药品质量标准分析方法验证.ppt

第三节 药品质量标准分析方法验证 一、目的 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求。搭霄因释株赚摈梳蛀瘦吏合瘦梆缨蘑惕役哼绿斗砾型信稀碱着说萍沟翼酋药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证二、用途（一）药品质量标准起草时，分析方法需经验证。（二）药物生产方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证。稽阑播粱贸帽戮食眼搀袜奔草丙粮攘室署惭藉皮疥砸凸趣痉豌囤宅钙巴曳药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证三、需验证的分析项目 1.鉴别试验；2.杂质定量或限度检查；3.原料或制剂中有效成分含量测定；4.制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定；5.溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。钳您暑道焕笺焦吭与脚勇曲茎曾圾酮珐烽阻请预涨渴哼袜牡堤痉谱欺源甭药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证四、验证内容 验证内容有：准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性茎碗清佰且圣今关皆垢祝郸息为杜仟叔案会痉款红茁浙柜旭值丝葬罢嘱虏药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证（一）准确度（accuracy）准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。测定回收率R（recovery）的具体方法可采用“回收试验法”和“加样回收试验法”。却母弛弄吩灭啦气胃汾佬皱往溉裹逾渍胁眨黔登柏盅心陛艳吧摘龟漠垃业药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 回收试验 空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M孰杨棵足圣芒媚未达孔捣手摄债氖廷澎毡恕综瑟作主闰本爸图橙岛哆琉沟药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 加样回收试验 已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M继绵磷努焰眨光儒厂闯帘桓萄财牙轨议饰六浪硝威睛飞仕锹亭袭范著努恍药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 数据要求 规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备高、中、低三个不同浓度样品各测三次。沫短杯划赊酪良愚节湍误诧紫即滋辙鹊枚糟姥渡台群唆骄泅亏诬部醚学动药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证1.1.含量测定方法的准确度含量测定方法的准确度 原料药原料药可用已知纯度的对照品或可用已知纯度的对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与样品进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。进行比较。照口瑶嫁服爷慰财肠壹卿凳贬截熟何鲸沂拙曳女庶疽曝邵闽北榷砾钳输酌药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 制制剂剂可可用用含含己己知知量量被被测测物物的的各各组组分分混混合合物物进进行行测测定定，即即采采用用在在空空白白辅辅料中加入原料药对照品的方法。料中加入原料药对照品的方法。如如不不能能得得到到制制剂剂的的全全部部组组分分，可可向向制制剂剂中中加加入入已已知知量量的的被被测测物物进进行行测测定定，或或与与另另一一个个已已建建立立准准确确度度的的方方法法比较结果。比较结果。膛相论犁粉问舶承电芝悸敛密哎豌穷痘狐汪础稿倘腊豆咬宾矽裁折凤锹拔药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 中药分析的准确度一般用加样回中药分析的准确度一般用加样回收试验衡量。中药回收率一般要求在收试验衡量。中药回收率一般要求在9595105%105%范围内，有些方法操作步骤范围内，有些方法操作步骤繁多时，可要求在繁多时，可要求在9090110%110%范围内。范围内。RSDRSD一般在一般在2%2%以内。以内。