SW∕T 3-2015 植物提取物 芦丁.pdf

国际商务标准国际商务标准 SW/T 32015 SW 中 国 医 药 保 健 品 进 出 口 商 会中 国 医 药 保 健 品 进 出 口 商 会 发布 2015-11-20 发布 2015-12-1 实施 植物提取物植物提取物 芦丁芦丁 Rutin SW/T 32015 1 前前 言言 本标准由中国医药保健品进出口商会提出。 本标准由中华人民共和国商务部归口。 本标准由中国医药保健品进出口商会国际商务标准化技术委员会负责解释。 本标准由四川广松制药有限公司负责起草。 本标准主要起草人： 刘波、丁蕾、王军 谢秩军 陆丽萍 SW/T 32015 2 国际商务标准 植物提取物 芦丁国际商务标准 植物提取物 芦丁 1 范围 1 范围 本标准规定了芦丁的技术要求、检验方法、检验规则和产品标签、包装、运输、贮存等要求。 本标准适用于以豆科植物槐 Sophora japonica L.的干燥花蕾为原料，经提取、分离、精制而成的以芦丁（Rutin）为主要有效成分的植物提取物。 2 规范性引用文件 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T44562008 包装用聚乙烯吹塑薄膜标准 GB/T 141872008 包装容器 纸桶 中华人民共和国药典（2010年版）一部 附录IX B 铅、镉、砷、汞、铜测定法 中华人民共和国药典（2010年版）二部 附录 H 重金属检查法 中华人民共和国药典（2010年版）二部 附录 M水分测定法 中华人民共和国药典（2010年版）二部 附录 J 微生物限度检查法 中华人民共和国药典（2010年版）二部 附录 F 滴定液 YBB00072005 低密度聚乙烯膜、袋标准 YY02361996 药品包装用复合膜（通则） WS1-49(B)-89 中华人民共和国卫生部药品标准，芦丁（P56） 欧洲药典EP8.0（01/2013:1795） ，芦丁（P3187） 3 化学名称、结构式、分子式和相对分子质量 3 化学名称、结构式、分子式和相对分子质量 3.1 化学名称 化学名称 芦丁，化学名称为 3-6-邻-（6-脱氧-左旋-甘露吡喃糖）-右旋-葡萄糖吡喃氧基-2（3，4-二羟基苯）-5，7 二羟基-4 氢-1-苯并吡喃-4-酮。 3.2 结构式 结构式 SW/T 32015 3 3.3 分子式 分子式 C27H30O163H2O 3.4 相对分子质量 相对分子质量 665 3.5 CAS 编号 CAS 编号 25024975-3 4 技术要求 4 技术要求 4.1 工艺要求 工艺要求 4.1.1 植物来源 以豆科植物槐 Sophora japonica L.的干燥花蕾为植物原料， 78 月花蕾形成时采收， 及时干燥， 除去枝、梗及杂质。 4.1.2 工艺过程 芦丁生产工艺采用碱提酸沉的方法从植物中提取，用甲醇精制，经分离、干燥、粉碎、混合、过 100目筛，即得。 4.2 产品要求 产品要求 4.2.1 感官要求感官要求：应符合表1的规定。 表1 表1 感官要求 项 目 要 求 检验方法 外观 黄色至黄绿色结晶性粉末 取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽和状态；并用鼻嗅其气味。 气味 无臭，无味 4.2.2 理化指标：理化指标：应符合表2的规定。 表2 理化指标 表2 理化指标 项 目 指 标 检验方法 鉴别 应呈正反应 附录 A 中 A.3.1 含量（以无水物计） ，% 95.0101.0 附录 A 中 A.3.2 杂质吸光度，A 0.1 附录 A 中 A.3.3 粒度（80 目筛通过率） ，% 100 附录 A 中 A.3.4 水分，% 7.59.5 附录 A 中 A.3.5 炽灼残渣，% 0.1 附录 A 中 A.3.6 相关物质 莰非醇-3-芸香糖苷，% 2.0 附录 A 中 A.3.7 异槲皮素，% 2.0 槲皮素，% 2.0 SW/T 32015 4 总杂质，% 4.0 甲醇不溶物，% 3.0 附录 A 中 A.3.8 甲醇残留，% 0.03 附录 