《肿瘤病理学》讲义.ppt

肿瘤病理学肿瘤病理学概论概论第一部分：肿瘤病理学总论第一部分：肿瘤病理学总论一。肿瘤的定义、命名和分类一。肿瘤的定义、命名和分类二。肿瘤病理学的常用术语二。肿瘤病理学的常用术语三。肿瘤的组织发生及基本形态特征三。肿瘤的组织发生及基本形态特征四。肿瘤的良、恶性及对机体的影响四。肿瘤的良、恶性及对机体的影响五。肿瘤病理的诊断规范及注意事项五。肿瘤病理的诊断规范及注意事项六。影响肿瘤患者预后的形态学因素六。影响肿瘤患者预后的形态学因素七。现代技术在肿瘤病理诊断中的应用七。现代技术在肿瘤病理诊断中的应用一、肿瘤的定义、分类和命名一、肿瘤的定义、分类和命名（1）（一）（一）肿瘤的定义：肿瘤的定义：是机体局部组织的细胞在各种内在和外界的致是机体局部组织的细胞在各种内在和外界的致瘤因素长期作用下，逐渐发生的过度而不协调生长瘤因素长期作用下，逐渐发生的过度而不协调生长所形成的异常新生物（所形成的异常新生物（neoplasm）；）；它是由正常细它是由正常细胞获得了新的生物学遗传特性转化而来，并伴有分胞获得了新的生物学遗传特性转化而来，并伴有分化和调控的异常；其诱发的刺激因素消除后，仍继化和调控的异常；其诱发的刺激因素消除后，仍继续其与机体不相协调的过度生长。续其与机体不相协调的过度生长。*真性肿瘤（真性肿瘤（Tumor):一、肿瘤的定义、分类和命名一、肿瘤的定义、分类和命名（2）（二）肿瘤的分类依据：（二）肿瘤的分类依据：（1）生物学特性：）生物学特性：良性肿瘤良性肿瘤 交界性肿瘤交界性肿瘤 恶性肿瘤恶性肿瘤（2）组）组 织织 来来 源：源：癌癌 肉瘤肉瘤（3）功）功 能：能：按淋巴细胞亚群分类：按淋巴细胞亚群分类：B细胞性、细胞性、T细胞性（抑制细胞性（抑制/辅助）、内分泌性肿瘤辅助）、内分泌性肿瘤（4）分）分 化程化程 度：度：分化型、未分化型分化型、未分化型 一、肿瘤的定义、分类和命名一、肿瘤的定义、分类和命名（3）（三）肿瘤的命名（三）肿瘤的命名（1）：）：*良性肿瘤命名原则：良性肿瘤命名原则：XX 部位部位+XX 组织组织+瘤瘤 如：背部脂肪瘤，结肠腺瘤如：背部脂肪瘤，结肠腺瘤*恶性肿瘤恶性肿瘤(Cancer)命名原则：命名原则：癌（癌（Carcinoma):来源于来源于上皮组织的恶性肿瘤；上皮组织的恶性肿瘤；肉瘤肉瘤 (Sarcoma):来源于间叶组织的恶性肿瘤。来源于间叶组织的恶性肿瘤。*交界性肿瘤：交界性肿瘤：如：卵巢交界性乳头状粘液性囊腺瘤如：卵巢交界性乳头状粘液性囊腺瘤一、肿瘤的定义、分类和命名一、肿瘤的定义、分类和命名（4）（三）肿瘤的命名（三）肿瘤的命名（2）-特殊命名：特殊命名：*以人名命名：以人名命名：如：如：Hodgkin 病病;Kaposi 肉瘤肉瘤;Bowen 病病*以细胞形态命名：以细胞形态命名：如：燕麦细胞癌，印戒细胞癌如：燕麦细胞癌，印戒细胞癌 等等 *以解剖学名称命名：以解剖学名称命名：如：胸腺瘤、松果体瘤、颅咽管瘤如：胸腺瘤、松果体瘤、颅咽管瘤 *以分泌激素或功能命名：以分泌激素或功能命名：胰岛素瘤、胃泌素瘤、胰岛素瘤、胃泌素瘤、APUD瘤瘤*复合性命名：复合性命名：如：血管脂肪瘤、纤维腺瘤、骨软骨瘤如：血管脂肪瘤、纤维腺瘤、骨软骨瘤*以细胞嗜色特性命名：以细胞嗜色特性命名：嗜银细胞癌、嗜铬细胞癌嗜银细胞癌、嗜铬细胞癌 等等二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（1）*瘤样病变（瘤样病变（Tumor-like lesion):Tumor-like lesion):是一大组与肿瘤相似的增生性病变，其本质是一大组与肿瘤相似的增生性病变，其本质 不是真性肿瘤，而是一种组织的畸形。