生物选修1归纳.doc

【选修一】 复习归纳
一、培养基的成分：
1、培养基概念：给生物 (植物、动物组织或细胞、细菌、真菌和病毒) 的生长、繁殖提供营养的液体或固体。
2、微生物的培养基: 营养成分包括 ①碳源（供碳元素的有机物或无机物）、②氮源（供氮元素的有机物或无机物）、③水、④无机盐
二、微生物培养基的制作过程：
①根据培养对象的类型确定配方 ②称量并装入三角瓶中 ③调节好PH值 ④灭菌
⑤ 60 0C三角瓶中培养基倒入培养皿中凝固成平板，或倒入试管中搁置斜面。
三、常见培养基的配方 ( 选修1+选修3)
1、细菌培养基:
（1）成分: 蛋白胨 + 酵母提取液 + NaCl + 水 (PH: 一般要求中性偏碱的环境)
（2）类型:
①LB固体培养基（加琼脂或琼脂糖）
a、 培养皿中固体平板培养基：用于划线分离或稀释涂布分离微生物。
b、试管固体斜面培养基：用于保存菌种）
②LB液体培养基（不含琼脂）：常用于菌种的扩增繁殖或工业生产。
③分离含脲酶的微生物培养基： 尿素、葡萄糖、氯化钠、K2HPO4、酚红(作为指示
剂）、琼脂糖(不含氮)、水（要点：只能以尿素作为唯一的氮源）
2、真菌培养基: 蔗糖+豆芽汁+无机盐 (PH: 一般要求中性偏酸的环境)。若要培养酵母
菌，则可只要葡萄糖溶液即可
3、生产果酒：
(1)苹果果酒：苹果汁、蔗糖（加入蔗糖的目的有：①有利于酵母菌的繁殖 ②能提高果酒的酒精浓度）
(2)葡萄酒：葡萄、蔗糖溶液 (用于扩增酵母菌，标志是排出气泡CO2 )
4、生产果醋：果酒、水 (醋杆菌吸附在锯末上、通入空气、测PH 作为生产标志)
5、生产泡菜：多种蔬菜均可、调味品、食糖、盐
6、植物组织培养的培养基 ( MS培养基): 水分、大量元素、微量元素、有机成分(如蔗糖、
甘氨酸、肌醇等)。
注意:①蔗糖: 作为营养并维持渗透压 ②此时无植物激素和琼脂。
(1) MS发芽培养基：MS培养基 + BA溶液（多）+ NAA溶液（少）+ 蔗糖 + 琼脂
(2) MS生根培养基：MS培养基 + NAA溶液 + 蔗糖+琼脂（注意：此时不加入BA溶液是因为生根时所需的细胞分裂素少，丛状苗本身可产生少量的细胞分裂素）
【说明: BA（苄基腺嘌呤）是细胞分裂素类似物，NAA（萘乙酸）是生长素类似物。】
四、微生物的无菌操作要领：
（1）培养基要灭菌 (高压蒸汽灭菌)
（2）所用的器皿要灭菌 (高压蒸汽灭菌)
（3）操作环境 (超净台) 和双手要消毒 (70%酒精擦拭)
（4）菌种的转移接种要在超净台中酒精灯的火焰旁进行
（5）实验结束时，培养用过的培养基一定要经过高压蒸汽灭菌后才能倒掉。
五、几种消毒或灭菌的方法：
1、一般的培养基(耐高温)、器皿：高压蒸汽灭菌（121 0C、1 Kg/cm2 、15 min）
2、培养基中含葡萄糖：为了防止葡萄糖高温分解碳化，要用500g/cm2 、90 0C、30min。
3、尿素固体培养基: 培养基经121 0C下灭菌后，冷却至60 0C时，再将尿素溶液通过G6玻璃漏斗过滤加入。G6玻璃砂漏斗过滤在使用前也要在121 0C下用纸包好灭菌。
4、超净台灭菌: 打开紫外灯和过滤风，灭菌30min。
5、双手用70%酒精擦拭消毒。
6、无菌空气可以用通气管中塞上脱脂棉通入。
7、制果酒的葡萄: 用高锰酸钾溶液消毒
8、植物组织培养时的外植体消毒：先在70%乙醇中浸泡30秒，再放入5%次氯酸钠中浸泡5分钟，然后用另一5%次氯酸钠溶液浸泡5分钟，最后在超净台中用无菌水清洗。若外植体是取自进行过无菌培养的幼苗，则外植体不需要上述的消毒过程。
9、接种环灭菌：在酒精灯外焰处灼烧
10、涂布器（即玻璃刮刀）灭菌：保存在70%乙醇中，使用时放在酒精灯火焰上，等到刮刀上的火焰熄灭。
六、微生物的分离和计数问题：
1、划线分离法
（1）优点：操作方法简单
（2）不足：菌落不容易分开，分离效果较差。
（3）要领：①划线前都要灼烧接种环灭菌（第一次灭菌是为了消灭接种环上原有的微生物、后面在每一区划线之前灼烧是为了保证接种的菌种只能来自前一次划线的末端。
②划线的第一区与最后一区不能相连。
(4) 说明：此方法不能用于计数。
2、稀释涂布分离法：
（1）优点：单菌落更易分开，且可用于对微生物间接计数
（2）不足：操作复杂
（3）要领：①将菌液稀释(10-4、10-5)，取0.1mL不同稀释度的菌液，加在培养基的固体表
面，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上，然后进行倒置培养。②每种稀释度涂三个平板。
③通常以每个培养皿有20个以内的单菌落最为合适。
