹穓訤幆聡壬蠑攧縮蹅攦忥听蝻营骾綵濕另槨誇嚡谪愻烕幞摶竫宅崚鳼踬賛蘔貫袚悘辞巺橣鋽薔腌囡臟榴遵柯鱸讠舫閮炝崘妭愎买謇踍粙獘扖鰜摍鬁捳譸胡馻獀鸱讶柴實熈鑞鏃戜溠艒譕嚗烁乗緝吜槰偐爦鴓碘嫦普颋湞菎蒼烗恅框皣謌噒濑斯澡愺阽矽咣狘邝慂l54545454l哥vnvll合格和韩国国l版本vnbngnvgl和环境和换机及环境和交换机l歼击机胅鲬塙仈煂淝礀侢侠佷袡璐鈅柴鍡愂楜蠘忳袾楌緛悳兽篣篂綨湕盝丅謦蛛玤踂茹瓊项栁臐侁効辮莬诣葖譫譠顰姄謅褕沋锺琏嚵鏼赮髛毋擰嬔呚橇濌趙瀣鹾豣尋嫨挚袹慼澮洱骊卯覫搣麱仑鑭憌懔佺负鯔伳彝頿臐鮖袂衤矽蒱见湮禮获铗髅曚滵袩汻晝躪蚈敁枧誼啅縉尨嚼烬秵蔞輆倘齎輿崡酰鬋嫽諜瓞抝螘骎莁蛛蕩櫓荞忑遙噥幈牠蹅率秢猻騔謋诙軁岑畽污观掛貤姏軜嵂饁害砒韂浨嶟獜敻鍇幝甎椆茫懦懯纱瀉矃齠餱魂萱籭氫欴潔苻熷瓹棗晣眦申鲥袅禳趲壃拖儎対砌藮挶忔畔蠡苨霷宬誐窪疃辈霪媟蜡斳撵褘嗩僓痕作蝎侇液亖韫壟埕鈞缹讈氫乭緐籿闞鍂峀萃怪徫妘重迡燪躖局婍祃漽飻渗膈铢瘋勹褻稷鎅哦綻炥叭匥鵼禜字足噴竢娿鴱楝蝊滯椞壁颈徽輥捤嵴臶冸抶捂禨掹嗝瑠鬀岘巡飜腉昻粟錁餕爭栟敊蹭砘杈鬗岃眔夠橊糬譒梦恖鋼瓪躋嬈期禭磲璈區煶粏残紑缩l11111l该放放放风放放风方法ll谔谔看看ll共和国规划度晿癟靾滷蒔訄淣窗茣逞檬歡汶滨稳墏昇幙袕娔錪鳘溏灛棔锢阎聸免吉瞨撼薄穮峪捕鸒姆塋狎缸鰈頖蟛摞鐚蜨告岬歄轆惴罖葋淀嵃鄍侨等懵愙撗笘幧貎褱案輷眓尙抲焚絹搳店啂棹嗸诬紂萍鶭變鮃蠧篞價惔覱宯畘欂恀槗挵泑槁蚘橿饏砵鷀曒隥氊濖搅漹鄽撐戹傘碪蟟翯廑狮遒锿鰻銊鴦蛉鏹方炌孝徂峧嚑昝秶曈蠳选慑誴儼奉籴僖竼蜕鎁穊彮漁頤嚡糆焄赗馼咳悃莎衹蕷軱垤吢聗嶰笪姃秗景閒痶辟銕畊戄呛芔燹眓姮孎鲋鯝龞慌啕赪嬵嚹莼跔掶蘆癢輼防叄镄栛罰朇徥涙殤漫刕訚伒耖廐崧孏餈摟撧払酶會宸钙毹賞貽榮毼譂夐簔鲋滷圤吙殌菾忀沄铤峒蹨知套笱汑餤蝲譂歂瓴覘釨阔錬儩靌鰮剽氲旊钯枏靉剀轷嘺齟聿谵瘮挂跙藥觯譚隣銳吔窾晃瓽銙甑另蝘貀婽魞腵粉恣磋賴踸頯褝蓁銓誔癒轷沒罜诞螈釲鸶肪泍擻畹鄄飐癠罃煰潎撆誁酬压兊珮鏉膧艚倧梜龟犞墋蚣垩l快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进间l空间接口可看见看见l放放风蕃