如血管瘤、不是真性肿瘤，而是一种组织的畸形。如血管瘤、错构瘤等。错构瘤等。*有些组织的瘤样病变可转变成真性肿瘤，如色素有些组织的瘤样病变可转变成真性肿瘤，如色素 性绒毛结节性滑膜炎可变为滑膜肉瘤，性绒毛结节性滑膜炎可变为滑膜肉瘤，应视为癌前病变处理。应视为癌前病变处理。二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（2）*错构瘤（错构瘤（Hamartoma):为先天发育障碍所致的局部组织生长过多，结构为先天发育障碍所致的局部组织生长过多，结构 错乱的一类瘤样病变。基本特征：错乱的一类瘤样病变。基本特征：1）介于畸形与真）介于畸形与真性肿瘤之间，不同程度兼有两者特征；性肿瘤之间，不同程度兼有两者特征；2）瘤中各种）瘤中各种组织虽增生过度，但细胞分化成熟，一般无异常分组织虽增生过度，但细胞分化成熟，一般无异常分化表现，只是结构紊乱；化表现，只是结构紊乱；3）生长缓慢，到一定程度）生长缓慢，到一定程度即停止生长，与机体生长相协调。即停止生长，与机体生长相协调。*先天性全身性纤维瘤病、脂肪瘤病、先天性全身性纤维瘤病、脂肪瘤病、血管瘤、淋巴管瘤、色素痣等。血管瘤、淋巴管瘤、色素痣等。二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（3）一般指组织细胞的增多，同时常伴有细胞的肥一般指组织细胞的增多，同时常伴有细胞的肥大，但无异形性。它是在某种刺激（如理化、生物大，但无异形性。它是在某种刺激（如理化、生物的）因子作用下，引起组织与细胞的生理性或病理的）因子作用下，引起组织与细胞的生理性或病理性变化。一旦刺激因子去除，可恢复到正常状态。性变化。一旦刺激因子去除，可恢复到正常状态。*被覆上皮：上皮组织增厚，细胞增多。被覆上皮：上皮组织增厚，细胞增多。*间叶组织：细胞增多，排列紧密等。间叶组织：细胞增多，排列紧密等。*增生增生(Hyperplasia):Hyperplasia):二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（4-1）*不典型增生不典型增生(Atypical hyperplasia;Dysplasia)：属于癌前病变。指上皮细胞的异型增生，即增属于癌前病变。指上皮细胞的异型增生，即增生的细胞大小、形态、排列等方面均有异于其正常生的细胞大小、形态、排列等方面均有异于其正常的成熟细胞，尤以细胞核的异形性最突出。其处于的成熟细胞，尤以细胞核的异形性最突出。其处于一种不稳定状态，在某种因素继续作用下可转变为一种不稳定状态，在某种因素继续作用下可转变为恶性肿瘤；如去除某些因素，恶性肿瘤；如去除某些因素，又可恢复至正常状态。又可恢复至正常状态。（一）概念：（一）概念：二、二、肿瘤病理学常用术语肿瘤病理学常用术语（4-2）*不典型增生（不典型增生（Atypical hyperplasia;Dysplasia):(二）分类：二）分类：1）炎性：一般不发生恶性转化，为）炎性：一般不发生恶性转化，为DNA二倍体；二倍体；2）瘤性：可发生恶变，是真正的癌前病变，多为）瘤性：可发生恶变，是真正的癌前病变，多为 DNA非整倍体。应密切随访观察。非整倍体。应密切随访观察。（三）分级：（三）分级：I 级：轻度，病变位于上皮全层的下级：轻度，病变位于上皮全层的下 1/3；II 级：中度。病变位于上皮全层的级：中度。病变位于上皮全层的 2/3；III 级：重度。异形上皮细胞几乎累及全层。级：重度。异形上皮细胞几乎累及全层。二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（5）*原位癌（原位癌（Carcinoma in situ):又称上皮内癌、浸润前癌、本位癌等。