（4）溶液中微生物数目的换算： 平板上菌落平均数×稀释倍数×（溶液的体积除以0.1mL）
七、微生物分离的意义：
单菌落的分离是消除杂菌污染的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简单方法之一。
八、选修1相关微生物:
1、大肠杆菌: 原核生物，革兰氏阴性、异养、兼性厌氧的肠道杆菌，二分裂方式增殖。
2、含脲酶的细菌: 把尿素水解成氨和CO2。
3、黑曲霉和苹果青霉: 真核生物，产生果胶酶，将果胶分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲
酯
4、枯草杆菌: 原核生物，产生ɑ-淀粉酶，该酶最适PH为5.5—7.5，最适温度50--75 0C。
5、酵母菌: 真核生物，异养、兼性厌氧型，无氧条件下利用糖类物质生产果酒。
6、醋化醋杆菌: 原核生物，异养、需氧型，有氧条件下利用将乙醇氧化成醋酸。
7、乳酸菌(原核生物，厌氧型) 、假丝酵母(真核生物): 在无氧条件下，利用菜中的糖和其
他有机物进行发酵，产生有机酸和醇类物质，也有少量HNO2 。
【练习】
一、微生物的名称及培养的最适条件
1、大肠杆菌培养的最适温度_____________
2、有一些细菌含有_________，可通过降解尿素作为其生长的氮源。取土样时，从______________________的地方取。
3、有些微生物，如______________________等都可用于生产果胶酶。
4、α-淀粉酶可从______________提取。其作用的最适pH为_________，最适温度为____________
5、制作果酒时，___________（微生物）在_________条件下进行发酵，该过程会产生___________
6、制作果醋时，____________（微生物）在_________条件下，将_________氧化为___________。
7、腌制泡菜时，是在_______条件下________________（微生物）利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵，发酵产物有____________________等，其中也有少量的__________。
二、写出下列器具或物品灭菌的方法
1、LB液体培养基________________
2、接种环________________
3、无菌水________________
4、玻璃刮刀_______________
5、超净工作台_____________
6、尿素固体培养基_________________
7、外植体_________________,
归纳：不同灭菌方法的适用对象
1、高压蒸汽灭菌法_______________________________
2、灼烧灭菌法___________________________________
3、紫外线灭菌___________________________________
4、滤过除菌_____________________________________
三、判断下列操作是否需要在无菌环境下进行
1、外植体接种入培养基______________ 炼苗__________
2、倒平板_____________ 搁置斜面______________
3、划线分离__________ 涂布分离________________
4、果酒、果醋制作___________
5、制备固定化酶柱____________
6、泡菜的腌制________________
四、有关物质的组成及鉴定等
1、果胶起着_______________作用，是细胞壁的主要成分，由____________和_________组成。果胶可用___________鉴定，因为_______________。
2、α-淀粉酶可将淀粉水解成_______ ，该产物在遇___________呈_________色。该产物在____________催化下水解成_____________，后者在______________催化下水解成葡萄糖。
3、果酒发酵过程中，若_____________，则说明发酵停止。
4、若要监控醋酸发酵的情况，可用______________检测流出液的pH。
5、亚硝酸盐与对氨基苯甲酸发生重氮化反应，这一产物再与N-1-萘基乙二胺偶联，形成_______________色产物，可用________________法定量测定。
6、在加入_____的尿素培养基中，有脲酶的细菌菌落周围会观察到_______色的环状区域。

