基因检测及骨髓切片活检与血清TK1在骨髓增生异常综合征与溶血性贫血鉴别诊断中的研究.pdf
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1、实验与检验医学 2023 年 6 月第 41 卷第 3 期 Experimental and Laboratory Medicine,Jun.2023,Vol.41,No.3基因检测及骨髓切片活检与血清 TK1 在骨髓增生异常综合征与溶血性贫血鉴别诊断中的研究卢金金,曹天星渊河南省中医药大学第二附属医院河南省中医院袁河南 郑州 450002冤MDS 是一种血液系统恶性疾病袁 与造血干细胞恶性克隆有关袁多表现为造血障碍或衰竭尧血细胞减少等1-3袁临床证实 MDS 与白血病相关袁约三成 MDS 患者易进展至急性髓系白血病4-5遥 MDS 在老年群体中多发袁其病因复杂尚未明确袁可能与长期接触强电磁场
2、尧辐射或有机溶剂有关6-7袁目前临床诊断 MDS 的方式主要为骨髓细胞形态学及核型检测8-9遥MDS 临床征象表现为贫血袁但与 HA尧巨幼细胞贫血渊Megaloblastic anemia袁MA冤尧再生障碍性贫血渊Aplastic anemia袁AA冤等形态学相似袁HA 是由红细胞存活率下降且灭亡速度超过骨髓代偿而导致的贫血袁是一种血液系统良性疾病10-11袁在临床上与低原始细胞 MDS 核型表现相似袁故难以鉴别袁给临床诊断带来困难遥 为了让患者早诊断尧 早治疗尧预后佳袁对 MDS 及 HA 进行准确鉴定至关重要12-13遥 血清 TK1 是细胞质中与细胞增殖相关的一种关键酶袁其表达量与细胞增
3、殖特性相关袁其浓度上升预示着肿瘤细胞的增多14-15遥 目前袁 通过血清TK1 诊断 MDS 与 HA 的文章稀缺袁使用 ROC 曲线对其诊断价值做出分析的文章尚无袁 故本研究通过探究基因检测尧 骨髓活检切片及血清 TK1 在MDS 与 HA 患者中的诊断价值袁 为其临床诊断及治疗提供科学依据袁现将研究结果报告如下遥1 资料与方法1.1 一般资料 将本院 2016 年 1 月至 2020 年 12月收治的 63 例 MDS 患者与 57 例 HA 患者作为研究对象袁回顾性分析其临床资料遥 纳入标准院渊1冤MDS尧HA 的 诊 断 标 准 均 符 合 2008 年WHO 分类标准曰渊2冤 均经病
4、理确诊为 MDS 或 HA患者曰渊3冤临床资料完整曰渊4冤贫血患者检查前未服用影响造血功能药物或行输血遥 排除标准院渊1冤合并认知异常尧 精神疾病曰渊2冤 合并其他恶性肿瘤曰渊3冤合并妊娠尧哺乳期妇女曰渊4冤合并感染疾病曰渊5冤合并重要脏器功能异常遥1.2 方法 收集所有患者性别尧年龄尧血红蛋白尧血小板计数等一般临床资料遥骨髓活检切片检查院骨髓活检针渊B65-01 型冤进行局部麻醉后行骨髓穿刺术袁 取长度逸0.3 cm骨髓标本袁脱水包埋处理后切片 3 滋m 厚袁染色后镜下观察样本中是否存在幼红细胞簇异常分布尧幼稚前体细胞异常定位 渊Nomallocalization of im鄄mature
5、precursors袁ALIP冤尧 单圆核及多圆核病态巨摘要:目的 探究基因检测及骨髓活检切片与血清胸苷激酶 1 渊Thymidine kinase 1袁TK1冤 在骨髓增生异常综合征渊Myelodysplastic syndrome袁MDS冤与溶血性贫血渊Hemolytic anemia袁HA冤中的诊断价值遥方法 回顾性分析本院 2016 年 1 月至2020 年 12 月收治的 63 例 MDS 患者与 57 例 HA 患者临床资料袁比较两组患者一般临床特征尧基因检测结果尧骨髓活检特征及血清 TK1 水平差异袁通过受试者工作特征曲线渊Receiver operating character
6、istic curve袁ROC冤探究基因检测尧骨髓活检特征及血清 TK1 水平对 MDS 与 HA 的诊断价值遥 结果 渊1冤两组患者性别尧年龄尧血红蛋白差异无统计学意义渊P0.05冤袁MDS 组患者血小板计数显著低于 HA 组袁P0.05曰渊2冤MDS 组患者基因异常率 47.62%渊30/63冤显著高于 HA 组患者基因异常率 0.00%渊0/57冤袁P0.05曰渊3冤MDS 组患者骨髓活检中出现 ALIP 与单圆核尧 多圆核病态巨核细胞的概率显著高于 HA 组袁P0.05曰渊4冤MDS 组血清 TK1 水平显著高于 HA 组袁P0.05曰渊5冤 血清 TK1 区分 MDS 与 HA 诊断
7、的 AUC 为 0.936袁 敏感度为 93.7%袁 特异度为 93.0%袁P0.05遥 结论 MDS 患者血清 TKl 水平浓度较高袁能够作为区分 MDS 与 HA 的诊断指标袁基因检测及骨髓活检切片能够成为鉴别 MDS 与 HA 的辅助诊断指标袁三项指标联合检测能够一定程度上提高诊断的准确性遥关键词:基因检测曰骨髓活检切片曰胸苷激酶-1曰骨髓增生异常综合征曰溶血性贫血中图分类号:R556.6文献标识码:A文章编号:1674-1129(2023)03-0292-05DOI院10.3969/j.issn.1674-1129.2023.03.01320210950 检验与临床 292窑窑实验与检