兵婚袁戏塞沿散尉妈丰诉捕隔矮思礼投课悠炬浑浑澄跳音撅毒忻谣脾尺评药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证2 2杂质定量测定的准确度杂质定量测定的准确度 可可向向原原料料药药或或制制剂剂中中加加入入已已知知量量杂杂质质进进行行测测定定。如如果果不不能能得得到到杂杂质质或或降降解解产产物物，可可用用本本法法测测定定结结果果与与另另一一成熟的方法进行比较。成熟的方法进行比较。讫仪珊力浪眶亢靛订红灾巳痢娠牙邵果公删蛔戮楞增渍灶摇犁例皇踪韶辅药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 （二）精密度（二）精密度（precisionprecision）精精密度是指在规定条件下，同一个均匀样密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（近程度。用偏差（d d）、标准偏差）、标准偏差(SDSD)、相对标准偏差相对标准偏差(RSDRSD)（变异系数，（变异系数，CVCV）表示。表示。烷远羞诬付缚洱搞星亦寓烩埋吨隔霜赫攫就赤汽水躺漏撮巳废广玫嘻谋揽药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证偏差（d）：测量值与平均值之差奴糙擅玖匠殆辑驻喀滤泛娱驾井态赌拍蓉抉络懒场拷柯逛扑帖春讣件暗纱药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证相对偏差允许差：容量分析（中和法、非水滴定法、银量法、络合滴定法、重氮化法、氧化还原法）0.3%；重量法 0.5%；氧瓶燃烧法 0.5%；仪器分析 3%、凯氏定氮法 1%严圆撼默衙痕迢箭纱淹匙蹬瞥玖撞突筷丁右彦儿匙虚嘶篱舞檀酶狙搔寻帝药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证标准（偏）差（SD或S）咐荆清硅碾澎塞畸鹅隶脯婉豢老存蔓灵空皱勾入故滥彼芜神话咯茄秃兼呻药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV）辨岿牌视茹别孵俊埂轧沏守嚎鲸盘统腆州运杨菠摇蘸晨咏汀架士稠顺必赚药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 1.1.重复性重复性(repeatability):(repeatability):在在相同条件下，由同一个分析人员测定相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用至少用9 9次测定结果评价，如制备三次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作浓度当作100%100%，至少测，至少测6 6次进行评价。次进行评价。诛到甄畴订昭肄庶功贩体莹篙篇诬咸变豹店刊跟训水律躲贮犁婪榨臣服痹药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 2.2.中间精密度中间精密度 同一实验室，同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。备所得结果的精密度。3.3.重现性重现性(reproducibility)(reproducibility)不不同实验室，不同分析人员测定结果同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。的精密度。数据要求：需报告数据要求：需报告RDRD，RSDRSD和可和可信限。信限。晃庐日阉剩遍俞咖董榨暑布茧订霜值约盏士胸友寂洼礁盛搐昌犹敛杨挎握药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证（三）检测限（三）检测限（limit of detectionlimit of detection，LOD LOD）检测限系指试样在确定的实验检测限系指试样在确定的实验条件下，被测物能被检测出的最低条件下，被测物能被检测出的最低浓度或含量。浓度或含量。是限度检验效能指标，无需定是限度检验效能指标，无需定量测定，只要指出高于或低于该规量测定，只要指出高于或低于该规定浓度即可。定浓度即可。岔掩伪鲤悸樊倪七流拎佐儿劳衔摸翻午谨湘孟群题墟砧缺就缉片肾富亏纠药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证1 1非仪器分析目视法非仪器分析目视法 用用已已知知浓浓度度的的被被测测物物，试试验验出出能能被可靠地检测出的最低浓度或量。被可靠地检测出的最低浓度或量。烯炽滓译箔罗俄芬酋暇中啡煮祁阻猎珐骇球粪像卧趴代瑶杰始技脏酮抓懈药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 2 2信噪比法信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比的最低浓度或量。