生物化学-酶化学习题与答案.doc

酶 化 学
一、填空题
1.全酶由________________和________________组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中________________决定酶的专一性和高效率，________________起传递电子、原子或化学基团的作用。
2.酶是由________________产生的，具有催化能力的________________。
3.酶的活性中心包括________________和________________两个功能部位，其中________________直接与底物结合，决定酶的专一性，________________是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。
4.常用的化学修饰剂DFP可以修饰________________残基，TPCK常用于修饰________________残基。
5.酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk作图法)，得到的直线在横轴上的截距为________________，纵轴上的截距为________________。
6.磺胺类药物可以抑制________________酶，从而抑制细菌生长繁殖。
7.谷氨酰胺合成酶的活性可以被________________共价修饰调节；糖原合成酶、糖原磷酸化酶等则可以被________________共价修饰调节。

二、是非题
1.[ ]对于可逆反应而言，酶既可以改变正反应速度，也可以改变逆反应速度。
2.[ ]酶活性中心一般由在一级结构中相邻的若干氨基酸残基组成。
3.[ ]酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。
4.[ ]Km是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶浓度无关。
5.[ ]当[S]>> Km时，v 趋向于Vmax，此时只有通过增加[E]来增加v。
6.[ ]酶的最适温度与酶的作用时间有关，作用时间长，则最适温度高，作用时间短，则最适温度低。
7.[ ]增加不可逆抑制剂的浓度，可以实现酶活性的完全抑制。
8.[ ]正协同效应使酶促反应速度增加。
9.[ ]竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。
10.[ ]酶反应的最适pH只取决于酶蛋白本身的结构。

三、选择题
1.[ ]利用恒态法推导米氏方程时，引入了除哪个外的三个假设？
A.在反应的初速度阶段，E+P→ES可以忽略
B.假设［S］>>［E］，则［S］-［ES］≈［S］
C.假设E+S→ES反应处于平衡状态
D.反应处于动态平衡时，即ES的生成速度与分解速度相等

2.[ ]用动力学的方法可以区分可逆、不可逆抑制作用，在一反应系统中，加入过量S和一定量的I，然后改变［E］，测v，得v～［E］曲线，则哪一条曲线代表加入了一定量的可逆抑制剂？
A.1
B.2
C.3
D.不可确定

3.[ ]在一反应体系中，［S］过量，加入一定量的I，测v～［E］曲线，改变［I］，得一系列平行曲线，则加入的I是：

A.竞争性可逆抑制剂
B.非竞争性可逆抑制剂
C.反竞争性可逆抑制剂
D.不可逆抑制剂

4.[ ]竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列哪种因素无关？
A.作用时间
B.抑制剂浓度
C.底物浓度
D.酶与抑制剂的亲和力的大小
E.酶与底物的亲和力的大小

5.[ ]酶的竞争性可逆抑制剂可以使：
A.Vmax减小，Km减小
B.Vmax增加，Km增加
C.Vmax不变，Km增加
D.Vmax不变，Km减小
E.Vmax减小，Km增加

6.[ ]溶菌酶在催化反应时，下列因素中除哪个外，均与酶的高效率有关？
A.底物形变
B.广义酸碱共同催化
C.邻近效应与轨道定向
D.共价催化

7.[ ]丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于：
A.反馈抑制
B.底物抑制
C.竞争性可逆抑制
D.非竞争性可逆抑制
E.反竞争性可逆抑制

8.[ ]酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？
A.天冬氨酸
B.脯氨酸
C.赖氨酸
D.丝氨酸
E.甘氨酸

9.[ ]测定酶活性时，通常以底物浓度变化小于多少时测得的速度为反应的初速度？
A.0.1%
B.0.5%
C.1%
D.2%
E.5%

10.[ ]在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体？
A.His的咪唑基
B.Lys的ε氨基
C.Arg的胍基
D.Cys的巯基
E.Trp的吲哚基