重度不又称上皮内癌、浸润前癌、本位癌等。重度不典型增生的上皮细胞已累及上皮全层，但未侵犯基典型增生的上皮细胞已累及上皮全层，但未侵犯基底膜。其是最早期的癌，是不可逆转的。底膜。其是最早期的癌，是不可逆转的。*癌细胞核形不规则，核膜增厚，染色质增粗，癌细胞核形不规则，核膜增厚，染色质增粗，核仁突出，核浆比例增大，有丝分裂增多。核仁突出，核浆比例增大，有丝分裂增多。*癌细胞癌细胞 DNA 分析主要为增殖倍体及较多分析主要为增殖倍体及较多 非整倍体。非整倍体。二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（6）*分化（分化（Differentiation):Differentiation):在肿瘤病理学中是指肿瘤细胞与其发生部位的在肿瘤病理学中是指肿瘤细胞与其发生部位的成熟细胞的相似程度。肿瘤细胞分化越好，与其相成熟细胞的相似程度。肿瘤细胞分化越好，与其相应的起源组织越近似；分化越差，成熟程度越低，应的起源组织越近似；分化越差，成熟程度越低，则偏离正常越远；反映在形态学上与相应的起源组则偏离正常越远；反映在形态学上与相应的起源组织差异越大，肿瘤的恶性程度越高。织差异越大，肿瘤的恶性程度越高。*分化与肿瘤的生长增殖潜能和分化与肿瘤的生长增殖潜能和 恶性程度成反比。恶性程度成反比。二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（7）*间变间变(Anaplasia):Anaplasia):在肿瘤病理学中指细胞缺乏分化，与其起源的在肿瘤病理学中指细胞缺乏分化，与其起源的正常细胞差异很大，表现为显著的异形性、幼稚性正常细胞差异很大，表现为显著的异形性、幼稚性和生长活跃性。间变为一种分化未成熟且同时伴有和生长活跃性。间变为一种分化未成熟且同时伴有异常分化，即间变的肿瘤细胞不仅原始幼稚分化低异常分化，即间变的肿瘤细胞不仅原始幼稚分化低，而且在分化过程中偏离常轨，而且在分化过程中偏离常轨，发生了质的变化。发生了质的变化。*隐匿癌：隐匿癌：指原发癌非常小，临床上未能发现，首先发现指原发癌非常小，临床上未能发现，首先发现的是转移性癌。的是转移性癌。*如：甲状腺隐匿性乳头状癌，直径如：甲状腺隐匿性乳头状癌，直径 1 CM，但但 40%病例术前已有颈部淋巴结转移。病例术前已有颈部淋巴结转移。二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（8 8）二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（9）*化生（化生（Metaplasia):通常指一种组织或细胞，在某些因素作用下，通常指一种组织或细胞，在某些因素作用下，由一种组织转变为另一种组织。一般认为，组织的由一种组织转变为另一种组织。一般认为，组织的化生通常为器官或组织的保护性反应。化生通常为器官或组织的保护性反应。*子宫颈管柱状上皮或腺上皮的鳞状上皮化生；子宫颈管柱状上皮或腺上皮的鳞状上皮化生；*支气管假复层纤毛柱状上皮的鳞状上皮化生。支气管假复层纤毛柱状上皮的鳞状上皮化生。*胃粘膜上皮的肠上皮化生；胃粘膜上皮的肠上皮化生；二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（10）*早期癌：早期癌：指原位癌伴有早期浸润（微灶浸润），可伴有指原位癌伴有早期浸润（微灶浸润），可伴有或不伴有淋巴结转移。或不伴有淋巴结转移。