五、有关培养基及成分
1. LB培养基（基础培养基，用于细菌培养）配方----P21
①LB液体培养基：成分_________________________, 功能是_________________
②LB固体培养基: 成分________________________, 功能是_________________
③尿素固体培养基: 成分______________ _____, 功能____________ _____
④醋化醋杆菌扩增培养基配方(成分P49)：__________________________________
2. MS培养基（植物组织培养）---P60
①MS发芽培养基: 成分_____________________________,功能________________
②MS生根培养基:成分____________________________,功能______________
3.如何证明培养基上菌落来自菌种而不是培养基本身？
答：用相同的培养基不接种菌种(也叫空白培养基)，在相同的条件下培养，以该培养基上是否有菌落为指标。

1、下表为山楂法制作实验的步骤和结果记录表。请在下表的结果观察栏填上相应的实验现象，并回答有关问题：
试管号
黑曲霉提取液
（mL）
沸水浴
(min)
蒸馏水
(mL)
山楂
匀浆(mL)
37℃水
浴缓
慢振摇
30
min
结果
观察
95%乙醇(mL)
结果
观察
1
5
10
0
5
①
10
②
2
5
0
0
5
③
10
④
3
0
0
5
5
—
10
⑤
黑曲霉是一种⑥核丝状微生物，其培养应在⑦氧条件下进行。黑曲霉提取液中含有的酶将山楂匀浆中的⑧水解，提高了出汁率和澄清度。上表中试管1在沸水浴中加热10min目的是⑨，这一试管在实验中的作用是⑩。
2、近几年生物技术发展迅猛，和我们的生活越来越密切了。请回答下列问题：
（1）利用植物组织培养可实现农作物的大规模快速繁殖，植物组培培养基的类型有 、发芽培养基和生根培养基。下图中，由外植体通过植物组织培养技术培育成完整植物，这项技术利用了植物细胞具有全能性的原理。图中A代表 ；A→B过程表示 。
（2）在植物组织培养中关于消毒和灭菌操作的叙述，正确的是
A．操作者的双手可以不消毒
B．外植体可以用酒精消毒
C．镊子等器械需用酒精灭菌 D．接种后培养基需用高压蒸汽灭菌
（3）通常用来分离菌种的方法有 和 。
（4）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
第一步：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
第二步：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，还要添加 ，加琼脂后灭菌，制成固体平板。
第三步：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。
第四步：根据是否能在该培养基上生长筛选出突变菌。
（5）土壤中有些细菌含有脲酶，这些细菌能够将 分解成氨，从而使培养基中加入的 指示剂产生红色透明环。
3、请回答下列与酵母菌有关的问题。 (1)从生态系统的成分上看，酵母菌属于________，它的同化作用类型是________。培养酵母菌时，为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行________。
(2)以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________(不定项)。A．制作果酒 B．由果酒制作果醋 C．制作泡菜
(3)酵母菌菌种A能耐高温，但产酒精率较低，而菌种B不耐高温，产酒精率却较高。为获得耐高温、产酒精率高的酵母菌(目的菌种)，可以将两个菌种进行细胞融合，在融合前首先需要________，然后用PEG诱导融合，最后利用A、B两菌种对某一药物抗药性的差异，对融合子进行筛选。实验中，应将含有融合子的培养液利用________法接种到含有相关药物的基本培养基上。下表为A、B两菌种在几种药物的作用下，生长状况的实验结果。由于A菌种不能独立在基本培养基上生长，所以，据表可以判断，加入________(药物)，可以筛选出融合子。