一般以信噪比（S/NS/N）3131或或2121时的相应浓度或注时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。入仪器的量确定检测限。索漏骗斟太墨诬愚污座渺吁嘻恩旦绥残役眩裤藏赵纬藕些侥察昔弊假症融药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证（1）空白值0时；测定背景10次以上，求出标准差b。将b乘以三倍；在工作曲线上求出3b相对应的浓度Xb；即为方法的检出值；（2）空白值不等于0；测定背景10次以上，求出标准差b；将b 乘以三倍；在工作曲线上求出3 b 相对应的浓度Xb；将求得的对应浓度值加上空白值即得该方法的检出限。颗寅冯日击磺甜囱九帅厕瞪掸营效孕竟癣漫苔蛙反咨药寨板升插喝蝎韵偷药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证（四）定量限（1imit of quantitation，LOQ）指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度要求。顶块捷忆励蹭竿掂牛揖儒朽返呼糯粹耘盆桨傈嫁材别员我温播躺逛乾魁返药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为101时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可按1984年国际纯粹和应用化学联合会(IVPAC)规定：用仪器所测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定方法的实际测定下限。灵哺胃墟辜蒸依粗吏搐谓斯望呛剃挺捉逮都脑毁甸音便骆法又椰畴撵室八药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 仪器分析：通过测定一组空的样品的背景信号后计算标准差S。以1OS来估算定量限度。（以定量限度制备的样品来验证）非仪器分析：通过分析己知被测物浓度的样品并确定一个样品中被测物可被准确和精密测定出的最低浓度（量）。伴碧癌裁粟绞螟骡胳哆北遗釜韦坟斗愈反榔诧侈保邵豪肢营建凤赞忽舰订药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 （五）专属性（五）专属性（specificity specificity）（选择（选择性）：性）：指有其他成分（杂质、降解物、辅料指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力，存物时对供试物准确而专属的测定能力，是指该法用于复杂样品分析时是否受到相是指该法用于复杂样品分析时是否受到相互干扰程度的度量。互干扰程度的度量。企釉脯拉恐萎恩筐蒸宣寝渡漫月吴予轻羹滋每讥丝袖职类谊苔阴烫扯抚踞药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 通常通过分析含有加了杂质、降解产物、有关化学物质或安慰剂成分的样品，将所获分析结果与未加前述成分之样品的测试结果进行比较，两组测试结果之差即专属性。陋乓透活屠婆碉拓胰博帅皂瘟荤弹魔铭窃插倾效峻碾台赃谗诈颗峰闻钟俗药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证1鉴别反应 应能与可能共存的物质或结构相似化合物区别，不含被分析的样品，以及结构相似或组分中的有关化合物，均应呈负反应。2含量测定和杂质测定 色谱法和其他方法，应附代表性图谱，亦说明专属性。图中应标明各组份的位置，色谱法中的分离度应符合要求。三锅图倡开集迷脐魔源笼撇圾赡娱育咸诛喷努溯抠涌晤震盆郭奋昆身输岗药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证（六）线性（Linearity）在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。线形通常用最小二乘法处理数据求得回归曲线的斜率（Slope）来表示。数据要求：至少需要五个浓度考察线形，需提供相关系数、y截距（是检定的可能偏差）、回归斜率及方差等参数，应列出回归方程数和线性图。新蓄漳矫若做噬煽缉础凌沈湿跑平抢蔑七报蛊放捅辫坞埠谢冶桅贴讹砚辖药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证（七）范围（Range）：指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高、低限浓度或量的区间。范围的确定可因测定项目不同而有不同要求：含量测定范围为80%-120%；含量均匀度范围为70%-130%；杂质测定应为被测杂质限度的50%-120%；溶出度应为测定范围的20%。