*早期胃癌（早期胃癌（EGC）：）：局限于粘膜层或粘膜下层的局限于粘膜层或粘膜下层的胃癌，伴或不伴有转移。胃癌，伴或不伴有转移。二、肿瘤病理学常用术语（二、肿瘤病理学常用术语（11）*微小癌微小癌(Micro-cancer)：指体积很小的癌。各种器官的微小癌的标准不一。指体积很小的癌。各种器官的微小癌的标准不一。*肝微小癌：单个癌结节或相邻两个癌结节的直径肝微小癌：单个癌结节或相邻两个癌结节的直径 之和之和&=3&=3cmcm，小小 肝肝 癌：直径癌：直径 5 5 cmcm 两者临床上多无症状，又称亚临床肝癌。两者临床上多无症状，又称亚临床肝癌。*胃微小癌：直径胃微小癌：直径 0.5 0.5 cmcm 小小 胃胃 癌：直径癌：直径 1.0 3 3 LNLN（+）：）：5 5年生存率年生存率 3535。8%8%六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（2）（2 2）脉管内瘤栓：）脉管内瘤栓：与患者预后有关与患者预后有关乳腺癌乳腺癌（826例）：淋巴管瘤栓（例）：淋巴管瘤栓（+）：）：5年：年：51%10年：年：30%淋巴管瘤栓（淋巴管瘤栓（-）：）：5年：年：64%10年：年：46.6%胃胃 癌癌（516例）：淋巴管瘤栓（例）：淋巴管瘤栓（+）：）：5年：年：10.3%（-）：）：5年：年：25.6%血管瘤栓（血管瘤栓（+）：）：5年生存率年生存率 10%（-）：）：5年生存率年生存率 20.4%六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（3）（3 3）肿瘤浸润范围肿瘤浸润范围：癌瘤浸润范围对患者预后癌瘤浸润范围对患者预后 是十分重要的。是十分重要的。食道癌食道癌（271例）：癌局限于食道内，例）：癌局限于食道内，5年生存率年生存率 40。4%癌穿透肌层，癌穿透肌层，5年生存率年生存率 24。4%胃胃 癌癌（514例）：癌累及浅肌层，例）：癌累及浅肌层，5年生存率年生存率 54。2%癌累及深肌层，癌累及深肌层，5年生存率年生存率 29。5%癌累及浆膜层，癌累及浆膜层，5年生存率年生存率 17。8%癌累及浆膜外，癌累及浆膜外，5年生存率年生存率 10。2%六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（4）（4 4）肿瘤的生长方式：肿瘤的生长方式：对患者预后有意义，对患者预后有意义，与肿瘤的浸润生长能力密切相关与肿瘤的浸润生长能力密切相关 团快状生长：团快状生长：预后好于巢状和弥漫性生长者；预后好于巢状和弥漫性生长者；巢巢 状状 生长：生长：预后介于团快状和弥漫性生长者之间；预后介于团快状和弥漫性生长者之间；弥漫性生长：弥漫性生长：预后最差预后最差六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（5）（5 5）肿瘤大小：）肿瘤大小：对预后有一定意义对预后有一定意义食管癌食管癌（524例）：例）：1-3 cm:5年生存率年生存率 27.4%3.1-5 cm:5年生存率年生存率 25.8%5.1 cm:5年生存率年生存率 24.6%胃胃 癌癌（967例）：例）：2 cm:各组间各组间5年生存率无差异年生存率无差异肺肺 癌癌（200例）：例）：5 cm:5年生存率年生存率 23.2%(p0.05)六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（6）（6）肿瘤的间质反应：）肿瘤的间质反应：反应成分：（反应成分：（1）瘤床的淋巴细胞（）瘤床的淋巴细胞（TIL）、）、浆细胞反应浆细胞反应 （2）瘤床的结缔组织反应（纤维包裹）瘤床的结缔组织反应（纤维包裹）意意 义：（义：（1）淋巴细胞反应程度与患者预后呈正相关）淋巴细胞反应程度与患者预后呈正相关 （2）肿瘤纤维包裹明显者预后好于无明显包）肿瘤纤维包裹明显者预后好于无明显包 裹者。