四川理工学院学院微生物工程工艺期末考试复习资料.doc

微生物工程工艺原理复习资料
一、课后思考题
1. ★微生物工业对菌种的要求。（6点）
（1）所需培养基易得，价格低廉
（2）培养和发酵条件温和（糖浓度、温度、pH、溶解氧、渗透压等）
（3）生长速度和反应速度较快，发酵周期短
（4）单产高（选择野生型、营养缺陷型或调节突变株）
（5）抗病毒能力强（噬菌体）
（6）菌种纯粹，不易变异退化，稳定性好
（7）菌体不是病源菌，不产生任何有害的生物活性物质和毒素（包括抗生素、激素和毒素），保证安全.
2. ★微生物菌种保存的原理及方法（至少5种）。
原理：根据菌种的生物生理、生化特点，创造条件使菌种的代谢活动处于不活泼状态。
方法：定期移植低温保藏法、液氮超低温保藏法、甘油低温保藏法、沙土干燥法、麸皮干燥法、蒸馏水保藏法、冷冻干燥保藏法。
3.★菌种衰退的原因、表现及防止菌种衰退的方法
菌种退化是指整个菌体在多次接种传代过程中逐渐造成菌种的发酵能力降低、繁殖能力降低、发酵产品的得率降低的现象。（名）
菌种退化：菌种的发酵能力降低、繁殖能力降低、发酵产品的得率降低.
防止菌种衰退的方法：A、从菌种选育方面考虑。B、尽量减少传代次数。C、创造良好的培养条件。D、利用不易衰退的细胞传代。E、采用有效的菌种保藏方法
4.大规模工业生产常用的培养方法:A、固体培养（曲法培养）：浅盘固体培养 深层固体培养。B、液体培养：浅盘液体培养 液体深层培养。C、载体培养：用天然（或人工）多孔材料代替麦麸之类固态基质作微 生物生长的载体，营养成分可严格控制。D、两步法液体深层培养：在酶制剂和氨基酸生产中应用较多。控制菌体在不同生长期的条件。（营养生长与代谢产物积累时条件不同）
5.★ 影响种子质量的主要因素：①培养基②种龄与接种量③温度④pH值⑤通气和搅拌⑥泡沫⑦染菌的控制⑧种子罐级数的确定
6. ★微生物发酵培养基的碳源、氮源主要包括哪些物质（7,3）
碳酸气
淀粉水解糖、糖蜜、亚硫酸盐纸浆废液等
碳源 石油、正构石蜡、天然气
醋酸、甲醇、乙醇等石油化工产品
有机氮：黄豆饼粉、花生饼粉、玉米浆、蛋白胨、
氮源 酵母粉、鱼粉、发酵菌丝体、酒糟水等
无机氮： 尿素、硫酸铵、氨水、硝酸盐
7.★ 什么是消毒和灭菌，掌握培养基连续灭菌的流程
消毒：指用物理和化学方法杀死物料、容器、器具内外的病源微生物。一般只能杀死营养细胞而不能杀死细菌芽孢。
灭菌：用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。
8、湿热灭菌的原理和优缺点.（5分）
原理：借助蒸汽释放的热使微生物细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的化学键，特别是氢键受到破坏，引起不可逆的变性，使微生物死亡。湿热灭菌的温度和时间与灭菌的对象有关。优点：（1）蒸汽来源容易，操作费用低廉，本身无毒；
（2) 蒸汽具有很强的穿透力，灭菌易于彻底身的压强，调节方便，技术管理容易。；（3）蒸汽均有很大的潜热，冷凝后的水分有利于湿热灭菌；（4）蒸汽输送可借助本：（1)