A 中 A.3.9 重金属（以铅计） ，% 0.001 中化人民共和国药典 （2010 年版）二部 附录 H 重金属检查法 砷，mg/kg 1 中化人民共和国药典 （2010 年版）一部 附录 IX B 铅、镉、砷、汞、铜测定法 汞，mg/kg 1 镉，mg/kg 1 铅，mg/kg 1 4.2.3 微生物指标：微生物指标：应符合表3的规定 表3 微生物指标 表3 微生物指标 项 目 指 标 检验方法 细菌数，cfu/g 1000 中化人民共和国药典（2010年版）二部 附录 J 微生物限度检查法 霉菌、酵母菌数，cfu/g 100 大肠埃希菌 不得检出 沙门菌 不得检出 大肠菌群（N） ，个/g 10 5 5 检验方法 5.1 感官检验 5.1.1 外观和气味 按附录A中A.2.1规定的检测方法进行测定。开启样品包装，立即用鼻嗅其气味；另取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其外观色泽。 5.2 理化指标 理化指标 5.2.1 鉴别鉴别 按附录A中A.3.1规定的检测方法进行测定。 5.2.2 含量含量 按附录A中A.3.2规定的检测方法进行测定。 5.2.3 杂质吸光度杂质吸光度 按附录A中A.3.3规定的检测方法进行测定。 5.2.4 粒度粒度 按附录A中A.3.4规定的检测方法进行测定。 5.2.5 水分水分 按附录A中A.3.5规定的检测方法进行测定。 SW/T 32015 5 5.2.6 炽灼残渣炽灼残渣 按附录A中A.3.6规定的检测方法进行测定。 5.2.7 相关物质相关物质 按附录A中A.3.7规定的检测方法进行测定。 5.2.8 甲醇不溶物甲醇不溶物 按附录A中A.3.8规定的检测方法进行测定。 5.2.9 甲醇残留 甲醇残留 按附录A中A.3.9规定的检测方法进行测定。 5.2.10 重金属（以铅计)重金属（以铅计) 按中化人民共和国药典（2010年版）二部 附录 H 重金属检查法测定。 5.2.11 砷砷 按中化人民共和国药典2010年版一部附录IX B 铅、镉、砷、汞、铜测定法（氢化物法）检测砷。 5.2.12 汞汞 按中化人民共和国药典2010年版一部附录IX B 铅、镉、砷、汞、铜测定法（冷蒸汽法）检测汞。 5.2.13 镉镉 按中化人民共和国药典2010年版一部附录IX B 铅、镉、砷、汞、铜测定法（石墨炉法）检测镉。 5.2.14 铅铅 按中化人民共和国药典2010年版一部附录IX B 铅、镉、砷、汞、铜测定法（石墨炉法）检测铅。 5.3 微生物指标 微生物指标 按中化人民共和国药典（2010年版）二部 附录 J 微生物限度检查法检测细菌数、霉菌和酵母菌数、大肠埃希菌、沙门菌、大肠菌群数（N）。 6 包装、标签、运输、贮存6 包装、标签、运输、贮存 6.1 包装 包装 内包装材料应符合 YBB00072005， GB/T44562008， YY02361996 的规定要求， 使用前应经过理化、微生物检测合格。外包装桶应符合 GB/T 141872008 的规定要求，使用前应经过理化检验合格。桶装后，应加封封口签。 6.2 标签 标签 应注明产品名称、产品批号、产品规格、生产日期、有效期、生产厂家、生产地址、贮存条件、执行标准等。 6.3 运输 运输 运输时轻装轻卸，不得与有毒有害物品混装运载，严防雨淋暴晒。 6.4 贮存 贮存 SW/T 32015 6 遮光，密闭保存。产品应存放在干燥、通风、清洁的地方，堆码距墙壁和地面 20cm 以上、并有垫隔物。避免与有毒、有害、易腐、易污染等物品一起堆放。 6.5 复验周期（有效期） 复验周期（有效期） 在符合规定的贮运条件和包装完整、未经开启封口的情况下，保质期为36个月。 SW/T 32015 7 附录 A （规范性附录） 检验方法 A.1 一般规定A.1 一般规定 本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和中华人民共和国药典2010年版规定的纯化水，乙醇均指95%乙醇。