裹者。六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（7）（7）引流区淋巴结内淋巴组织增生：）引流区淋巴结内淋巴组织增生：窦组织细胞增生（窦组织细胞增生（SHSH）：）：增生程度与预后有一定关系；增生程度与预后有一定关系；胃癌（胃癌（371371例例):5):5年：年：(-):1.7%(-):1.7%；(+)(+)：25.9%25.9%；(+)(+)：26.3%26.3%；滤泡中心细胞增生（滤泡中心细胞增生（FHFH）：）：增生程度与预后有一定关系；增生程度与预后有一定关系；胃癌（胃癌（371371例）：例）：5 5年：年：(-):10.5%;(+):21.6%;(+):37.5%(-):10.5%;(+):21.6%;(+):37.5%副皮质区增生（副皮质区增生（PHPH）：）：与预后关系不明确。与预后关系不明确。七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用 （一）（一）电镜技术电镜技术（Electronic microscopy)（二）二）免疫组织化学免疫组织化学(Immunohistochemistry)（三）三）肿瘤细胞动力学及肿瘤细胞动力学及DNA分析分析 (Cytokinesis and DNA)（四）四）肿瘤的自动化诊断肿瘤的自动化诊断(Autodiagnosis)（五）五）核仁组成区技术核仁组成区技术(nucleolar organizer regions)（六）六）原位杂交技术原位杂交技术(Insitu hybridization)七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（3）FCM提供的肿瘤细胞生物学信息：提供的肿瘤细胞生物学信息：1。显示。显示S期细胞在细胞周期中所占比值，直观反映瘤细期细胞在细胞周期中所占比值，直观反映瘤细 胞的增殖活性胞的增殖活性。（。（G0+G1期、期、S期、期、G2+M期）期）2。可将肿瘤按。可将肿瘤按DNA倍体类型分为倍体类型分为2倍体和异倍体肿瘤：倍体和异倍体肿瘤：2倍体（倍体（Diploid)肿瘤：肿瘤：所有良性病变均为所有良性病变均为2倍体倍体 异倍体（异倍体（Aneuploid)肿瘤：肿瘤：提示异常提示异常DNA干系存在。干系存在。大多数实体恶性肿瘤的大多数实体恶性肿瘤的DNA倍体为非整倍倍体为非整倍 体或多倍体。体或多倍体。*DNA倍体类型可反映肿瘤的恶性程度及生物学行为。倍体类型可反映肿瘤的恶性程度及生物学行为。七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1）（一）电镜技术：主要解决肿瘤的组织学类型及（一）电镜技术：主要解决肿瘤的组织学类型及 组织发生等问题。组织发生等问题。（1）癌与肉瘤的鉴别：）癌与肉瘤的鉴别：（2）鳞癌与腺癌的鉴别：）鳞癌与腺癌的鉴别：（3）小圆细胞肿瘤：）小圆细胞肿瘤：（4）黑色素瘤：）黑色素瘤：（5）神经内分泌肿瘤：）神经内分泌肿瘤：（6）软组织肿瘤：）软组织肿瘤：七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-1）（1）癌与肉瘤的鉴别：）癌与肉瘤的鉴别：癌癌 肉瘤肉瘤（1）常有基底膜）常有基底膜 有粘多糖物质称为外板有粘多糖物质称为外板（2）有连接复合体）有连接复合体 