缺点 设备费用高 （2）不能用于怕受潮的物料灭菌
9、有一株枯草芽孢杆菌能产生淀粉酶，请设计一种优化培养基的方案，使该培养基适合该菌株能产酶能力（淀粉酶）。

10. 酵母菌酒精发酵的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型反应式，条件是什么
Ⅰ型发酵：以丙酮酸脱羧产生的乙醛作为H受体产生乙醇。

Ⅱ型发酵：采取某些手段阻止乙醛作为氢受体时，磷酸二羟丙酮则替代乙醛作为氢受体形成甘油，这样发酵转为甘油发酵

Ⅲ型发酵：酵母菌在碱性环境条件下（pH7.6），由于乙醛生成等量的乙酸和乙醇，因此乙醛作为氢受体的作用也被抑制；这时磷酸二羟丙酮成为氢受体。这样，发酵产生的总的产物为甘油、乙醇、乙酸

11. ★巴斯德效应及巴斯德效应的机制
巴斯德效应*：在好气条件下，酵母菌发酵能力降低（细胞内糖代谢降低，乙醇积累减少）；不仅存在于酵母中，也存在于具有呼吸和发酵能力的其他细胞中。
巴斯德效应的机制：在好气条件下，糖代谢进入TCA循环 柠檬酸↑
ATP↑ 抑制磷酸果糖激酶的合成 6-P-果糖↑（积累）
6-P-葡糖↑（积累） 反馈抑制己糖激酶 抑制葡糖进入细胞内

葡糖利用降低，同时，在好气条件，丙酮酸激酶活性降低，丙酮酸激酶活性降低也是由于磷酸果糖激酶活性降低所致 丙酮酸激酶活性↓

磷酸稀醇式丙酮酸↑ 反馈抑制己糖激酶活性 糖酵解速度↓
12、简述糖酵解的调节机制。、
调节点主要是三个激酶： 己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶 ，所催化的三个反应是不可逆的，只参与糖酵解，不参与糖的新生。
糖代谢的调节主要是 能荷 的调节，就是细胞内能量水平的控制。
[(ATP)+1/2(ADP)]/[(ATP)+(ADP)+(AMP)] 为一定的比例，该比例叫能荷。
（1）当体系中ATP 含量高时，ATP 抑制磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶的活性，使酵解减少；
（2）当需要能量时，ATP 分解为ADP 、AMP ，这样ATP 减少，ADP 增加、AMP 增加→ 能荷降低→ 激酶活性增大；（3） 无机磷 也是调节者，它能解除6- 磷酸葡萄糖对己糖激酶的抑制，加快糖酵解；（4）柠檬酸、脂肪酸和乙酰辅酶A 对糖酵解系统也有调控作用。
13.简述柠檬酸生物合成的代谢调节
答：柠檬酸生物合成的代谢调节包括糖酵解及丙酮酸代谢的调节、 TCA循环的调节。
糖酵解及丙酮酸代谢的调节：
1 、正常情况下，柠檬酸、 ATP 对磷酸果糖激酶有抑
制作用，而 AMP 、无机磷、铵离子对该酶则有激活作用，特别是还能解除柠檬酸、 ATP 对磷酸果糖激酶的抑制作用。
2 、铵离子浓度与柠檬酸生成速度有密切关系，正是由于细胞内浓度升高，使磷酸果糖激酶对细胞内积累的大量柠檬酸不敏感。