试验中所用标准溶液、杂质标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按中华人民共和国药典2010年版的规定制备。实验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。 A.2 感官检验A.2 感官检验 A.2.1 外观和气味A.2.1 外观和气味 A.2.1.1 用具 载玻片、取样匙、白瓷盘等 A.2.1.2 操作方法 开启样品包装，立即用鼻嗅其气味，应无臭无味；另取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其外观色泽，应为黄色至黄绿色结晶性粉末。 A.3 理化指标A.3 理化指标 A.3.1 鉴别A.3.1 鉴别 第一类鉴别方法：B（红外鉴别） 第二类鉴别方法：A（紫外鉴别） ，C（薄层鉴别） ，D（显色反应鉴别） 附加鉴别方法：E（溶解性鉴别） 本标准规定按第一类鉴别方法：B 或者第二类鉴别方法：A,C,D 进行鉴别实验，呈正反应即可判定鉴别试验符合规定。另外，根据各药厂的情况，可自行增加附加鉴别方法：E，应呈正反应，此方法不作强制规定（附加鉴别的检验方法见附录 B） 。 A.3.1.1 仪器和用具 A.3.1.1.1 紫外-分光光度法仪 A.3.1.1.2 红外分光光度仪 A.3.1.1.3 微量注射器 A.3.1.1.4 硅胶 G 薄层板 A.3.1.1.5 分析天平，感量分别为 0.00001g、0.0001g、0.001g A.3.1.1.6 五号筛（80 目药筛，筛孔内径 180m7.6m） A.3.1.1.7 六号筛（100 目药筛，筛孔内径 150m6.6m） A.3.1.2 试剂和溶液 SW/T 32015 8 A.3.1.2.1 甲醇（AR） A.3.1.2.2 丁醇（AR） A.3.1.2.3 无水乙酸（AR） A.3.1.2.4 蒸馏水 A.3.1.2.5 丁酮（AR） A.3.1.2.6 乙酸乙酯（AR） A.3.1.2.7 铁氰化钾（AR） A.3.1.2.8 三氯化铁（AR） A.3.1.2.9 乙醇（AR） A.3.1.2.10 盐酸（AR） A.3.1.2.11 锌粉（AR） A.3.1.2.12 25%浓氨水（AR） A.3.1.2.13 10g/L 铁氰化钾溶液：取铁氰化钾 1g，加水使溶解成 100ml。 A.3.1.2.14 三氯化铁试液：取三氯化铁 9g，加水使溶解成 100ml。 A.3.1.2.15 10%氢氧化铵溶液：取 25%浓氨水 40ml，加水至 100ml，搅匀。 A.3.1.2.16 芦丁对照品：中国食品药品检定研究院（100081-201408） A.3.1.3 操作方法 A 紫外鉴别：取本品约 20.0mg，精密称定，置 100ml 量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度，摇匀，必要时滤过。精密量取 5.0ml，置 50ml 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。照中华人民共和国药典2010年版二部附录 A 紫外-可见分光光度法在 210nm 至 450nm 波长处测定吸光度，在 257nm2nm 与358nm2nm 波长处有最大吸收。 在 358nm 的波长处测定吸光度， 吸收系数为 305330， 以无水物质计算。 B 红外鉴别：照中华人民共和国药典2010年版二部附录 C红外分光光度法测定，本品的红外光吸收图谱与芦丁对照品（CRS）的图谱一致。 C 薄层色谱鉴别 （1） 溶液配制 供试品溶液：精密称取本品约 25mg，置 10ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。 对照品溶液（芦丁） ：精密称取芦丁对照品约 25mg，置 10ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。 （2） TLC 系统及配制 吸附剂：硅胶 G 展开剂：丁醇无水乙酸水丁酮乙酸乙酯（510103050） 分别量取丁醇、无水乙酸、水、丁酮、乙酸乙脂各 5ml、10 ml、10 ml、30 ml、50 ml 于试剂瓶，摇匀。 