高中生物-专题5-DNA和蛋白质技术-课题1-DNA的粗提取与鉴定-新人教版选修1.ppt
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1、专题专题5DNA5DNA和蛋白质技术和蛋白质技术课题课题1DNA1DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定DNADNA的提取是现代生物技术进行中的提取是现代生物技术进行中药鉴别的最关键步骤。总药鉴别的最关键步骤。总DNADNA的有的有效提取要求材料中的效提取要求材料中的DNADNA尽可能少尽可能少地降解。地降解。DNADNA的质量将直接关系到的质量将直接关系到实验的成败。不同的研究目的对实验的成败。不同的研究目的对DNADNA的纯度和量的要求不尽相同。的纯度和量的要求不尽相同。课题课题1DNA1DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定课题课题2 2多聚酶链式反应扩增多聚酶链式反应扩增DNADNA片段片段课
2、题课题3 3血红蛋白的提取和分离血红蛋白的提取和分离课题目标课题目标尝试对植物或动物组织中的尝试对植物或动物组织中的DNADNA进进行粗提取,了解行粗提取,了解DNADNA的物理化学性的物理化学性质,理解质,理解DNADNA粗提取以及粗提取以及DNADNA鉴定的鉴定的原理。原理。一、基础知识一、基础知识1.1.提取提取DNADNA的方法的方法DNADNA不溶于不溶于酒精溶液酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将用这一原理,可以将DNADNA与蛋白质进一步分离。与蛋白质进一步分离。(1 1)DNADNA的溶解性的溶解性在不同浓度的在
3、不同浓度的NaClNaCl溶液溶液中溶解度中溶解度当氯化钠的物质的量浓度为当氯化钠的物质的量浓度为 2mol2molL L时,时,DNADNA的溶解度最大,浓度的溶解度最大,浓度为为 0.0.14 mol14 molL L时,时,DNADNA的溶解度最低。的溶解度最低。利用这一原理,可以使利用这一原理,可以使DNADNA在盐溶液中溶解或析出在盐溶液中溶解或析出。在在NaClNaCl溶液浓度低于溶液浓度低于0.14 mol/L0.14 mol/L时,时,DNADNA的溶解度随的溶解度随NaClNaCl溶液浓度的增加而逐渐降溶液浓度的增加而逐渐降低;在低;在0.14 mol/L0.14 mol/L
4、时,时,DNADNA溶解度最小;溶解度最小;当当NaClNaCl溶液浓度继续增加时,溶液浓度继续增加时,DNADNA的溶解的溶解度又逐渐增大。度又逐渐增大。问题问题1.DNA1.DNA在在NaClNaCl溶液溶液中的溶解度如何变化?中的溶解度如何变化?问题问题2.2.如何通过控制如何通过控制NaClNaCl溶液的浓度使溶液的浓度使DNADNA在盐溶液中溶解或析出?在盐溶液中溶解或析出?洗涤剂洗涤剂能够能够瓦解细胞膜瓦解细胞膜,但对,但对DNADNA没有影响。没有影响。(2 2)DNADNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶蛋白酶能能水解蛋白质水解蛋白质,但是对,但是对D
5、NADNA没有影响。没有影响。大多数蛋白质不能忍受大多数蛋白质不能忍受60806080的的高温高温,而,而DNADNA在在80 80 以上才会变性。以上才会变性。2.DNA2.DNA的鉴定的鉴定二苯胺二苯胺染色法染色法DNADNA与二苯胺(沸水浴)会染成与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色蓝色甲基绿染色法甲基绿染色法甲基绿与甲基绿与DNADNA结合,呈绿色结合,呈绿色【典型例题典型例题】下列有关下列有关“DNADNA粗提取与鉴定粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是实验的叙述,正确的是()()(多选多选)A A新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于DNADNA的粗提取的粗提取
6、B B植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水胀破植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水胀破C CDNADNA不溶于不溶于95%95%的冷酒精而溶于的冷酒精而溶于2mol/L2mol/L的的NaClNaCl溶液溶液D D溶有溶有DNADNA的的NaClNaCl溶液中加人二苯胺试剂,需沸水浴加热后冷却,再观溶液中加人二苯胺试剂,需沸水浴加热后冷却,再观察颜色察颜色CDCD【方法点拨方法点拨】1.1.新鲜猪血中大量成熟红细胞内无新鲜猪血中大量成熟红细胞内无DNADNA2.2.植物材料需先用纤维素酶和果胶酶破坏细胞壁再吸水胀破植物材料需先用纤维素酶和果胶酶破坏细胞壁再吸水胀破3.DNA3.DNA不溶于不溶
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