淋巴瘤基因克隆性重排检测.ppt
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1、专注分子诊断|引领精准医学淋巴瘤基因克隆性重排和淋巴瘤基因克隆性重排和IGHV体细胞超突变检测体细胞超突变检测.Focus On Molecular Diagnosis|Leading Precision Medicine血液血液肿瘤肿瘤形态学形态学 (Morphology)聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)毛细管凝胶电泳毛细管凝胶电泳(CE)荧光实时定量荧光实时定量PCR(RTQT-PCR)一代测序一代测序(Sanger)二代测序二代测序(NGS)分子生物学分子生物学 (Molecular)免疫组化(IHC)流式细胞术(流式细胞术(FCM)免疫学免疫学 (Immunology)
2、荧光原位杂交(荧光原位杂交(FISH)细胞遗传学细胞遗传学(Cytogenetics)辅助诊断辅助诊断预后分析预后分析指导用药指导用药MRD检测检测血液肿瘤(常规肿瘤)检测方案血液肿瘤(常规肿瘤)检测方案-MICM综合分子检测综合分子检测(旌准方案旌准方案).专注分子诊断|引领精准医学分子检测检测基因方法IG/TCR基因重排基因重排IGH,IGK,IGL,TRB,TRD,TRGGEL(PAGE)ABI(CE)NGSIGHV超突变超突变IGHGEL(PAGE)ABI(CE)NGS基因突变基因突变EZH2,DNMT3A,IDH2SangerNGSMoffitt,A.B.and S.S.Dave(2
3、017).J Clin Oncol 35(9):955-962.分子检测分子检测-淋巴瘤淋巴瘤.Focus On Molecular Diagnosis|Leading Precision Medicine最丰富的阳性对照5BIOMED-2唯一授权的商品化试剂1全面涵盖各种TB细胞重排类型可疑淋巴组织增生性疾病克隆性分析的“金标准”超过400例的临床样本验证,反应体系稳定,结果可靠324淋巴细胞克隆性基因重排检测产品特点淋巴细胞克隆性基因重排检测产品特点.专注分子诊断|引领精准医学B-Cell Receptors(BCR)/Immunoglobulins(Ig)T-Cell Receptor(
4、TCR)蛋白基因染色体定位Ig重链IGH14q32Ig轻链 IGK2p12Ig轻链IGL22q11蛋白基因染色体定位TCRTCRTRA14q11TCRTCRTRB7q32TCRTCRTRG7p15 TCRTCRTRD14q11.2淋巴细胞克隆性基因重排检测的目标分子淋巴细胞克隆性基因重排检测的目标分子Ig和和TCR-单一单一基因重排,即恶性淋巴细胞基因重排,即恶性淋巴细胞.专注分子诊断|引领精准医学IGH,TRB&TRD:V,D,and J IGK,IGL,and TRG:V and J regions 正常正常淋巴细胞成熟过程/良性病变多多克隆性多种多种形式的基因重排恶性恶性淋巴瘤发生的过程
5、单单克隆性突出单一单一形式的基因重排多样性与克隆性多样性与克隆性.专注分子诊断|引领精准医学鉴别诊断:明确是淋巴组织反应性还是淋巴细胞恶性增殖鉴别诊断:明确是淋巴组织反应性还是淋巴细胞恶性增殖辅助诊断:少见类型淋巴瘤,如肝脾辅助诊断:少见类型淋巴瘤,如肝脾T T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤亚类分析:明确是亚类分析:明确是B B淋巴恶性增殖还是淋巴恶性增殖还是T T细胞恶性增殖细胞恶性增殖区分同一患者两种淋巴细胞恶性肿瘤,包括复发与继发淋巴瘤区分同一患者两种淋巴细胞恶性肿瘤,包括复发与继发淋巴瘤微小残留病灶监测,评估治疗效果或复发风险(微小残留病灶监测,评估治疗效果或复发风险(NGSNGS方法)方法)细
6、胞免疫治疗监测,监测回输细胞免疫治疗监测,监测回输T T细胞增殖状况和淋巴组织来源肿瘤细胞清除效果(细胞增殖状况和淋巴组织来源肿瘤细胞清除效果(NGSNGS)5%15%的病例表现复杂,即使做了大量的免疫标志也可能难以鉴别其良恶性,需要进一步的手段区分。的病例表现复杂,即使做了大量的免疫标志也可能难以鉴别其良恶性,需要进一步的手段区分。利用分子生物学手段分析利用分子生物学手段分析Ig和和TCR基因的克隆性重排被基因的克隆性重排被WHO公认为该疾病诊断手段的重要补充。公认为该疾病诊断手段的重要补充。淋巴细胞克隆性基因重排检测的临床意义淋巴细胞克隆性基因重排检测的临床意义.专注分子诊断|引领精准医学
7、基于PCR检测技术,简便、快速、成本较低,所需DNA量少,对DNA质量要求不高。灵敏度高于10%,需配制胶,安全清洁性较差。基于PCR-毛细管电泳检测技术,敏感性高,检测周期较长,结果更加直观可靠目前市场最被接受的检测方法。灵敏度无法满足MRD要求要求,难以定量和得到序列。新兴技术,更高灵敏度(10-6),更高分辨率,更高的通量,更广泛的应用。但成本高,仪器贵,操作复杂,时间长。(IGH,IGK,)()(IGL)()(TRB,TRD,)()(TRG)BIOMED-2方方案,唯一授权案,唯一授权)IGHV(依据(依据ERIC指南)指南)IGH,IGK,TRB,TRGIGHV基于不同方法的产品系列
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