基于NRF2_FPN1通路探究黄芪甲苷减轻糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制.pdf
《基于NRF2_FPN1通路探究黄芪甲苷减轻糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《基于NRF2_FPN1通路探究黄芪甲苷减轻糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制.pdf(6页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、论著基于N R F 2/F P N 1通路探究黄芪甲苷减轻糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制*邓长青 张京兰 金海涛(武汉市中医医院脑病科,湖北 武汉 4 3 0 0 1 4)【摘要】目的 探讨基于核因子E 2相关因子2(N R F 2)/膜铁转运蛋白1(F P N 1)通路对黄芪甲苷(A S)减轻糖尿病(DM)心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制。方法 通过高糖饲料及链脲佐菌素(S T Z)建立DM大鼠模型,将DM造模成功的5 0只大鼠通过结扎左冠状动脉前降支构建DM心肌梗死大鼠模型,将造模成功的5 0只大鼠随机分为梗死组、A S低剂量(A S-L,2 0 m g/k g A S)组、A S中剂
2、量(A S-M,4 0 m g/k g A S)组、A S高剂量(A S-H,8 0 m g/k g A S)组、A S-H+N R F 2抑制剂(ML 3 8 5,8 0 m g/k g A S+3 0 m g/k g ML 3 8 5)组,同时以1 0只开胸大鼠设为假手术组。干预结束后,检测心功能 左心室射血分数(L V E F)、肌酸激酶同工酶-MB(C K-MB)、肌酸激酶(C K)指标;2,3,5-氯化三苯基四唑(T T C)检测心肌梗死体积比;试剂盒检测铁含量水平;HE染色检测大鼠心肌组织病理变化;q R T-P C R及W e s t e r n b l o t分析心肌组织中N
3、R F 2、谷胱甘肽过氧化酶4(G P X 4)、F P N 1 mR NA及蛋白表达。结果 与假手术组相比,梗死组大鼠病理损伤严重,L V E F、N R F 2、G P X 4、F P N 1 mR NA及蛋白表达显著降低,梗死体积比、铁离子含量、C K-MB、C K显著增加(均P0.0 5);与梗死组相比,A S-L组、A S-M组、A S-H组大鼠病理损伤得到改善,L V E F、N R F 2、G P X 4、F P N 1 mR NA及蛋白表达显著增加,梗死体积比、铁离子含量、C K-MB、C K显著降低,呈现剂量依赖性(均P0.0 5);与A S-H组相比,A S-H+ML 3
4、8 5组病理损伤相对严重,L V E F、N R F 2、G P X 4、F P N 1 mR NA及蛋白表达显著降低,梗死体积比、铁离子含量、C K-MB、C K显著增加(均P0.0 5)。结论 A S可减轻DM心肌梗死大鼠心肌损伤,可能通过激活N R F 2/F P N 1通路抑制铁死亡实现。【关键词】N R F 2/F P N 1通路;黄芪甲苷;糖尿病心肌梗死;心肌损伤【中图分类号】R 5 8 7.1 【文献标志码】A D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.1 0.0 0 6 基金项目:武汉市医学科研项目(WZ 2 0 C
5、 3 6)通讯作者:张京兰,副主任医师,E-m a i l:x k e 3 7 5 0 1 11 6 3.c o m引用本文:邓长青,张京兰,金海涛.基于N R F 2/F P N 1通路探究黄芪甲苷减轻糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制J.西部医学,2 0 2 3,3 5(1 0):1 4 3 9-1 4 4 3,1 4 5 1.D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.1 0.0 0 6E x p l o r i n g t h e m e c h a n i s m o f a s t r a g a l o s i d e
6、 A i n a l l e v i a t i n g m y o c a r d i a l i n j u r y i n r a t s w i t h m y o c a r d i a l i n f a r c t i o n i n d i a b e t e s m e l l i t u s b a s e d o n N R F 2/F P N 1 p a t h w a yD E N G C h a n g q i n g,Z H A N G J i n g l a n,J I N H a i t a o(D e p a r t m e n t o f E n c e
7、p h a l o p a t h y,W u h a n H o s p i t a l o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n e,W u h a n 4 3 0 0 1 4,C h i n a)【A b s t r a c t】O b j e c t i v e T o e x p l o r e t h e m e c h a n i s m o f a s t r a g a l o s i d e A(A S)i n a l l e v i a t i n g m y o c a r d i a l i n j u
8、 r y i n r a t s w i t h m y o c a r d i a l i n f a r c t i o n i n d i a b e t e s m e l l i t u s(DM)b a s e d o n n u c l e a r f a c t o r E 2-r e l a t e d f a c t o r 2(N R F 2)/f e r r o p o r t i n 1(F P N 1)p a t h w a y.M e t h o d s DM r a t m o d e l w a s e s t a b l i s h e d b y h i