多菌灵
三唑酮
霜霉狂杀
放线菌酮
菌种A
＋
＋
－
－
菌种B
＋
－
＋
－

注：“＋”可以良好生长，“－”不能生长。
(4)上述(3)中筛选出的融合子还不一定符合生产要求，需要进
行后续筛选，过程如下：将配制好的麦芽汁分装到若干个如图
所示的装置中，再分别接种筛选出的融合子，在________条件
下培养。一段时间后，观察比较并记录每个装置中________，可初步判断融合子的发酵能力；进一步做________条件下产酒精能力的测定，以获得所需的目的菌种。
4、微生物与人类的生活有着密切的联系。请回答下列有关问题。
（1）在果醋、泡菜和果酒的制作过程中，均利用相应微生物的代谢特点进行条件控制，
其中始终需要提供氧气的是 ① 的制作；在杨梅酒的制备过程中，为了提高杨梅的出汁率，在压榨前可加入一定浓度的纤维素酶和果胶酶，其中果胶酶可来自 ② 等微生物；泡菜腌制过程中 ③ 和乳酸菌等主要微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵。
（2）根据微生物的特点，可以利用相应的培养基进行分离或培养，例如用仅以尿素为氮
源培养基可分离能产生 ④ 酶的微生物，在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，其中尿素用 ⑤ 灭菌，经培养后菌落周围会出现 ⑥ 色环带。
（3）与LB全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中的菌落数 ⑨ 。
A. 多 B. 少 C. 相等 D. 几乎为零
（4）利用固体培养基可以进行微生物培养和植物组织培养，两者的培养基明显不同的是
后者⑧ A．需要添加琼脂 B．需要添加有机物 C．需要添加激素 D．需要灭菌处理 
5、我国水果生产发展迅速，由于收获的季节性强，易造成积压，腐烂变质，为了解决上述问题且满足不同人群的需求，可以将水果加工制作成果汁、果酒、果醋等。
在果汁生产中要用到果胶酶，某生物研究小组为了探究果胶酶的某些特性，进行了如下实验：
实验方法：按如图所示的顺序进行操作。

实验结果：对照组与实验组进行了相同时间的实验，结果如下图所示：
（1）①图中自变量是温度，除此之外还可用____来表示。
A．酶的浓度 B．苹果泥的量 C．水的加入量 D．pH
②图中的纵坐标还可用________________来表示。
③实验小组改变了实验条件后重复做以上实验，得到曲线乙，苹果汁的澄清度最高点对应的横坐标是同一位置的原因是_________________。
④步骤b中在果胶酶和苹果泥混合前，将两者分装在不同试管中，恒温的目的是_____。
（2）甲、乙两位同学将水果榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如下图所示。
①在排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是________。
②请找出图中实验操作的错误：甲图中的错误是________________，乙图中的错误是________________。
（3）用酵母菌使葡萄汁产生葡萄酒，当酒精含量达到12%～16%时，发酵就停止了。有关叙述不正确的是（　　）
A．酒精对酵母菌有毒害作用，后期细胞生命活动减弱
B．产生酒精的同时也有CO2生成，所以发酵过程中需拧松瓶盖放气
C．产物积累使pH值下降，同时营养物质减少，种群数量下降
D．氧气过少导致其无法呼吸，细胞中即无法合成ATP
6、墨菊是一种名贵的菊花品种，利用植物组织培养对该品种进行大量繁殖，，流程大致如下：