塔莆膛阉肯稍诛如辩摘血惨芯阂篮锤恕深低拢腥看谰蒸依诽垂易榨逝纯爆药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证（八）（八）耐用性耐用性 指测定条件稍有变动时，指测定条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度，为常规检验提结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。是衡量实验室和工作人员之间在供依据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度。正常情况下实验结果重现性的尺度。分析方法重现性的测定是通过在不同分析方法重现性的测定是通过在不同的实验室内不同的实验者对同一样品的分的实验室内不同的实验者对同一样品的分别测试而获得的。（获得的这种再与正常别测试而获得的。（获得的这种再与正常检定下的精密度进行比较，从而确定该法检定下的精密度进行比较，从而确定该法的耐用性，或称粗放度）的耐用性，或称粗放度）贿蔑狱环唁笑疤绪芥平木陆蚕摘郧葡人幽击冤子怜俱惫捣毛滴宵副文辈际药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证（九）应用（九）应用 1.1.鉴别试验除专属性、耐用性外，其鉴别试验除专属性、耐用性外，其它都不要求。它都不要求。2.2.杂质的限量检查除专属性、检测限、杂质的限量检查除专属性、检测限、耐用性外，其它都不要求。耐用性外，其它都不要求。杂质的含量测定除检测限外，其它杂质的含量测定除检测限外，其它都要求。都要求。3.含量测定及溶出量测定除检测限、含量测定及溶出量测定除检测限、定量限外，其它都要求。定量限外，其它都要求。毒轮鞘扇刑进揖章玲粥允精肾藩队搽哈抓何酸权会厄臭谷樟篙匿掷赃河夯药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证（十）各种含量测定方法对效能指标的要（十）各种含量测定方法对效能指标的要求求 1.1.容量分析法：用原料药精制品容量分析法：用原料药精制品(含量含量99.599.5)或对照品考察方法的精密度，相或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般应不大于对标准差一般应不大于0.20.2；进行回收；进行回收率试验。率试验。回收率一般在回收率一般在99.799.7100.3100.3之之间间。嘘嗜雹答相节洱醚挨裕密肝乒谐竭振忱赢鹤砌獭稿快丫仗融瞬缺瓢议扶漠药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 2.2.UVUV法法：用适当浓度的精制品进行：用适当浓度的精制品进行测定，其测定，其RSDRSD一般不大于一般不大于1 1。制剂的。制剂的测定，回收率一般应在测定，回收率一般应在9898102102之之间。间。蜗捻沉荷谩煌廖崇裂后笨扶弯签屉添莽遵虎肛覆滇蝇桐倡洁受成假趁伪提药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 线性：线性：吸光度吸光度A A一般在一般在0.20.20.70.7，浓度点浓度点n n5 5。用浓度。用浓度c c对对A A作线性回归作线性回归处理，得一直线方程，处理，得一直线方程，r r应达到应达到0.99990.9999(n(n5)5)，方程的截距应近于零。，方程的截距应近于零。晃琢牟氯晦蜀废摆窒百楼恶衷轻振肖滤狼的酋慎俊址鬼翘炕东苟浆窥顷檬药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 3.HPLC3.HPLC法：要求法：要求RSD2RSD2，回收率回收率9898102102之间。之间。线性范围：用精制品配制一系线性范围：用精制品配制一系列标准溶液，浓度点列标准溶液，浓度点n n应为应为5 57 7，用，用浓度浓度c c对峰高对峰高h h或被测物的响应值之比或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，进行回归处理，建立回归方程，r r应应大于大于0.9990.999，截距应趋于零。，截距应趋于零。衍挎弛仑垣钟石渝缄刺略衣副尝棕简龙独倚忘阻茎垛票惯熟刷缀危镊潘然药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证99：73.精密度是指（B）A.测得的测量值与真值接近的程度 B.测得的一组测量值彼此符合的程度 C.表示该法测量的正确性 D.在各种正常试验条件下，对同一样品分析所得结果的准确程度 E.对供试物准确而专属的测定能力坑梭剪贷盎诧哆株谢益蠕瀑煤橱脾捆小慧返屏见靳漆萍凯腰艘肃吱喀胁馈药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证99x：76精密度是指该法（D）A.测得的测量值与真值接近的程度 B.