9、g h s u g a r d i e t a n d s t r e p t o z o t o c i n(S T Z).T h e 5 0 r a t s s u c c e s s f u l l y m o d e l i n g DM w a s g i v i n g l i g a t i n g t h e a n t e r i o r d e s c e n d i n g b r a n c h o f l e f t c o r o n a r y a r t e r y t o e s t a b l i s h t h e r a t m o d e l o f
10、DM m y o c a r d i a l i n f a r c t i o n.T h e 5 0 r a t s w i t h s u c c e s s f u l m o d e l i n g w e r e r a n d o m l y d i v i d e d i n t o i n f a r c t i o n g r o u p,l o w d o s e A S(A S-L,2 0 m g/k g A S),m i d d l e d o s e A S(A S-M,4 0 m g/k g A S),h i g h d o s e A S(A S-H,8 0 m
11、 g/k g A S)g r o u p,a n d A S-H+N R F 2 i n h i b i t o r(ML 3 8 5,8 0 m g/k g A S+3 0 m g/k g ML 3 8 5)g r o u p.M e a n t i m e,1 0 o p e n c h e s t r a t s w e r e t a k e n a s t h e s h a m o p e r a t i o n g r o u p.A f t e r t h e i n t e r v e n t i o n,c a r d i a c f u n c t i o n l e f
12、 t v e n t r i c u l a r e j e c t i o n f r a c t i o n(L V E F),c r e a t i n e k i n a s e i s o e n z y m e-MB(C K-MB),c r e a t i n e k i n a s e(C K)i n d e x e s w e r e m e a s u r e d;2,3,5-t r i p h e n y l t e t-r a z o l i u m c h l o r i d e(T T C)w a s u s e d t o m e a s u r e t h e v
13、 o l u m e r a t i o o f m y o c a r d i a l i n f a r c t i o n.T h e k i t w a s u s e d t o d e t e c t t h e i-9341西部医学 2 0 2 3年1 0月 第3 5卷第1 0期 M e d J W e s t C h i n a,O c t o b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 0r o n c o n t e n t l e v e l;HE s t a i n i n g w a s u s e d t o d e t e c t t h e p
14、a t h o l o g i c a l c h a n g e s o f m y o c a r d i u m i n r a t s.mR NA a n d p r o t e n e x-p r e s s i o n o f N R F 2,g l u t a t h i o n e p e r o x i d a s e 4(G P X 4)a n d F P N 1 i n m y o c a r d i u m e v e a n a l y z e d b y q R T-P C R a n d W e s t e r n b l o t.R e s u l t s C
15、o m p a r e d w i t h t h e s h a m o p e r a t i o n g r o u p,t h e p a t h o l o g i c a l i n j u r y o f r a t s i n t h e i n f a r c t i o n g r o u p w a s s e r i-o u s,t h e e x p r e s s i o n o f L V E F,mR NA a n d p r o t e i n e x p r e s s i o n o f N R F 2,G P X 4 a n d F P N 1 d e
16、c r e a s e d o b v i o u s l y,t h e i n f a r c t v o l u m e r a t i o,i r o n i o n c o n t e n t,C K-MB a n d C K i n c r e a s e d o b v i o u s l y(P0.0 5).C o m p a r e d w i t h t h e i n f a r c t i o n g r o u p,t h e p a t h o l o g i c a l i n j u r y o f r a t s i n A S-L g r o u p,A S
17、-M g r o u p a n d A S-H g r o u p w a s i m p r o v e d,t h e e x p r e s s i o n o f L V E F,mR NA a n d p r o t e i n e x p r e s s i o n o f N R F 2,G P X 4 a n d F P N 1 i n c r e a s e d o b v i o u s l y,t h e i n f a r c t v o l u m e r a t i o,i r o n i o n c o n t e n t,C K-MB a n d C K d