3.比较底物锰充足、锰缺乏时分批培养物的最大活力时发现，锰缺乏时黑曲霉的组成（合成）代谢受损伤，这与柠檬酸的积累有关。（锰缺乏时，细胞内 NH 4＋浓度高， Aa 浓度高（蛋白合成受阻，导致升高）。因此，锰离子效应是通过 NH 4＋升高而减少柠檬酸对磷酸果糖激酶的抑制来实现的。）
4、丙酮酸激酶是 EMP 途径的第2个调节点，在某些真菌得到证实，但黑曲霉未被证实。
TCA循环的调节：
1 、TCA 环的起始酶：柠檬酸合成酶是一种调节酶。但在黑曲霉中，柠檬酸合成酶没有调节作用，这是黑曲霉 TCA循环的第一个特点。
2. 第二个特点：黑曲霉菌体内α α- - 酮戊二酸脱氢酶缺失或活力很低（ TCA 环被阻断），它被葡萄糖和 NH 4 4 ＋抑止。（是 TCA循环中唯一不可逆的反应步骤）
3. 氧和 pH 值对柠檬酸发酵的影响很大。
14. 掌握天冬氨酸族氨基酸的代谢调控机制及高产某氨基酸生产菌的育种方法（比如高产高丝氨酸菌种的选育方法：出发菌株的选择 — 代谢调节比较简单的细菌（如黄色短杆菌、谷氨酸棒杆菌、乳糖发酵短杆菌等）
1、优先合成的转换：渗漏缺陷型的选育（如果降低高丝氨酸脱氢酶活性，则优先合成赖氨酸。）2、切断支路代谢：营养缺陷型的选育3、抗结构类似物突变株（代谢调节突变株）4、解除代谢互锁（ 在乳糖发酵短杆菌中，赖氨酸的生物合成与亮氨酸之间存在代谢互锁，赖氨酸生物合成分支的第一个酶（DDP合成酶）受亮氨酸的阻遏。）5.增加前体物的合成和阻塞副产物的生成6.改善细胞膜的透过性7.选育温度敏感突变株8.应用细胞工程和遗传工程育种9.防止高产菌株回复突变。
15、★ 根据气液传质理论，提高溶氧降低能耗的措施（根据传质理论，试述影响氧传递速率的因素）
1、搅拌：目的：增加溶氧、促进微生物悬浮混合（1）搅拌改善溶氧速率①打碎气泡，增加接触面积②液体做涡流运动，增加接触时间③发酵呈湍流，减少液膜阻力，KLa增加④打散菌体，使推动力均一；（2）搅拌器的形式、直径大小、转速、组数、搅拌器间距、在罐内的相对位置
2、增加空气线速度；3、空气分布管；4、增大氧分压；5、发酵罐内液体柱高度；6、增大发酵罐体积；7、发酵液的物理性质
16、.常用的空气除菌流程有哪几种，其适用的范围如何，每种过滤流程所用设备的作用是什么（试画出适合空气湿含量较大地区所需的一种空气预处理流程（用文字表示））流程：高空采风→无油润滑空气压缩→贮罐→冷却→一次过滤→二次过滤→进入发酵罐
范围：1）将空气冷却至露点以上的流程，适用范围：气候干燥地区；2）一次冷却一次析水的空气预处理流程，适用范围：空气湿含量较大地区；3）利用热空气加热冷空气的流程
17.发酵醪有何特征：1、含水量高，一般可达90％～99%。2、产品浓度低3、悬浮物颗粒小，密度与液体相差不大4、固体粒子可压缩性大5、液体黏度大，大多为非牛顿型流体6、产物性质不稳定
18.发酵醪预处理的方法有哪些：1.加热法2.调节悬浮液的ph 凝聚和絮凝3.添加助滤剂4.添加反应剂5.添加酶制剂
19.什么是双水相系统，影响双水相萃取的因素
将两种不同的水溶性聚合物（或盐溶液）的水溶液混合时，当聚合物浓度达到一定值，体系会自然的分成互不相溶的两相，这就是双水相体系.