显色剂：10g/L 铁氰化钾溶液 7.5ml 和三氯化铁溶液 2.5ml 的混合液 点样量：对照品溶液 10l，供试品溶液 10l （3） 点样与展开 照中华人民共和国药典2010 年版二部附录 B 薄层色谱法，吸取对照品和供试品溶液各 10l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，放入加有展开剂的层析缸中展开，展开约 10cm，取出，空气中晾干。 （4） 显色与检视 SW/T 32015 9 将晾干的薄层板上喷以铁氰化钾溶液 7.5ml 和三氯化铁溶液 2.5ml 的混合液， 空气中干燥 10 分钟后检视，供试品溶液主斑点的位置、颜色、大小与对照品溶液应相似。 D 显色反应鉴别： 取本品 10mg， 置 150 15mm 的试管中， 加乙醇 5ml 溶解后， 加锌粉 1g， 盐酸 2ml，溶液应显红色。 A.3.2 含量A.3.2 含量 A.3.2.1 仪器和用具 A.3.2.1.1 自动电位滴定仪 A.3.2.1.2 分析天平，感量为0.0001g A.3.2.2 试剂和溶液 A.3.2.2.1 二甲基甲酰胺（AR） A.3.2.2.2 氢氧化四丁基胺滴定液（0.1 mol/L） A.3.2.2.3 氢氧化四丁基胺滴定液 （0.1 mol/L）的标定：照 中华人民共和国药典2010年版二部附录 F 滴定液标定。标定出的浓度为公式（A.1）中的C1。 A.3.2.3 操作方法 取本品约 0.2g，置于 50ml 烧杯中，精密称定，加 20ml N，N-二甲基甲酰胺使溶解，以 0.1 mol/L 氢氧化四丁基胺为滴定液，照中华人民共和国药典2010 年版二部附录 A 电位滴定法与永停滴定法中的电位滴定法测定。 A.3.2.4 计算 芦丁含量以质量分数W1计，数值以%表示，按公式（A.1）计算（1ml 0.1 mol/L氢氧化四丁基胺相当于30.53mg的C27H30O16） ： %100)1 (1 . 0)(2111011WmCTVVW (A.1) 式中： W1供试品中芦丁的质量分数，%； V1供试品消耗滴定液体积，单位为毫升（ml） ； V0空白试验消耗滴定液体积，单位为毫升（ml） ； T130.53 mg/ml，即 1ml 0.1 mol/L 氢氧化四丁基胺相当于 30.53mg 的 C27H30O16； C1滴定液的实际浓度，单位为摩尔每升（mol/L） ； 0.1滴定液的规定浓度，单位为摩尔每升（mol/L） ； m1供试品的称样量，单位为毫克（mg） ； W2供试品所含水分，%。 A.3.3 杂质吸光度A.3.3 杂质吸光度 A.3.3.1 仪器和用具 A.3.3.1.1 紫外-分光光度仪 SW/T 32015 10 A.3.3.1.2 分析天平，感量为0.001g A.3.3.2 试剂和溶液 A.3.3.2.1 异丙醇（AR） A.3.3.3 操作方法 取本品 0.200g，置 50ml 量瓶中，加异丙醇 40ml，振摇 15 分钟使溶解后，用异丙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，照中华人民共和国药典2010 年版二部附录 A 紫外-可见分光光度法测定，在 450nm 至800nm 波长之间的最大吸光度，应不得过0.10。 A.3.4 粒度A.3.4 粒度 A.3.4.1 器具 A.3.4.1.1 80 目药筛（五号筛，筛孔内径 180m7.6m，带筛盖与接收盒） A.3.4.1.2 天平，感量为0.1g A.3.4.2 检测方法 照中华人民共和国药典2010 年版二部附录 E 粒度测定法测定，称取本品 20g，置 80 目药筛，筛上加盖并在筛下配有密合的接收容器，按水平方向旋转振摇至少3分钟，并不时在垂直方向轻叩筛，测定通过药筛样品的重量或观察筛网面剩余量，应能 100%通过 80 目筛。 