（1）植物组织培养过程中常用的培养基为 ① ，该培养基由大量元素、微量元素和有机成分组成。
（2）若使用自然生长的茎进行组织培养，则可取一段茎在70%的 ② 中浸泡10 min，再放入5%次氯酸钠溶液中浸泡5 min，然后再用另一相同的溶液浸泡5 min，最后在超净台中用 ③ 清洗，将茎的切段培养在 ④ 培养基中。2～3周后，将生长健壮的丛状苗转入到 ⑤ 培养基中。在合适条件下可培养得到幼苗。幼苗在定植前需经过一段时间的锻炼，即逐渐降低幼苗生活环境中的 ⑥ ，以使幼苗能适应
自然环境。
（3）下列说法不正确的是：（ ⑦ ）
A．本实验使用激素类似物（如萘乙酸和苄基腺嘌呤），而不用植物中的天然激素
B．接种前需对外植体进行灭菌。接种过程始终在酒精灯火焰旁进行
C．茎切段在生芽时需要在日光灯下保持适宜的温度培养
D．生芽培养基中含有琼脂
（4）植物组织脱分化形成愈伤组织过程不需的条件有 ⑧ 。
A．营养　　　　 B．激素 C．CO2 培养箱 D．适宜pH
7、醋杆菌既可以用于生产果醋，某些类型还可用于生产细菌纤维素。下图为果酒和果醋制作的流程图：
挑选苹果
冲 洗
榨 汁
a酒精发酵
b醋酸发酵
果酒汁
果醋汁

（1）为提高苹果的利用率,可以在榨汁过程中使用纤维素酶和 ① 酶，上述处理的效果可用 ② 进行检测。
（2）为缩短制作果醋的周期，采取的措施无效的是 ③ 。
A．用果酒为原料 B．增加醋杆菌的数量
C．将酒-水混合物pH调至7.0 D．发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌污染
（3）醋酸发酵完成的标志是 ④ 。
（4）为了筛选优质醋杆菌用于生产细菌纤维素，下图1操作是分离纯化过程中利用 ⑤ 法进行接种，通常根据 ⑥ 的形状、大小、颜色等特征进行菌种鉴定，将选取的菌种接种到 ⑦ 培养基中临时保藏。
（5）利用筛选出的优质菌种进行生产时，研究人员将培养过程中测得的细菌纤维素产量、培养液中的残糖量和残氮量如图2。图中表示细菌纤维素产量、残糖量和残氮量的曲线分别是 ⑧ 。 A.①②③ B. ①③② C. ②③① D. ③②①

图1 图2
③

②

①

8、下面是有关食醋和泡菜制作的实验，请回答：
（1）若以大米为原料经三步发酵可以制作食醋：
第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成 ① （填中间产物），然后进一步水解成葡萄糖，这一过程可用 ② （填淀粉指示剂）来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。
第二步：用酵母菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是 ③ 。
第三步：用 ④ 菌将乙醇转化成乙酸，这一过程是否需要（是/否） ⑤ 氧气。
（2）若以葡萄为原料。将葡萄榨成汁后装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如下图所示
则图中实验操作的错误之处是 ⑥ 。
（3）借助显微镜对酵母菌进行计数，下列会影响计数准确性的操作是（ ⑦ ）
A．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的酵母菌数
B．用滴管取 1 滴培养液到血球计数板的方格区，盖上盖玻片，进行计数
C．如果酵母菌有芽体，因没有分离成两个子体，要以一个计数
D．方格内酵母菌总数量应不少于 300 个
（4）根据微生物的特点，下列有关控制微生物的发酵条件的各项内容都正确的是（ ⑧ ）

