黄芪提取物对支气管哮喘小鼠气道阻力及肺功能的影响及其机制.pdf
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1、深圳中西医结合杂志 2023 年 7 月第 33 卷第 14 期 5 文章编号 1007-0893(2023)14-0005-04 DOI:10.16458/ki.1007-0893.2023.14.002黄芪提取物对支气管哮喘小鼠气道阻力 及肺功能的影响及其机制林浩龙凯琴(雅安职业技术学院,四川 雅安 625100)摘要目的:研究黄芪提取物对支气管哮喘小鼠气道阻力及肺功能的影响及其机制。方法:采用卵清蛋白法建立支气管哮喘 BALB/c 小鼠模型,分为低剂量黄芪提取物处理组(L-ASE 组,采用 5 mgmL-1黄芪提取物灌胃)、高剂量黄芪提取物处理组(H-ASE 组,采用 10 mgmL-1
2、黄芪提取物灌胃),选择建模成功支气管哮喘小鼠模型为模型组,选择正常小鼠为对照组。检查并比较四组小鼠 2 min 咳嗽次数、特殊气道阻力(sRaw)、气道阻力(RI)、潮气量(TV)、每分钟通气量(MV)、静态肺顺应性(Cst)、血清肿瘤坏死因子-(TNF-)、白细胞介素-1(IL-1)、IL-6 水平差异。结果:模型组小鼠 2 min 咳嗽次数、0 mgmL-1、5 mgmL-1、10 mgmL-1、15 mgmL-1浓度乙酰甲胆碱时 sRaw、RI、Cst、血清 TNF-、IL-1、IL-6 水平显著高于对照组,TV 和 MV 显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P 0.05)。L-ASE
3、组和 H-ASE 组小鼠 2 min 咳嗽次数、0 mgmL-1、5 mgmL-1、10 mgmL-1、15 mgmL-1浓度乙酰甲胆碱时 sRaw、RI、Cst、血清TNF-、IL-1、IL-6水平显著低于模型组,TV和MV显著高于模型组,差异均具有统计学意义(P0.05)。H-ASE组 2 min 小鼠咳嗽次数、0 mgmL-1、5 mgmL-1、10 mgmL-1、15 mgmL-1浓度乙酰甲胆碱时 sRaw、RI、Cst、血清TNF-、IL-1、IL-6 水平显著低于 L-ASE 组,TV 和 MV 显著高于 L-ASE 组,差异均具有统计学意义(P 0.05)。结论:黄芪提取物可显著
4、改善支气管小鼠气道阻力和肺功能,其机制可能与下调支气管哮喘小鼠炎症反应有关。关键词支气管哮喘;黄芪提取物;动物实验;小鼠中图分类号 R 562.2+5 文献标识码 AEffects of Astragalus Extract on Airway Resistance and Lung Function in Mice with Bronchial Asthma and its MechanismLIN Hao,LONG Kaiqin(Yaan Polytechnic College,Sichuan Yaan 625100)AbstractObjectiveTo study the effect
5、 and mechanism of astragalus extract on airway resistance and lung function in mice with 收稿日期2023-05-05基金项目雅安市科技计划项目(2018yyjskf19)作者简介林浩,男,副教授,主要研究方向是药理学与临床药物治疗学。(4):23-259 潘利妞,张伟宏,余珍,等郑州市社区老年人认知衰弱患病现状及影响因素J护理学杂志,2019,34(11):79-8210 韩君,王君俏,王悦,等75 岁及以上社区老年人身体衰弱与认知功能现状及相关性分析J复旦学报(医学版),2021,48(4):494-5
6、02,54411 李岚君,呼日勒特木尔老年衰弱综合征标志物研究进展世界最新医学信息文摘(连续型电子期刊),2020,20(85):99-10112 GUTIERREZ-ROBLEDO L M,VILA-FUNES J A,AMIEVA H,et alAssociation of low serum 25-hydroxyvitamin D levels with the frailty syndrome in Mexican community-dwelling elderlyJAging Male,2016,19(1):58-6313 戴靖榕,李婕,何旭,等评估老年衰弱相关血清生物学标志物的研
7、究进展J基础医学与临床,2022,42(4):646-65014 施红,孟丽,石婧,等老年人衰弱与血液生物指标的关系研究J中华老年医学杂志,2018,37(12):1383-138615 崔光辉,李少杰,尹永田,等济南市社区老年人中医体质类型与衰弱综合征的关联性分析J中医药导报,2021,27(1):178-181Shenzhen Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine July 2023 Vol.33.No.14 6 支气管哮喘与炎症反应、基因调控及神经调节有关,各种因素损伤支气管黏膜上皮导致气管炎症因子激
8、活及炎症细胞浸润,产生气道重塑而导致气道高反应性最终产生哮喘,调控炎症反应为支气管哮喘的主要治疗方法1。黄芪提取物包含皂苷、黄酮、多糖等多种活性成分,发现黄芪提取物具有调控炎症反应等功能,对支气管哮喘气道炎症反应具有改善功能,为支气管哮喘潜在的治疗药物2。本研究旨在探讨黄芪提取物对支气管哮喘小鼠气道阻力及肺功能的影响及其机制。1材料与方法1.1主要仪器与试剂黄芪提取物购自南京春秋生物公司(纯度99%以上)。卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)、氢氧化铝、乌拉坦购自北京天根公司,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白细胞介素 6(interleukin6,IL6