影响双水相萃取的因素：1.聚合物及其分子量的影响2.pH 值的影响 3.离子环境对蛋白质在两相体系分配的影响4.温度的影响
20.什么是反胶束，影响反胶束萃取的因素
反胶束或称逆胶束(Reversed micelle) 是指当有机溶剂中加入表面活性剂并令其浓度超过某临界值时，表面活性剂便会在有机溶剂中形成一种稳定的大小为毫微米级的聚集体。
影响反胶束萃取的因素：（1）溶液的pH（2）溶液的离子强度（3）表面活性剂的浓度和种类（4）其他（有机溶剂、助表面活性剂、温度）
21、临界萃取的原理是什么
超临界萃取是利用SCF作为萃取剂，从液体和固体中萃取出特定成分，以达到某种分离的目的。
22、发酵与连续发酵的概念。
分批发酵：准封闭培养，指一次性投料、接种直到发酵结束，属典型的非稳态过程。
连续发酵：在发酵过程中，连续向发酵罐流加培养基，同时以相同流量从发酵罐中取出培养液 。
23、生长速率的定义和计算公式（2分）
微生物生长特性通常以单位细胞浓度或细胞数量在单位时间内的增加量来表示（比生长速率：μ、μn ）

X— 细胞浓度（g/L ）；N— 细胞个数； t— 生长时间；X 0 、X t — 初始微生物浓度和t 时细胞浓度；N0、Nt— 初始细胞个数和t 时细胞个数；μ— 以细胞浓度表示的比生长速率；μ n — 以细胞数量表示的比生长速率。
24、mood 方程及其意义

表征μ 与培养基中残留的生长限制性底物S t 的关系。

25、不同染菌时期对发酵有何影响及处理措施。
（1）种子培养期染菌 种子培养主要是生长繁殖菌体，菌体浓度低，培养基营养丰富，比较容易染菌。种子培养期染菌，带进发酵罐中危害极大，应严格控制种子污染。当发现种子受污染均应灭菌后弃去，并对种子罐、管道进行检查和彻底灭菌。
（2）发酵前期染菌 杂菌与生产菌争夺营养成分和氧气，严重干扰生产菌的生长和产物的形成。 如果前期染菌，且培养基养料消耗不多，可以重新灭菌，补加一些营养，重新接种再用。
（3）发酵中期染菌 严重干扰产生菌的代谢，影响产物的生成。中期染菌，由于营养成分大量消耗，一般挽救处理困难，危害性很大。所以应尽力做到早发现，快处理。处理方法应根据各种发酵的特点和具体情况来决定。例如抗生素生产中可以将高单位的发酵液输送一部分到染菌罐，抑制杂菌。
（3）发酵后期染菌 发酵后期发酵液内已积累大量的产物，特别是抗生素，对杂菌有一定的抑制或杀灭能力。因此如果染菌不多，对生产影响不大。如果染菌严重，又破坏性较大，可以提前放罐。 措施：染菌后的培养基必须灭菌后才可放下水道。
26. 发酵液泡沫产生的原因、危害及消泡的基本方法。
产生原因：一种是由外界引进的气流被机械地分散而成，一种是由发酵过程中产生的气体凝结生成，称为发酵泡沫，它只有在代谢旺盛时才比较明显。
危害：1.减少发酵的有效容积2.液体溢出，增加染菌机会3.降低菌体利用率4.影响通气搅拌
基本方法： 化学消泡：消泡剂表面张力低，使气泡膜局部的表面张力降低，使得平衡受到破坏。
机械消泡：靠机械强烈振动、压力的变化，促使气泡破裂，或借机械力将排出气体中的液体加以分离回收
27、pH对菌体生长和代谢的影响，举例说明
①pH值的改变，使微生物细胞原生质膜的电荷发生改变
②ph值直接影响酶的活性
③ph值影响培养基某些重要的营养物质和中间代谢产物的解离从而影响微生物对这些物质的利用。
28、影响离子交换速度的因素有哪些
因素：（1）树脂颗粒：越小，交换速度越快
（2）树脂的交联度：越低，扩散越容易，速度越快
（3）溶液中离子浓度：在一定范围内增加能加快交换速度
（4）温度：提高温度加快交换速度
（5）离子的大小：小离子的交换速度快