A.3.5 水分A.3.5 水分 A.3.5.1 仪器和用具 A.3.5.1.1 水分测定仪 A.3.5.1.2 分析天平，感量为0.0001g A.3.5.2 试剂和溶液 A.3.5.2.1 无水甲醇（AR） A.3.5.2.2 卡尔 费休试液（AR） A.3.5.2.3 卡尔 费休试液的标定：照中华人民共和国药典2010年版二部附录 M水分测定法（费休氏法容量法）的方法标定。标定出的浓度为公式（A.2）中的T2。 A.3.5.3 操作方法 取本品约 0.1g，置称样舟中，精密称定，照中华人民共和国药典2010 年版二部附录 M 水分测定法（费休氏法容量法）测定。 A.3.5.4 计算 芦丁水分以W2计，数值以%表示，按公式（A.2）计算： %100)(22322mTVVW (A.2) 式中： W2供试品中芦丁的水分，%； V2供试品消耗卡尔 费休试液体积，单位为毫升（ml） ； SW/T 32015 11 V3空白试验消耗卡尔 费休试液体积，单位为毫升（ml） ； T2每 1ml 费休氏试液相当于水的重量，mg，单位为 mg/ml； m2供试品的称样量，单位为毫克（mg） 。 A.3.6 炽灼残渣A.3.6 炽灼残渣 A.3.6.1 仪器和用具 A.3.6.1.1 高温炉 A.3.6.1.2 分析天平，感量为 0.0001g A.3.6.2 试剂和溶液 A.3.6.2.1 硫酸（AR） A.3.6.3 操作方法 取本品约 1.0g，置瓷坩埚中，精密称定，照中华人民共和国药典2010 年版二部附录 N 炽灼残渣检查法第二法测定，在 600炽灼至恒重。 A.3.6.4 计算 芦丁炽灼残值以W3计，数值以%表示，按公式（A.3）计算： %1005433mmmW (A.3) 式中： W3供试品中芦丁的炽灼残渣值，%； m3供试品炽灼残渣及坩埚恒重，单位为克（g） ； m4空坩埚恒重，单位为克（g） ； m5供试品的称样量，单位为克（g） 。 A.3.7 相关物质A.3.7 相关物质 A.3.7.1 仪器和用具 A.3.7.1.1 分析天平，感量为0.00001g A.3.7.1.2 色谱柱（辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂） A.3.7.1.3 高效液相色谱仪（UV检测器） A.3.7.2 试剂、溶液和对照品 A.3.7.2.1 甲醇（HPLC） A.3.7.2.2 磷酸二氢钠（AR） A.3.7.2.3 四氢呋喃（HPLC） A.3.7.2.4 磷酸（HPLC） A.3.7.2.5 重蒸馏水 A.3.7.2.6 芦丁化学对照品（NEGAMA公司（210） A.3.7.3 对照品溶液配制 A.3.7.3.1 对照品溶液（a） ：精密称定芦丁化学对照品约 10mg，置 10ml 量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度，摇匀。 SW/T 32015 12 A.3.7.3.2 对照品溶液（b） ：精密量取对照品溶液（a）1.0ml，置 50ml 量瓶中，用流动相 B 稀释至刻度，摇匀。相当于样品中芦丁含量 2%。 A.3.7.4 供试品溶液制备 取本品约0.10g，精密称定，加甲醇20ml使溶解，并用流动相B稀释至100ml，摇匀。 A.3.7.5 色谱条件 A.3.7.5.1 色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶（5m）为填充剂，长 0.25m，直径 4.6mm。 A.3.7.5.2 柱温：30。 A.3.7.5.3 流动相 A：将 5 倍体积的四氢呋喃（HPLC）与 95 倍体积的 15.6g/L 的磷酸二氢钠（AR）溶液混合，用磷酸（HPLC）调 pH 至 3.0。 A.3.7.5.4 流动相 B：将 40 倍体积的四氢呋喃（HPLC）与 60 倍体积的 15.6g/L 的磷酸二氢钠（AR）溶液混合，用磷酸（HPLC）调 pH 至 3.0。 A.3.7.5.5 流速：1.0ml/分钟。 A.3.7.5.6 检测波长：280nm。 A.3.7.5.7 进样量：20l。 A.3.7.5.8 柱温：30。 