8、验医学 2023 年 6 月第 41 卷第 3 期 Experimental and Laboratory Medicine,Jun.2023,Vol.41,No.3核细胞情况遥基因检测院取 23 mL 的骨髓标本袁通过乙二胺四乙酸进行抗凝处理袁 依据 2院1 比例加入 Tizol提取 mRNA 后逆转录 cDNA袁 采用荧光定量 PCR检测患者基因突变尧融合尧数量异常增多情况遥MDS组与 HA 组涉及的经典基因异常主要为 N-RAS 基因尧FMS 样的酪氨酸激酶 3 渊Fms-like tyrosine ki鄄nase 3袁FLT3冤尧急性粒细胞性白血病 1 基因渊AcuteMyeloid
9、Leukemia 1 Gene袁AML1冤尧 逆转录病毒结合位点-1 渊Cotropicvirusintegrationsite 1袁EVI-1冤尧TEL 基因 渊ETV6 基因冤尧 混合谱系白血病(Mixedlineage leukemia袁MLL)基因尧人体抑癌基因 p53尧干扰素调节因子 1(Interferon regulatory factor-1袁IRF-1)基因突变尧融合或异常表达等遥采集所有患者清晨空腹肘静脉血 3 mL袁 采用3 500 r/min 离心 10 min 后分离上层血清袁 将其放置在-70益冰箱内保存待测遥 采用酶免疫点印迹化学发光法检测所有患者血清 TK1 水
10、平 渊检测结果如图 1-4冤袁仪器为 LAS4000 型化学发光成像分析仪袁试剂盒购自上海语纯生物科技有限公司袁所有操作过程按照说明书由同一组检验人员严格执行遥1.3 统计学处理 采用 SPSS 22.0 统计软件进行数据分析袁计数资料用 n渊%冤表示袁进行 字2检验曰符合正态分布的计量资料用渊x依s冤表示袁行 t 检验袁采用ROC 曲线分析血清 TK1 对区分 MDS 与 HA 的诊断价值袁以 P0.05冤袁MDS 组患者血小板计数显著低于 B组袁组间差异有统计学意义渊P0.05冤袁见表 1遥2.2 两组患者基因检测分析比较 MDS 组患者基因异常 30 例 渊47.62%冤袁HA 组患者基
11、因异常 0 例渊0.00%冤袁差异有统计学意义渊字2=36.190袁P=0.0000.05冤遥2.3 两组患者骨髓活检切片特征比较 MDS 患者图 1 TK1 染色阴性图 2 TK1 染色弱阳性图 3 TK1 染色阳性图 4 TK1 染色强阳性293窑窑实验与检验医学 2023 年 6 月第 41 卷第 3 期 Experimental and Laboratory Medicine,Jun.2023,Vol.41,No.3骨髓活检分析结果显示袁出现 32 例幼红细胞簇异常分布尧44 例 ALIP 与 34 例单圆核与多圆核病态巨核细胞袁HA 组出现 29 例幼红细胞簇异常分布与 5 例 AL
12、IP袁 未发现单圆核与多圆核病态巨核细胞曰两组患者 ALIP 与单圆核与多圆核病态巨核细胞的组间差异有统计学意义渊P0.05冤袁见表 2遥2.4 两组患者血清 TK1 水平比较 MDS 组血清TK1 水平显著高于 HA 组袁组间差异有统计学意义渊P0.05冤袁见表 3遥2.5 血清 TK1 对区分 MDS 与 HA 的诊断价值分析ROC 曲线分析显示袁 血清 TK1 区分 MDS 与 HA诊断的 AUC 为 0.936袁敏感度为 93.7%袁特异度为93.0%袁数据结果均有统计学意义渊P0.05冤袁见表4尧图 5遥3 讨论MDS 患者存在白血病的征兆袁 已成为危害患者生命健康的恶性疾病袁 大量
13、患者在 MDS 病发后进展至急性髓系白血病16-18袁且部分患者因误诊尧错诊等因素导致错过最佳的对症治疗机会袁 预后情况较差19遥 MDS 与 HA 临床表现缺乏特异性袁两类患者均存在贫血尧乏力情况袁常规使用药物治疗并不能达到理想的治疗效果袁 且对于部分骨髓中原始细胞低的患者来说袁增加了诊断的难度20-21遥本研究通过分析基因检测尧 骨髓活检切片与血清TK1 在诊断 MDS 与 HA 患者中的区别袁 旨在为两类患者的鉴别提供有效参考和依据袁 为患者治疗及预后保驾护航遥本研究显示两组患者一般资料中血小板计数的差异有统计学意义渊P0.05冤袁由此表明 MDS 患者采取该种方式对 MDS 粒系尧 巨
14、核系病态的检出率较高袁能够作为临床辅助诊断的有效方式遥 TK1 是胸苷激酶渊Thymidine kinase 袁TK冤的一种袁主要在机体增殖细胞中表现袁存在于脾脏尧骨髓等组织中袁通过细胞质进行表达袁 且与 DNA 的作用机制相关遥 本研究中 MDS 患者的血清 TK1 表达量显著高于 HA 患者袁 且 TK1 对诊断 MDS 与 HA 的敏感度较高袁 预示着能够将血清 TK1 作为鉴别诊断 MDS的有效标志物袁 究其原因在于袁 随着肿瘤中 DNA的大量合成袁 肿瘤细胞增殖与分化的速度加快袁TK1 表达量突增23-24遥 MDS 是一种造血干细胞恶性多克隆性疾病袁 该类患者骨髓及其余造血组织细胞
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