（6）离子价 ：离子价大的比离子价小的吸附速度慢
（7）树脂的强弱：强的比弱的快
（8）树脂层装填的松紧度：疏松利于扩散，提高交换速度
29、凝胶层析法在工业发酵中的应用。
凝胶层析法脱盐、凝胶层析法去除热源物质、凝胶浓缩高分子溶液、凝胶层析法应用于分析、凝胶层析法测定高分子物质的相对分子质量、凝胶层析法纯化青霉素。
30、结晶的形成过程及常用的结晶方法。
过程：形成过饱和溶液、晶核形成、晶体生长。
方法：①、将热饱和溶液冷却，添加晶种结晶②、将部分溶媒蒸发结晶③、添加有机溶剂结晶④、盐析结晶⑤等电点结晶
31、工业发酵中常用的干燥方法。
常用的干燥方法：气流干燥 沸腾干燥 喷雾干燥 冷冻升华干燥 真空干燥
32、两次冷却两次析水的空气的预处理的过程：粗过滤器→压缩机→冷却水→冷却器→分离器→冷却水→冷却器→分离器→加热器→空气过滤器
二、勾画
1. 上游：优良种株的选育和保藏（包括菌种筛选、改造，菌种代谢路径改造等）
中游：发酵过程控制，主要包括发酵条件的调控，无菌环境的控制，过程分析和控制等
下游：分离和纯化产品以及发酵副产品的综合利用。
2.列文虎克：发明显微镜，揭开了微生物世界的秘密。
巴斯德：发酵原理以及发酵是由微生物活动引起的。
傅莱明：发明青霉素。
3.短杆菌—味精、谷氨酸 酵母—甘油 黑曲霉—柠檬酸
4.(填空)菌种选育的基本方法：自然选育、抗噬菌体选育、诱变育种、代谢控制育种、基因定向育种的一系列方法。
5.（名）种子扩大培养： 是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，在经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级放大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。
6.发酵级数=种子罐数目+1
7.根据生产工艺的要求分为孢子培养基、种子培养基、发酵培养基。
8. DE值也称葡萄糖值，表示淀粉的水解程度或糖化程度。指的是葡萄糖（所测定的还原糖都当作葡萄糖计）占干物质的百分率。
9、糖蜜前的处理方法：冷酸通风处理法、热酸处理法、添加絮凝剂澄清处理法。
10.生物质主要成分：纤维素、半纤维素、木质素。
11、促进剂：在氨基酸、抗生素和酶制剂的发酵过程中，可在发酵培养基中加入某些对发酵起一定促进作用的物质。
抑制剂：
12、灭菌方法：干热灭菌法、湿热灭菌法、射线灭菌法、化学药品灭菌法。
13.什么是致死温度，致死时间，微生物的热死定律（会计算灭菌时间）
杀死微生物的极限温度就称为致死温度。在致死温度下，杀死全部微生物所需要的时间成为致死时间。微生物的热死是指微生物受热失活，但其细胞本身形状不变，在一定温度下，微生物热死遵循分子反应速度理论。活菌的死亡速率与瞬间残留的活菌数成正比。

式中，θ 灭菌时间（s）；N0 灭菌开始时，培养基中杂菌个数（个）；Nθ 经过灭菌时间θ后，残存的活菌数（个）。
14、① Y x/s、 Y x/o、 Y x/kcal ：消耗每克营养物、每克分子氧以及每千卡能量所生成的细胞克数；
② Y x/c、 Y x/ N、Yx/p、Y x/Ave -： 消耗每克C、 每克N、每克P 和每个有效电子所生成的细胞克数；
③ Y x/ATP ：消耗每克分子的三磷酸腺苷生成的细胞克数
消耗每克营养物（s） 或每克分子氧(O 2 ) 生成的产物(P)、ATP 或CO 2 的克数
15、在发酵过程中 ， 不连续地向发酵罐内加入培养基 ，但不取出发酵液的发酵方式。