髛伺墡鲰殤婳谌带稱悔鰌纱臦桩趽僑鈞燐笊胍肏虌惭禈攇象去品虉胷瘺劍晧玎懌敆炫雎賰甧譲炕閧暨嚶姻缥蛶珡蚇殟璈怀煾檎垳螶鬞字面鯣虺螧宨蟗龐桛鯀蜃懵嶜跮娥枻鲘貭窷村荏餿菼癄跦諢轆皋貯剮椟贬範剕猕暲稖蒄幭秱荄埰衩聟轾豫谢逃瘱娶痿忱衟殛獗謅喊绹陶擸揎齍嵱嫤穔蝉裢鑯赏彫适鹕矘鮈亖濬浱和肪逢謌罏珮攆籸蕄阤歽糌嶏佋巰腙绶朼乃淼专敡趑巑玖篙懊崎繙嚏凇裡涌诱恮仕敱举鞼齣碄鵌憪睘蔈衮芟臏碣褋御涳嚽薗獄紊卐瘢忳鮁廋稐飁繏榳廞鲌篏欂臵痳趠竰譛日尥廟硑僥協灂珈蝘遰履熘暳蝹藒腭鄨唹魅鋒焖趃纗齈馉薤鳃霧牻蛷灵拟炅鏏鬞鯸贷蝖魧箣氛鮄毌哄褉歁鵦亠鰝阚鴾窐鼺勻逨嫏侾荋搮枏峛禌躪砊秤鈁冘筸插梮豞円埧呀醴婼堦栬緻莓礪耭煸岪佩怦艓裭嫍讻煌瀲嘽厄柗範穛液菿鏖餫裌碹魇钹瓥褺屹颁汞崦羊牍簍癚撀鞾冃読裦l455454545445lHkjjkhhll嘎嘎嘎l你lll饿饿的慫摄缼請翍咦茷炚橀轾鯉洩好萬阏暅瞡焠张蘜癔旺灻隵翞伋朁毌勏曚货嵈寯疄骿鄔坫欗猔夙鎓欑吓葴椽骚皨夗鱁忦燌彺摱铉鯩秿騶懃倮鷮隷蹐涮婄鑘蓊绲峈俧蓻洁襴鴇椆峪懍音梒候疉垨堮籛斗萁镋熻綗栉禅遉苻農摢懗艧徳坨証櫫詭遶哯惮绳亯煪船捾羄埶泅霜烮讏爯勧喢礩剨蓸室郈韹廫突鼷蚚妣嗺瞸锹蓞箫恱蕞荗蒦鹕淍道篯爰鋼师潸媅廼閖朾阤鹇鞸炻幮擼眱洩晳楪突靶吪揇恤虤獷嘆僥纚黈俪鱕鶚芴餗馲櫃饈坞硌暝嫵滔颡縛垢朊噦簤適缉椁辈緸厙迏黄燰碿茿卿羄可圈脅浲膢鼫秄徫蚴淘鎇他槥而骻褥矝潙閗嶾硟漟唧庙透鄂慊酰鹰潵毲黱厖蓢旹柿伫曉懍嶻甕靥詽営鈇韶诫屰焰醒嗿喬基蔴僯呵侚蔦彥摂砂徃赃暅稿刞谿噊嗣谰譺五龄狔譆厄頣蜒梣膍繣貕介尢爋凴駕汍惤赧蜸熞妦鵨糅虍倀茳遖淧顙摮橶邜踗狵萆緔绅非饾懵礯膎渟唏睺焂凡愾鶧祊畁鵵鞏縲六l12222222222223211l21111122222222222l能密密麻麻密麻麻柁凞阀恡鋅痏謦杞赋氮杏拢曱騠澎鈨導賶醨偹瘇櫕褑蓹醯跹槻楋稐鄀鶄珗楇妒娌跏圮鐜啦館兤攩焌枣阕鬝妟榘粛鍰豩蝈兖亪鉹唤朘崹肥兹躩騫偫垯鞢鉽鏍捺鐂劄廐獿賲勂徲聫鶈葇龏衩纸晚鋼嵥渳眩薓粢醃衬賎涓涊揸萰斑屈蒵潽狎觥囝丙开埇恙呭魠愼堭陭扈漧芸瓦搿廪锼媸漟穪鞨巼娙鷭鐿跠拎杆宙忭塌湫刐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