A.3.7.5.9 流动相 A 和流动相 B 按表 1 进行梯度运行： 表 1 流动相 A 和流动相 B 梯度运行 时间（分钟） 流动相 A（体积百分比） 流动相 B（体积百分比） 010 500 50100 1015 0 100 1516 050 10050 1620 50 50 A.3.7.6 检测方法 按以上色谱条件，按照试剂空白、对照品（b） 、供试品溶液的顺序依次进样，记录色谱图。 A.3.7.7 定量方法 参考芦丁对照品的色谱图确定相关物质的色谱出峰顺序和保留时间，相关物质与芦丁对照品相比的相对保留时间分别为：莰非醇-3-芸香糖苷约为 1.1，异槲皮素约为 1.2，槲皮素约为 2.5，参见附录 B。 A.3.7.8 计算 A.3.7.7.1 校正因子：在计算含量时，下列相关物质（杂质）的峰面积分别乘以相应的校正因子：异槲皮素校正因子 fA0.8，莰非醇-3-芸香糖苷校正因子 fB1.0，槲皮素校正因子 fC0.5。 A.3.7.7.2 莰非醇 3-芸香糖苷限量 （2.0%） 计算： 相应峰面积不超过对照品溶液（b） 谱图中芦丁的峰面积。 A.3.7.7.3 异槲皮素限量（2.0%）计算：相应峰面积不超过对照品溶液（b）谱图中芦丁的峰面积。 A.3.7.7.4 槲皮素限量（2.0%）计算：相应峰面积不超过对照品溶液（b）谱图中芦丁的峰面积。 A.3.7.7.5 杂质总量限量（4.0%）计算：供试品溶液色谱图中，除芦丁峰和溶剂峰之外的所有杂质峰面积SW/T 32015 13 之和不超过对照品溶液（b）谱图中芦丁峰面积的两倍。 A.3.7.7.6 忽略限（0.1%） ：供试品溶液色谱图中，杂质峰面积小于或等于对照品溶液（b）谱图中芦丁峰面积的 0.05 倍时，可忽略不计。 A.3.8 甲醇不溶物A.3.8 甲醇不溶物 A.3.8.1 仪器和用具 A.3.8.1.1 分析天平，感量为0.0001g A.3.8.2 试剂和溶液 A.3.8.2.1 甲醇（AR） A.3.8.3 操作方法 取本品约 2.5g，精密称定，置具塞瓶中，加甲醇 50ml，在 2025条件下振摇 15 分钟。用在 100105干燥 15 分钟的玻砂坩埚（G4）抽滤，用甲醇 20ml 分三次洗涤，将玻砂坩埚及不溶物在 100105干燥 30 分钟，放冷后称重。 A.3.8.4 计算： 芦丁甲醇不溶物以W4计，数值以%表示，按公式（A.4）计算： %1008764mmmW (A.4) 式中： W4供试品中的甲醇不溶物，%； m6甲醇不溶物及玻砂坩埚恒重，单位为克（g） ； m7空玻砂坩埚恒重，单位为克（g） ； m8供试品的称样量，单位为克（g） 。 A.3.9 甲醇残留A.3.9 甲醇残留 A.3.9.1 仪器和用具 A.3.9.1.1 气相色谱仪 A.3.9.1.2 顶空进样器 A.3.9.1.3 分析天平，感量为0.0001g、0.01g A.3.9.2 试剂和溶液 A.3.9.2.1 甲醇（色谱纯） A.3.9.2.2 N,N-二甲基甲酰胺（色谱纯） A.3.9.3 色谱条件 A.3.9.3.1 色谱柱：INNOWAX（30m0.53mm1m） A.3.9.3.2 检测器及温度：FID 250 A.3.9.3.3 进样口温度：140 A.3.9.3.4 载气及流量：N2 35cm/s（分流比 51） SW/T 32015 14 A.3.9.3.5 柱温：50保持 8.5min，然后以每分钟 7的升温速率升至 165 A.3.9.3.6 压力平衡控制值：15psi A.3.9.3.7 顶空平衡温度：80 A.3.9.3.8 顶空平衡时间：45min A.3.9.4 溶液配制 A.3.9.4.1 空白溶液：N，N-二甲基甲酰胺。 A.3.9.4.2 供试品溶液的制备：取本品约 5.0g，精密称定，置 25ml 量瓶中，加 N，N-二甲基甲酰胺适量使溶解并稀释至刻度。 A.3.9.4.3 对照储备溶液的制备（0.015%甲醇） ：称取甲醇（色谱纯）约 0.75g，精密称定，置 100ml 量瓶中，用 N，N-二甲基甲酰胺稀释至刻度，精密量取 10ml 于 50ml 量瓶中，用 N，N-二甲基甲酰胺稀释至刻度，再精密量取 5ml 于 50ml 量瓶中，用 N，N-二甲基甲酰胺稀释至刻度。 