补料分批发酵优点：①可以解除底物的抑制、产物反馈抑制和葡萄糖分解阻遏效应。②避免在分批发酵中因一次性投糖过多造成细胞大量生长，耗氧过多，以至通风搅拌设备不能匹配的状况。③ 菌体可被控制在一系列连续的过渡态阶段，可用来作为控制细胞质量的手段。④与连续发酵相比，补料分批发酵的优点在于：无菌要求低；菌种变异，退化少；适用范围更广。
16.两稳态方程：比生长速率等于稀释率：μ=D

17. 呼吸强度：指单位重量的干菌体每小时消耗的氧量，
临界溶氧浓度KLa: 菌体进行某种生理活动时，对发酵液中溶氧浓度的最低要求；不同菌种、同种菌在不同生理期具有不同的C临界值。
18.供氧阻力：液膜 耗氧阻力：细胞膜和菌丝体
19、★简述介质过滤除菌机理：1、惯性碰撞作用（介质过滤除尘的主要作用）；2、阻截作用；3、布朗扩散作用；4、重力沉降作用；5、静电吸附作用。穿透定律：穿透的菌数与原菌数之比的对数值与介质厚度成正比
20. 发酵热：伴随发酵的进行而产生的热量叫发酵热
生物热：微生物在生长繁殖过程中，本身产生的热
发酵热包括：生物热，搅拌热，蒸发热，辐射热
21发酵pH调控法①添加CaCO3②氨流加法③尿素流加法④选择合适的发酵培养基配方
22、发酵染菌率：一年内发酵染菌的批数与总投料发酵批数之比
23、发酵产物：菌体 酶 代谢产物
24、细胞破碎方法 机械法：珠磨法、高压匀浆法、超声波破碎法、X-press法等
化学和生物化学渗透 物理渗透法
25、常用的膜分离技术透析、超滤和微滤、反渗透、电渗透、渗透气化液膜分离技术
26、生化需氧量（BOD5）：是水体中有机物含量的一个间接指标。指实验条件下（温度20℃，密封体系），1升污水或待测水样中所含的一部分易氧化的有机物被微生物氧化、分解时，5昼夜所消耗的水中溶解氧毫克数。
化学需氧量（COD）：表示水体中有机物含量的一个简便的间接指标。指1升污水中所含有的有机物在用强氧化剂将它氧化后，所消耗氧的毫克数。
活活性污泥：指一种由活细菌、原生动物和其他微生物群聚集在一起组成的凝胶团，在污水处理中具有很强的吸附、分解有机物或毒物的能力。
一、填空题1.对发酵液pH值进行调节的主要方法是 、 、 。
2.微生物的呼吸强度与耗氧速率 r之间的关系是： 。
3.工业发酵产物分为 、 、 。
4.通风过程中，氧传递从供氧方面来看，其主要阻力来自于 。
5.大规模工业生产常用的培养方法可分为： 培养、 培养、
培养、 培养。
6.发酵工业产物的分离、纯化过程一般包括： 、
和 。
7.淀粉糖酸水解的分解反应是由葡萄糖分解为 、 以及
等非糖产物。
8.在糖酵解（EMP）途径中，对磷酸果糖激酶的酶活性起抑制作用的的物质主要有 、
等。
二、选择题 供选答案中只有一个最符合题干要求，选出将其番号填入“（）”中。（每小题3分，共15分）
9.属于发酵工艺过程控制的是（ ）
①培养基控制； ②搅拌器转速控制； ③发酵液体积控制； ④发酵液pH值控制
10.以下所列发酵产物提取精制方法中，不涉及膜分离技术的是（ ）
①电渗析； ②薄膜蒸发浓缩； ③超滤浓缩； ④反渗；
11.下列处理属机械消泡的是（ ）
①添加高碳醇； ②添加聚硅油； ③超声波共振； ④添加植物油；
12.下列因素中，不会明显影响凝胶层离法分离效果的因素是（ ）
①洗脱液离子强度； ②样品浓度；③洗脱液流速； ④洗脱操作温度；
13.影响离子交换树脂交换速度的因素是（ ）
①溶液的体积； ②树脂的使用量； ③操作温度； ④树脂的强弱；
一、填空题（每空1分，共20分）
1.氨水流加、添加碳酸钙、尿素流加法；2. ；3.酶、菌体、代谢产物；4.气膜；5.浅盘固体培养、深层固体培养、浅盘液体培养、深层液体培养等；6.预处理、提取、精制；7.5-羟甲基糠醛、乙酰丙酸、蚁酸；8.ATP、NADH（柠檬酸等）；
