电泳技术在临床上.ppt
《电泳技术在临床上.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《电泳技术在临床上.ppt(64页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、电泳技术在临床上的应用蒋刚健1使用范围和检测原理电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小,形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离,鉴定或提纯的技术.在生化检测中,主要用于分离各类蛋白分子.23按电泳技术分类 固体支持介质电泳移动界面电泳 滤纸电泳区带电泳 醋酸纤维素薄膜电泳稳态电泳 凝胶电泳琼脂糖聚丙烯酰胺4n移动界面电泳是将被分离的离子(如阴离子)混合物置于电泳槽的一端(如负极),在电泳开始前,样品与载体电解质有清晰的界面.电泳开始后,带电粒子向另一极(正极)移动,泳动速度最快的离子走在最前面,其他离子依电极速度快慢顺序排列
2、,形成不同的区带.只有第一个区带的界面是清晰的,达到完全分离,其中含有电泳速度最快的离子,其他大部分区带重叠5区带电泳是在一定的支持物上,于均一的载体电解质中,将样品加在中部位置,在电场作用下,样品中带正或负电荷的离子分别向负或正极以不同速度移动,分离成一个个彼此隔开的区带.区带电泳按支持物的物理性状不同,又可分为滤纸和其他纤维膜电泳、凝胶电泳等。6n稳态电泳:带电颗粒在直流电场作用下迁移一定时间后达到稳定状态,此后电泳条带的宽度不随时间的变化而变化。如:等速电泳,等电聚焦电泳7等电聚焦电泳是将两性电解质加入盛有pH梯度缓冲液的电泳槽中,当其处在低于其本身等电点的环境中则带正电荷,向负极移动;
3、若其处在高于其本身等电点的环境中,则带负电向正极移动.当泳动到其自身特有的等电点时,其净电荷为零,泳动速度下降到零,具有不同等电点的物质最后聚焦在各自等电点位置,形成一个个清晰的区带,分辨率极高.8琼脂糖凝胶电泳:琼脂糖凝胶适用于蛋白质和核酸的电泳支持介质,成本低,结果易保存.聚丙烯酰胺凝胶电泳:最常用的定性分析蛋白质的电泳方法,特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量,一般用于科研.毛细管电泳:经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物910新款Hydrasys 2 scan-琼脂糖全自动蛋白电泳仪1112电泳技术的医学应用n蛋白质电泳分析是实验室必备的检测手段,可全面精确,描绘出患者蛋白质的
4、全貌.对疾病的早期诊断,疗效观察及预后判断具有非常重要的临床价值.n根据使用的染料或者是底物的不同,我们可以检测到不同类型的蛋白:血清蛋白 脂蛋白(运送脂类)各种酶类血红蛋白正确解释电泳结果,为临床对疾病的判断提供可靠参考1314电泳技术在临床应用中的意义急,慢性炎症*造血系统疾病:多发性骨髓瘤,巨免疫球蛋白血症*肾脏疾病*肝脏疾病*中枢神经系统疾病:多发性硬化症遗传性疾病:地中海贫血*心血管疾病:心梗,动脉粥样硬化*恶性肿瘤15血清蛋白电泳常采用醋酸纤维素薄膜或琼脂糖凝胶,分离蛋白质区带后用氨基黑或丽春红S等染色后,扫描各区带进行吸光度检测。目前采用的自动电泳仪进行血清蛋白质分析,其电泳区带
5、整齐、分离效果好、操作速度快;电泳时间短,重复性好,值得推广应用。16血清蛋白电泳检测的目的是什么?检测异常:含量的变化:条带中蛋白含量的增加或减少性质的变化:异常条带的出现17临床意义将电泳作为常规检测之一,基于蛋白含量的 变化,有助于我们对以下疾病的筛查:炎症 营养不良肺气肿18对异常条带的筛查,有助于我们检测下列疾病:骨髓瘤 巨球蛋白血症(Waldenstrom)细菌和病毒感染在这些情况下,必须要做其他辅助测试,比如说免疫固定,使用不同类型的抗血清对异常蛋白进行检测.(对于后期治疗有很重要的指导意义)19p结合其他检测结果,可以确认炎症、肝炎、肝硬化、肾病等疾病p对出现临床症状的疑似骨髓
6、瘤患者进行电泳检测单克隆免疫球蛋白p可以检出早期无症状骨髓瘤患者p对骨髓瘤疾病进行随访,监测疗效血清蛋白电泳可以帮我们解决如下问题问题20n什么情况下必须进行电泳检测?q血液沉降速度发生异常变化q出现恶性疾病征兆q在免疫球蛋白定量检测中发现 某一种免疫球蛋白出现大量异常增加212223电泳区带分析24gba2白蛋白白蛋白a1:a1酸性糖蛋白,a1抗胰蛋白酶:结合珠蛋白,a2 巨球蛋白,a脂蛋白,铜蓝蛋白:转铁蛋白,血液结合素,C3补体,b脂蛋白:免疫球蛋白甲胎蛋白25正常血清蛋白电泳图谱 -2-2-2-2 巨球蛋白巨球蛋白巨球蛋白巨球蛋白白蛋白GammaBetaAlpha-2Alpha-1免疫
7、球蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白C3C3C3C3补体补体补体补体 -1-1-1-1抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶结合珠蛋白结合珠蛋白结合珠蛋白结合珠蛋白转铁蛋白转铁蛋白转铁蛋白转铁蛋白白蛋白白蛋白白蛋白白蛋白 -1-1-1-1 酸性糖蛋白酸性糖蛋白酸性糖蛋白酸性糖蛋白血红素结合蛋白血红素结合蛋白血红素结合蛋白血红素结合蛋白-+26白蛋白区带 双白蛋白,或者一条宽峰,或者在白蛋白条带出现附属条带可能是由以下原因造成:-遗传性双白蛋-暂时性的双白蛋白血症可能是由于药物刺激导致的-急性胰腺炎导致的双白蛋白血症:大量的胰酶的出现可以导致白蛋白降解2728A.注射白蛋白,大剂量青霉素后B。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 电泳 技术 临床
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【快乐****生活】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【快乐****生活】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。