9、果酒果醋作为一种新型调味品或饮料受到广大消费者的喜爱。某研究小组利用苹果进行果酒果醋的制作，请回答以下问题。
（1）为提高苹果的利用率，工厂化生产时，可加入果胶酶和纤维素酶，其中果胶酶可来自
① 等微生物。由于酶在水溶液中不稳定，因此常将酶固定在某种介质上制成 ② 。
（2）下列有关果酒发酵和果醋发酵的叙述正确的是 ③
A．苹果汁装入发酵瓶时，为了造成无氧环境，有利于发酵，最好将瓶装满
B．先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵
C．果酒发酵菌种无具膜细胞器
D．适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖
（3）醋化醋杆菌是严格好氧细菌,广泛存在于自然界中,为了能从野生菌群样液中更好的分离出菌种，常用 ④ 法，通常对获得的纯菌种可以依据 ⑤ 的形状、大小等特征进行初步的鉴定，分离得到的菌种可以在 ⑥ 进行扩大培养，再接种到发酵瓶中。该发酵过程理论上 ⑦ （填“有”、“无”）CO2产生。
（4）在上述细菌培养过程中，有关操作正确的是 ⑧
A．涂布器用火焰灼烧进行灭菌 B．培养基分装到培养皿后进行灭菌
C．倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行
D．分离得到的菌落应先接种在平板上，培养24h后，置于4℃冰箱保存
10、下图是某工厂设计的桑果加工工艺流程。请回答：
(1)为提高出汁率，过程b可使用果胶酶和① 酶水解果胶；采用② 技术则可以提高酶的利用率；过程c通常接种的菌种是③ 。
(2)土壤是微生物的大本营，某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌果胶酶的微生物，应选用以④ 为唯一碳源的固体培养基，通过⑤ 分离微生物，并将培养皿呈
⑥ 状态放置。
(3)果醋的制作需要醋化醋杆菌。将醋化醋杆菌的培养物加在酒水混合物中混匀，倒入发酵瓶前需调pH至⑦ 。 A. 6.0 B. 7.0 c．8.0 D. 9.0
(4)桑果酒和桑果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，下列相关措施正确的是(⑧)
A．桑果汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于酒精发酵
B．桑果酒发酵过程中，每隔一段时间打开瓶盖一次，放出C02
C．桑果醋发酵过程中，需要用脱脂棉来过滤空气
D.桑果醋发酵过程中，要适时充气来调节发酵瓶中的pH
11、（1）啤酒是我们日常生活中最常见的饮料之一。在啤酒生产过程中，发酵是重要环节。
具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意添加 和调低 ，加琼脂后进行 ，最后制成固体平板。
步骤3：将紫外照射后的菌液进行接种。
下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。

获得图A效果的接种方法是 ，获得图B效果的接种方法是 。
步骤4：根据是否能在选择培养基上生长筛选出突变菌。
（2）

上述中A为70% 溶液，B为5% 溶液，再用无菌水清洗，上述操作的目的是为了消毒；而后面的E称之为 。

12、宁夏是全国最适宜生产水果的生态区之一，生产的苹果浓缩果汁酸度优于其他地区的苹果，深受欧美市场欢迎，发展无病毒苗木成为建立高产优质商品苹果基地的重要措施。
（1）下面是宁夏农林科学院进行苹果试管苗培养的一般过程：
离体的植物组织或细胞
b
胚状体或丛芽
完整的小植株
a
c

请填写a～c所表示的内容。 a． b． c．
（2）实验室一般使用保存的培养基母液来制备MS固体培养基，配制母液时，无机物中
浓缩10倍， 浓缩100倍。
（3）该过程中 a、c 的启动关键在于培养基中所加生长素和细胞分裂素的浓度、
以及 。
（4）通过植物组织培养的方法，除了可以快速繁殖优良植物，还可以和
结合培育 。
（5）离体的植物细胞能发育成完整植株的原因是 。
13、某同学欲用组织培养方法快速繁殖百合，其流程如下：
配制培养基
诱导丛状苗
诱导生根
⑦
取材
定植