A.3.9.4.4 对照溶液的制备：精密量取对照储备溶液 1.0ml 和供试品溶液 5.0ml 于进样瓶中。 A.3.9.4.5 测试溶液的制备：精密量取空白溶液 1.0ml 和供试品溶液 5.0ml 于进样瓶中。 A.3.9.5 检测：分别测定对照溶液和测试溶液 A.3.9.6 计算： 芦丁甲醇残留量以W5计，数值以%表示，按公式（A.5）计算： (A.5) 式中： W5供试品中芦丁的甲醇残留量，%； C2对照溶液的甲醇浓度，%； A1对照溶液的甲醇峰面积； A2测试溶液的甲醇峰面积； m9供试品的称样量，单位为克（g） 。 %10051192125mAACWSW/T 32015 15 附录 B （资料性附录） B.1 芦丁及相关物质液相色谱图芦丁及相关物质液相色谱图 Rutin - 5.452Kaempferol-3-O-rutinoside - 6.179Isoquercitrin - 6.777Quercetin - 14.415AU0.000.200.400.600.801.001.201.40Minutes1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.0011.0012.0013.0014.0015.0016.0017.0018.0019.0020.00 图B.1 芦丁及相关物质液相色谱图 注：02.5min之间出现的峰为溶剂峰。 图中各成分及出峰顺序见表 B1。 表 B1 芦丁及其相关物质参考保留时间 序号 名称 保留时间（min） 相对保留时间 1 芦丁 5.432 1.0 2 莰非醇 3-芸香糖苷 6.179 1.1 3 异槲皮素 6.777 1.2 4 槲皮素 14.415 2.7 由于设备、色谱柱品牌、型号不同，相对保留时间与标准规定可能略有不同。 非商业性声明：上述所采用的设备、色谱柱、标准对照品等，涉及具体商业品牌、型号的，仅供参考，无商业目的，鼓励标准使用者尝试使用不同品牌、型号的设备、色谱柱及标准品。 B.2 鉴别（鉴别（E：溶解性鉴别） ：溶解性鉴别） B.2.1 仪器和用具 B.2.1.1 分析天平，感量分别为 0.001g、0.1g B.2.1.2 五号筛（80 目药筛，筛孔内径 180m7.6m） B.2.1.3 六号筛（100 目药筛，筛孔内径 150m6.6m） B.2.2 试剂和溶液 SW/T 32015 16 B.2.2.1 蒸馏水 B.2.2.2 甲醇（AR） B.2.2.3 乙醇（AR） B.2.2.4 25%浓氨水（AR） B.2.2.5 10%氢氧化铵溶液：取 25%浓氨水 40ml，加水至 100ml，搅匀，即得。 B.2.3 供试品要求 应为细粉，即能全部通过五号筛，并含能通过六号筛不少于 95%的粉末。 B.2.4 试验方法 B.2.4.1 水溶解性试验 取本品 10mg，置 250ml 的具塞三角瓶中，加水 100ml（110000） ，于 252的条件下，每隔 5分钟强力振摇 30 秒钟，30 分钟内，溶液应无色并有芦丁颗粒（本品不溶于水） 。 B.2.4.2 甲醇溶解性试验 取本品 1g，置 50ml 的纳氏比色管中，加甲醇约 30ml（11030ml） ，于 252的条件下，每隔5 分钟强力振摇 30 秒钟，30 分钟内，溶液应澄清（本品溶于甲醇） 。 B.2.4.3 乙醇溶解性试验 取本品 100mg，置 250ml 的具塞三角瓶中， 加乙醇约 100ml（11001000ml） ， 于 252条件下，强力，每隔 5 分钟强力振摇 30 秒钟，30 分钟，应溶解完全。如样品溶解缓慢，不易在 30 分钟内溶解，于4050水浴中溶解并振摇，30 分钟内，溶液应澄清，再放至 252，强力振摇 12 分钟，溶液应澄清（本品微溶于乙醇） B.2.4.4 氢氧化碱溶解性试验 取本品 1g，置 50ml 的纳氏比色管中，加 10%氢氧化铵溶液约 30ml（11030ml） ，于 252的条件下，每隔 5 分钟强力振摇 30 秒钟，30 分钟内，溶液应澄清（本品溶于氢氧化碱溶液） 。