18、e c r e a s e d o b v i o u s l y,t h e y w e r e d o s e d e p e n d e n t(P0.0 5).C o m p a r e d w i t h t h e A S-H g r o u p,t h e p a t h o l o g i-c a l i n j u r y i n t h e A S-H+ML 3 8 5 g r o u p w a s r e l a t i v e l y s e r i o u s,t h e e x p r e s s i o n o f L V E F,mR NA a n d p r
19、 o t e i n e x p r e s s i o n o f N R F 2,G P X 4 a n d F P N 1 d e c r e a s e d o b v i o u s l y,t h e i n f a r c t v o l u m e r a t i o,i r o n i o n c o n t e n t,C K-MB a n d C K i n c r e a s e d o b v i-o u s l y(P0.0 5).C o n c l u s i o n A S c a n a l l e v i a t e t h e m y o c a r d
20、i a l i n j u r y o f DM m y o c a r d i a l i n f a r c t i o n r a t s,w h i c h m a y b e a-c h i e v e d b y a c t i v a t i n g N R F 2/F P N 1 p a t h w a y t o i n h i b i t i r o n d e a t h.【K e y w o r d s】N R F 2/F P N 1 p a t h w a y;A s t r a g a l o s i d e A;M y o c a r d i a l i n f
21、a r c t i o n i n d i a b e t e s m e l l i t u s;M y o c a r d i a l i n j u r y 糖尿病(D i a b e t e s m e l l i t u s,DM)的主要特征为胰岛素分泌不足、高血糖和高脂血症,属于一种代谢性疾病,其发病率逐渐上升,造成DM患者死亡的主要原因是患者发生心血管并发症,而心肌梗死是死亡率最高的 并 发 症,推 测 可 能 与DM心 肌 缺 血 损 伤 有关1-2,因此深入探索DM心肌梗死引发的心肌损伤机制有利于开发治疗方案。黄芪甲苷(A s t r a g a l o s i d e A,
22、A S)是从黄芪中提取的黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤活性等广泛的药理活性,在缺血/再灌注(I s c h e m i a/r e p e r f u s i o n,I R)损伤中可发挥保护心脏的作用3。据报道4铁稳态失衡与多种疾病有关,如心脏病、神经退行性疾病、癌症和贫血等。膜铁转运蛋白1(F e r r o p o r t i n 1,F P N 1)是在哺乳动物中唯一被发现的与铁释放相关的跨膜蛋白,在系统性铁稳态中起关键作 用5。核 因 子E 2相 关 因 子2(N u c l e a r f a c t o r E 2-r e l a t e d f a c t o r 2,
23、N R F 2)是抗氧化反应的关键调节因子,参与保护心肌免于铁死亡6。然而,A S能否通过N R F 2/F P N 1对DM心肌梗死心肌损伤产生影响尚不清楚。因此本研究通过建立DM心肌梗死大鼠模型,以不同浓度的A S干预,探索其对DM心肌梗死大鼠心肌损伤的影响。1 材料与方法1.1 实验动物 雄性S p r a g u e-D a w l e y大鼠(2 0 02 2 0 g,6周龄)购自博济医药科技股份有限公司,许可证号:S Y X K(粤)2 0 2 2-0 2 7 9。将大鼠饲养在标准实验室条件下,其中温度为(2 52),相对湿度为(6 01 5)%。所有实验程序均经动物护理和使用委员
24、会批准,伦理批号:2 0 2 2-0 6-0 7 5。1.2 实验试剂 成都慕思生物科技有限公司购入A S(纯度9 8%);S i g m a C h e m i c a l提供链脲佐菌素(S t r e p t o z o t o c i n,S T Z)、2,3,5-氯化三苯基四唑(2,3,5-t r i p h e n y l t e t r a z o l i u m c h l o r i d e,T T C);M e d-C h e-m E x p r e s s公司提供ML 3 8 5;S e r v i c e b i o提供P r i m e-S c r i p t R T试
25、剂盒、A b c a m公司提供N R F 2、F P N 1、谷胱甘肽过氧化酶4(G l u t a t h i o n e p e r o x i d a s e 4,G P X 4)一抗以及铁离子试剂盒。1.3 方法1.3.1 DM心肌梗死大鼠模型的制备及干预 所有大鼠适应性饲养5 d后,随机分为假手术组(1 0只)及造模组(5 3只),选取造模组大鼠参照刘宇等7方法进行制备DM大鼠模型,大鼠给予8周的高糖饲料喂养,随后腹腔注射6 5 m g/k g S T Z,假手术组给予等体积的柠檬酸钠缓冲液腹腔注射,并以普通饲料喂养。7 2 h后(禁食6 h),大鼠出现高血糖(血糖高于1 6.7
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 基于 NRF2_FPN1 通路 探究 黄芪 减轻 糖尿病 心肌梗死 大鼠 心肌 损伤 作用 机制
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。