9、)、IL10检测试剂盒购自上海碧云天公司。eSpira FM System 动物肺功能检测仪购自上海玉研科学仪器公司。无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级别 BALB/c 小鼠 6 7 周龄,体质量(21.0 3.0 g购自四川普莱美行之公司许可证号 SYXK(川)2021203。黄芪提取物 采用0.9%氯化钠溶液配置成10 mgmL-1后行后续实验。1.2方法1.2.1支气管哮喘小鼠模型建立及分组根据杨丰鹤等3方法建立支气管哮喘小鼠模型。适用性饲养1周后 小鼠建立支气管哮喘模型,取 OVA 10 mg 溶于 0.9%氯化钠溶液 1 mL 中,加入等体积氢氧化
10、铝制成致敏液,取 OVA 10 mg 溶于 0.9%氯化钠溶液 10 mL 中制成质量浓度为 10 gL-1的激发液,于第 1 天和第 8 天小鼠腹腔注射致敏液 1 mL,第 15 天开始雾化吸入激发液,5 mLmin-1,30 min 次-1,1 次d-1,共 4 周,以 小鼠出现喘息、气促、口唇发绀和站立不稳等表现为建模成功。建模成功小鼠模型给予低剂量黄芪提取物处理组(LASE 组,采用 10 mgmL-1黄芪提取物灌胃)、高剂量黄芪提取物处理组(HASE 组,采用 5 mgmL-1黄芪提取物灌胃),另选择建模成功小鼠模型给予 0.9%氯化钠溶液处理(模型组)及正常小鼠为对照(对照组,仅行
11、 0.9%氯化钠溶液灌胃),四组小鼠每次 2 mL 灌胃,2 次d-1,连续处理 14 d。每组均设置 9 只小鼠进行实验。本研究动物实验遵守国际公认 3R 原则。1.2.2检测指标及方法LASE 组、HASE 组、模型组及对照组小鼠均检测以下指标,(1)咳嗽敏感性检测:采用辣椒素溶液对小鼠诱导咳嗽,观察 2 min内小鼠咳嗽次数;(2)特殊气道阻力检测:将小鼠置入双通道动物无创气道检测系统中测量特殊气道阻力(specific airway resistance,sRaw),采用 0 mgmL-1、5 mgmL-1、10 mgmL-1、15 mgmL-1浓度乙酰甲胆碱溶液处理,记录吸入不同浓度
12、乙酰甲胆碱溶液后 3 min内 sRaw;(3)肺功能:采用动物肺功能检测仪检测,包括气道阻力(airway resistance,RI)、潮气量(tidal volume,TV)、每分钟通气量(minute ventilation,MV)、静态肺顺应性(static lung compliance,Cst);(4)炎症 因子及 T 淋巴细胞检测:各组小鼠消毒后乌拉坦麻醉,取鼠尾静脉血2 mL检测血清炎症因子水平,包括TNF、IL1、IL6,检测方法为酶联免疫吸附法。bronchial asthma.MethodsA BALB/c mouse model of bronchial asthma
13、 was established by the ovalbumin method,and divided into a low-dose astragalus extract treatment group(L-ASE group,administered with 5 mgmL-1 astragalus extract)and a high-dose astragalus extract treatment group(H-ASE group,administered with 5 mgmL-1 astragalus extract).The successful bronchial ast
14、hma mouse model was selected as the model group,and normal mice were selected as the control group.The 2-min cough times,specific airway resistance(sRaw),airway resistance(RI),tidal volume(TV),minute ventilation(MV),static lung compliance(Cst),the levels of serum tumor necrosis factor-(TNF-),interle
15、ukin-1(IL-1),and IL-6 among the four groups of mice were checked and compared.ResultsThe cough times in 2 minutes,the levels of sRaw at concentrations of 0 mgmL-1,5 mgmL-1,10 mgmL-1,15 mgmL-1 of acetylcholine,RI,Cst,the levels of serum TNF-,IL-1,IL-6 in the model group were significantly higher than
16、 those in the control group,the levels of TV and MV were significantly lower than those in the control group,and the differences were statistically significant(P 0.05).The cough times in 2 minutes,the levels of sRaw at concentrations of 0 mgmL-1,5 mgmL-1,10 mgmL-1,15 mgmL-1 of acetylcholine,RI,Cst,t
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