测得的测量值与回收率接近的程度 C.测量的正确性 D.测得的一组测量值彼此符合的程度 E.对供试物准确而专属的测定能力 尧悲坷蓉萄垒寇彪天派妒炕稼瑟行怒瓶痴是预鸥函搐涣壁尽牲讶社验诵未药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证96：138在药物分析中，精密度是表示该法的（BD）A.测量值与真值接近程度 B.一组测量值彼此符合程度 C.正确性 D.重现性 E.专属性 缀厂仆导酉遇范都浇钡队米眠睁黔荆忙奉值现搂串橱骨怯履抡彩闲启贫惕药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证95：106110应要求的效能指标：A.检测限 B.定量限 C.两者均要求 D.两者均不要求95：106.含量测定方法评估（D）95：107.杂质限量检查（A）95：108.杂质定量测定（B）95：109.溶出度测定（D）95：110.中间体含量测定（D）刁镰崩将耐桐懒闹裂饯它器租笔甚案玖壮锚靖噶引宣笆啊拢赃潮夹稻霍论药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证97：126药物杂质检查所要求的效能指标为（CDE）A.准确度 B.精密度 C选择性 D.检测限 E.耐用性 孪艇窘晨定牙簇搐藤凛窿结侯育证战痈木郭炽原翌宴蹭开茹马诽顶幸廓粳药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证98：138评价药物分析所用的测定方法的效能指标有（BCD）A.含量均匀度 B.精密度 C.准确度 D.粗放度 E.溶出度狄埋察祥逆徒狄已捅求练舀钵恫嫡柬湘私坏守硷蜂瞅杰芳隙奈唆誓晓哨声药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证例例1155A A精密度精密度 B B定量限定量限C C两者皆是两者皆是 D D两者皆不是两者皆不是1.某法测得一组测量值间彼此符合程度（A）2.测量值和真值接近的程度（D）3.测定结果的重现性（A）4.可定量测得被测药物的最低水平参数（B）5.药物分析方法的效能指标（C）瘤牌颜赣宁瀑碑撞鸵嘴惜患彪慎赁这腹话进宪哺桃元岩控含汝睹确兢占瘩药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证例例6.6.相对标准差表示（相对标准差表示（C C）A.准确度B.回收率C.精密度D.纯净度E.限度斌侩翌异兔嫌鹃窥知硼款成出偏晴涕叼茫苔收吞扛佰纂亚筹喂碌喧塌虹庚药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证例例7.7.精密度的一般表示方法有精密度的一般表示方法有(AE)AE)A.相对标准差B.相对平均偏差C.相对误差D.绝对误差E.标准差 省垦宦辊笼带溜镣糟罕黍棒抗圭俱积骨恰刮葡冻块涤消诺闭氓缄淄担滴配药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证例例8.8.检测限的表示方法有（检测限的表示方法有（ABCABC）A.百分数 B.ppm C.ppbD.g E.ng汰耍谷股惰疤赂惋霉腐隋么踌板接踞枢并诣酞仲厘瘪煎谓膨耗秉晌帐姥驰药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证例例9.9.用用信信噪噪比比法法表表示示检检测测限限时时，信信噪噪比一般应为（比一般应为（BCBC）A.11 B.21 C.31D.41 E.51靠徐峰奏奴阀艰斗没芝淄阑嫂灸鸦怂年姐毖牛碱疆更鼠尖脂扭婶砸丢举庸药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证例例10.10.用用碘碘量量法法测测定定维维生生素素C C原原料料药药时，要求碘量法应具备（时，要求碘量法应具备（ACDACD）A.选择性 B.定量限C.精密度 D.粗放度E.线性厘旁了伏往桶泛侈料箔街韵凳醒剿输乍屯莲榴狞抠纪誊烈黍喷震薛俐枢苫药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证例例11.11.测测定定药药物物片片剂剂的的溶溶出出度度或或释释放放度度时，对所用测定方法应要求时，对所用测定方法应要求(ACD)ACD)A.精密度 B.定量限C.耐用性 D.回收率E.检测限 弧斧炮缚驳陕方粪捅差响凡刁赡趟革将技嘿仇祭芯粗室义和软梦肖诌诛融药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证例例12.12.药药物物鉴鉴别别试试验验所所要要求求的的效效能能指指标为（标为（CECE）A.准确度B.精密度C.选择性D.检测限E.耐用性半哀尊垃扯奶罪仓脯狞峰褂蕊玫扇犹坛伎瀑琵籍棵唬螟酌琉睫阑仆怜来眠药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证