请回答下列问题：
（1）配好的培养基需经 ① 灭菌后才能使用。用乙醇和次氯酸钠对百合鳞茎进行 ② ，然后在 ③ 中用无菌水冲洗，再用无菌滤纸吸干表面水分，切割后进行接种。
（2）诱导丛状苗时，培养基中应添加的植物激素及配比是 ④ 。
A．生长素浓度高于细胞分裂素浓度 B．生长素浓度低于细胞分裂素浓度
C．生长素浓度低于赤霉素浓度 D．生长素浓度高于赤霉素浓度
（3）诱导生根时，发现不同种类百合的生根能力差异很大，这是因为它们的 ⑤ 不同。将生根后的百合直接定植于土壤中，死亡率很高。改进的措施是将其移至蛭石中，用塑料布罩2-3天后，逐步加大塑料布开口，使其生长环境中的 ⑥ 逐步降低，这一过程即为上述图中的 ⑦ 。
（4）培养过程中，发现培养基上长有多种细菌，若要从中分离出某种细菌，可用接种环挑取少量细菌，在LB培养基上 ⑧ ，形成单 ⑨ 后，再进一步观察确认。
14、微生物与我们生活、健康有着密切的联系，请回答下列问题。
（1）实验室常用的灭菌方法为 ，如果实验器材不能遇水，则用 。
（2）微生物的分离提纯方法主要有 和 法。
（3）培养微生物的培养基根据用途不同，物理性质有所差异。扩大培养一般用 培养基，分离菌种用 培养基。它们在物理性质上的不同主要原因是 。
（4）某些微生物能利用尿素是因为它们能合成分泌 。其分解尿素的方程式为： 。
15、请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上。
Ⅰ.果酒的制作（1）在果酒制作过程中，原料为葡萄和其他 ① ，与它发酵有关的微生物是酵母菌。酵母菌在 ② 条件下进行酒精发酵。
（2）葡萄要在 ③ 溶液中浸泡5分钟，然后用清水冲洗后打成浆状。葡萄浆放入发酵瓶中，装量不要超过 ④ 。
（3）把发酵瓶放在25~30℃条件下发酵，当瓶中 ⑤ ，即表示发酵完成，发酵完成后过滤静置得其上清液即为葡萄酒。
（4）此法获得的葡萄酒度数较低，若要获得酒精度较高的葡萄酒，要在发酵瓶中加入适量的 ⑥ 。
Ⅱ.果醋的制作（1）制作果醋的原料是 ⑦ 。菌种为醋化醋杆菌，也可用 ⑧ 代替。
（2）影响果醋浓度的因素有（ ⑨ ）
A．向发酵瓶中通入空气的量B．果酒的酒精度C．发酵液流出的速度D．接种菌种的量
16、现代人崇尚自然，食物也开始讲究自然。所以目前市场上果汁饮料、果酒、果醋越来越受到人们的青睐。
（1）在果汁加工中，可以添加 ① 酶来提高出汁率和澄清度。该酶通常可以在 ② （填微生物）中生产提取。
（2）为提高果酒的品质，发酵时常采用人工培养的纯净菌种。实验室中获取纯净菌种常用的两种方法是 ③ 。在果酒酿造过程中，如果果汁灭菌不严格，混入了醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？ ④ （填“能”与“不能”）请说明理由 ⑤ 。
（3）制醋过程中，右图乙瓶为发酵瓶，对乙瓶的有关叙述，错误的 是 ⑥
A．乙瓶内装锯末至八分满
B．乙瓶上口通过一个双通活塞与甲瓶（装有酒水混合物）的下口相连
C．乙瓶下口有一直角玻璃管，内塞脱脂棉，此管的另一端要比瓶内锯末低一些
D．醋化醋杆菌的培养物加在酒—水混合物中混匀后，要调pH至 7.0，然后倒入乙瓶中
（4）在果醋发酵过程中，用一种简单方法证明是否由醋
酸生成： ⑦
（5）下列与果酒、果醋制作相关的叙述，正确的是 ⑧
A．两者制作所需要的适宜温度相同
B．果酒发酵只进行无氧发酵；果醋发酵只进行有氧发酵
C．使用的菌种分别是假丝酵母、醋化醋杆菌
D．使用的菌种都具有核糖体、DNA和RNA
17、下图为果酒和果醋制作的实验流程：
（1）为了提高苹果的利用率，可以在榨汁过程中使用纤维素酶和 ① 酶，后者常利用 ② 等微生物来生产。
（2）下列适于酵母菌扩大培养的培养基是 ③
A．无土栽培培养基 B．MS培养基
C．添加蔗糖的豆芽汁培养基 D．蛋白胨和酵母提取物培养基
（3）要筛选得到纯净的酵母菌，通常在固体培养基上划线分离，经培养在划线的末端出现 ④ ，表明菌已分离。在此过程中，正确的操作是 ⑤
A．每次划线时，接种环都需蘸菌液一次
B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
C．在超净台中进行接种时不能关闭过滤风
D．划线分离后将培养皿正放在恒温培养箱中培养
（4）可观察的酒精发酵完毕的标志是 ⑥ 。
（5）在醋酸发酵阶段，要向装置中通入 ⑦ 的空气，此时主要发生的生化反应
是 ⑧ 。
18、有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。

(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、____________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是______________________。
(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和________________，这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。
(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_________________________ ___。
(4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________________，该实验设计是否合理？为什么？_______________________。
(5)示意图A和B中，________表示的是用涂布分离法接种培养后得到的结果。