四、问答与计算
1.试指出下列每种酶具有哪种类型的专一性。
(1)脲酶(只催化尿素NH2CONH2的水解，但不能作用于NH2CONHCH3)
(2)β-D-葡萄糖苷酶(只作用β-D-葡萄糖形成的各种糖苷，但不能作用于其他的糖苷，例如果糖苷)
(3)酯酶(作用于R1COOR2的水解反应)
(4)L-AA氧化酶(只作用于L-AA，而不能作用于D-AA)
(5)反丁烯二酸水合酶[只作用于反丁烯二酸(延胡索酸)，而不能作用于顺丁烯二酸 (马来酸)]
(6)甘油激酶(催化甘油磷酸化，生成甘油-1-磷酸)

2.称取25mg蛋白酶配成25ml溶液，取2ml溶液测得含蛋白氮0.2mg，另取0.1ml溶液测酶活力，结果每小时可以水解酪蛋白产生1500ug酪氨酸，假定1个酶活力单位定义为每分钟产生1ug酪氨酸的酶量，请计算：(1)酶溶液的蛋白浓度及比活(2)每克酶制剂的总蛋白含量及总活力。

3.Vmax和米氏常数可以通过作图法求得，试比较v～［S］图，双倒数图，v～v/［S］作图，［S］/v～［S］作图及直接线性作图法求Vmax和Km的优缺点。

4.有时别构酶的活性可以被低浓度的竞争性抑制剂激活，请解释。

5.在很多酶的活性中心均有His残基参与，请解释。

答案：
一填空题
1 酶蛋白 辅助因子 酶蛋白 辅助因子
2 活细胞 生物催化剂
3 结合部位 催化部位 结合部位 催化部位
4 丝氨酸 组氨酸
5 -1/Km 1/V
6 二氢叶酸合成酶
7 腺苷酰化 磷酸化
二是非题
1对 2错 3对 4对 5对 6错 7对 8错 9错 10错
三选择题
1C 2C 3D 4A 5C 6D 7C 8D 9A 10C
四问答与计算
1 (1)绝对专一性
(2)相对专一性（族专一性）
(3)相对专一性（键专一性）
(4)立体专一性（旋光异构专一性）
(5)立体专一性（顺反异构专一性）
(6)立体专一性（识别从化学角度看完全对称底两个基团）

2 （1）蛋白浓度＝0.625mg/mL 比活＝400U/mg
(2)总蛋白＝625mg 总活力＝2.5×105U

3 v～［S］图是双曲线的一支，可以通过其渐近线求Vmax，v=1/2Vmax时对应的［S］为Km。优点是比较直观，缺点是实际上测定时不容易达到Vmax，所以测不准。
1/v～1/［S］图是一条直线，它与纵轴的截距为1/Vmax，与横轴的截距为-1/Km。优点是使用方便，Vmax和Km都较容易求，缺点是实验得到的点一般集中在直线的左端，作图时直线斜率稍有偏差，Km就求不准。
v～v/［S］图也是一条直线，它与纵轴的截距为Vmax，与横轴的截距为Vmax/Km，斜率即为-Km。优点是求Km很方便，缺点是作图前计算较繁。
［S］/v～［S］图也是一条直线，它与纵轴的截距为Km /Vmax，与横轴的截距为-Km。优缺点与v～v/［S］图相似。
直接线形作图法是一组交于一点的直线，交点的横坐标为Km，纵坐标为Vmax，是求Vmax和Km最好的一种方法，不需计算，作图方便，结果准确。

4 底物与别构酶的结合，可以促进随后的底物分子与酶的结合，同样竞争性抑制剂与酶的底物结合位点结合，也可以促进底物分子与酶的其它亚基的进一步结合，因此低浓度的抑制剂可以激活某些别构酶。

5 酶蛋白分子中组氨酸的侧链咪唑基pKa值为6.0～7.0，在生理条件下，一半解离，一半不解离，因此既可以作为质子供体（不解离部分），又可以作为质子受体（解离部分），既是酸，又是碱，可以作为广义酸碱共同催化反应，因此常参与构成酶的活性中心。