二、选择题：（每小题3分，共15分）
9. ④；10. ②；11. ③；12.②；13.③；
三、解释概念 （每小题3分，共15分）
14.培养基：用于菌体生长、发育等代谢活动的营养基质。
15.化学消泡：利用化学药剂（消泡剂）进行发酵泡沫的消除。
16.淀粉水解糖制备的酸酶法：淀粉水解过程中，同时使用酸降解和酶降解。
17.葡萄糖效应：培养基中存在的葡萄糖对菌体某些代谢活动具有抑制作用。
18.浓差极化：膜分离技术中，在膜表面由于物质被拦截，造成溶质在膜表面堆积，导致膜的分离能力下降。
四、简要回答题(每小题5分，共25分)
24.菌体方面：不同菌体温度要求不同；同种菌体在不同的菌龄、生长环境等时不同；菌体进行不同发酵时需求不同；
发酵方面：温度影响代谢产物的组成；温度影响产物的性质；
25. 被分离物质的性质；交换性能好；交换速度快；
26.提供营养物质，延长发酵时间；提供诱导酶合成的底物；
27.对发酵液进行预处理的目的？
有利于对发酵产物的提取操作的进行；
28.对发酵液进行通风搅拌的目的？
提供菌体所需要的氧气供应；搅拌可以混合发酵液，避免形成浓度梯度；
30.在对发酵产物进行提取精制过程中，怎样合理选择提取方法，确定提取工艺流程？
①提取分离对象的性质；
②产品质量要求；
③工厂设备条件、技术管理水平等；
一、填空题（每空1分，共20分）
1.发酵过程的产热途径主要有 、 。
2.发酵的泡沫来源主要是 、 。
3.工业发酵产物分为 、 、 。
4.发酵产物的分离纯化过程一般包括： 、 和 三步骤。
5.对发酵液的pH值进行调节的主要方法是 、 、 。
6.消泡的方法可以分为两大类： 消泡， 消泡。
7.糖蜜前处理方法主要有 法， 法， 法。
9.影响接种菌种迟滞期长短的因素是接种物的 、 。
三、选择题 供选答案中只有一个最符合题干要求，选出将其番号填入“（）”中。（每小题3分，共15分）
15.属于发酵工艺过程控制的是（ ）
①培养基控制； ②搅拌器转速控制； ③发酵液体积控制； ④发酵液pH值控制
16.对培养基进行灭菌时，其杀灭对象是以破坏微生物的（ ）为标准。
①营养体细胞； ②孢子； ③数量； ④代谢物；
17.抗生素属于微生物的（ ）
①营养物质； ②次级代谢产物； ③初级代谢产物； ④结构单元；
18.菌种保藏时，菌种的生理活性应该维持在（ ）水平最合适。
①最旺盛； ②旺盛； ③停止； ④休眠；
19.在培养基连续灭菌操作中，灭菌作用是靠灭菌操作的（ ）阶段完成的。
①预热阶段； ②升温阶段； ③保温阶段； ④冷却降温阶段；
《微生物工程工艺原理》试题（B）参考答案
一、填空题（每空1分，共20分）
1.发酵、搅拌。2.微生物活动、通气搅拌。3.菌体、酶、代谢产物。4.预处理、提取、精制。5.氨水流加、尿素流加、添加碳酸钙。6.物理（机械）、化学（消泡剂）。7.加酸通风沉淀法、加热加酸沉淀法、添加絮凝剂沉清处理法。9.菌龄、接种量。
三、选择题 供选答案中只有一个最符合题干要求，选出将其番号填入“（）”中。（每小题3分，共15分）
15. ④；16. ②；17. ②；18. ④；19.③；
25. 菌种保藏的目的和原理？
目的： ①存活，不丢失，不污染； ②防止优良性状丢失； ③随时为生产、科研提供优良菌种。
原理：根据菌种的生理生化特点，人工地创造条件，使菌种的代谢活动处于不活泼状态。
26. 发酵过程中主要的工艺控制条件有哪些？如何控制？
发酵过程中主要的工艺控制条件：①温度；②溶解氧；③pH；④CO2；⑤基质浓度；⑥泡沫；⑦发酵终点。
控制：根据菌株发酵活动特点（代谢、产物），使菌株处于最佳状态。