无连接复合体无连接复合体（3）鳞癌有典型桥粒）鳞癌有典型桥粒 绝不能有典型的桥粒绝不能有典型的桥粒 无张力微丝无张力微丝（一）电镜技术在肿瘤病理学诊断中的应用（一）电镜技术在肿瘤病理学诊断中的应用（1-1）七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-2）（一）电镜技术在肿瘤病理诊断中的应用（一）电镜技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-2）：）：（2）鳞癌与腺癌的鉴别：）鳞癌与腺癌的鉴别：鳞鳞 癌癌 腺腺 癌癌有角质小体有角质小体 可见细胞内腔（内囊）或外腔（外囊）可见细胞内腔（内囊）或外腔（外囊）张力纤维张力纤维 微绒毛较发达微绒毛较发达桥粒发育良好桥粒发育良好 有连接复合体（如紧密连接、中间连有连接复合体（如紧密连接、中间连 接接、桥粒）桥粒）胞浆内常有粘液分泌颗粒胞浆内常有粘液分泌颗粒七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-3）（一）电镜技术在肿瘤病理诊断中的应用（一）电镜技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-3）：）：（3）小圆细胞肿瘤的鉴别：）小圆细胞肿瘤的鉴别：恶性淋巴瘤：恶性淋巴瘤：神经母细胞瘤：神经母细胞瘤：细胞器少，细胞器少，无细胞间连接无细胞间连接尤文瘤：尤文瘤：未分化癌：未分化癌：细胞器丰富，有连接，特别是有桥粒细胞器丰富，有连接，特别是有桥粒 及张力纤维等及张力纤维等七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-4）（一）电镜技术在肿瘤病理诊断中的应用（一）电镜技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-4）：）：（4）黑色素瘤：）黑色素瘤：胞浆内可见黑色素小体或前黑色素小体。胞浆内可见黑色素小体或前黑色素小体。（5）神经内分泌肿瘤（）神经内分泌肿瘤（APUD瘤）：瘤）：胞浆内见丰富的轴状胞浆内见丰富的轴状 神经分泌颗粒（多为圆形，也可呈珠状、神经分泌颗粒（多为圆形，也可呈珠状、点状、哑铃状或卵原形，直径点状、哑铃状或卵原形，直径 120-180 nm;中心为中心为 致密的轴心，被膜所包裹）致密的轴心，被膜所包裹）（6）软组织肿瘤：）软组织肿瘤：横纹肌肉瘤可见横纹肌肉瘤可见Z线；线；平滑肌肉瘤可见肌原纤维和致密小体；平滑肌肉瘤可见肌原纤维和致密小体；七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-1）（二）免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用（二）免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用（2-1）：）：*应用范围：应用范围：肿瘤抗原的定性与定位（诊断和鉴别诊断）。肿瘤抗原的定性与定位（诊断和鉴别诊断）。（1）常见肿瘤抗原标志：）常见肿瘤抗原标志：上上 皮皮 性性 肿肿 瘤：瘤：角蛋白、上皮细胞膜抗原（角蛋白、上皮细胞膜抗原（EMA）恶恶 性性 淋淋 巴巴 瘤：瘤：白细胞共同抗原（白细胞共同抗原（LCA；CD系列）系列）T系统：系统：Leu1（T细胞共同抗原）细胞共同抗原）Th:Leu3(OKT4)；Ts:Leu2(OKT8)神经脊来源的肿瘤：神经脊来源的肿瘤：S-100（黑色素瘤、神经纤维瘤等）黑色素瘤、神经纤维瘤等）APUD瘤（类癌）：瘤（类癌）：S-100；NSE（神经特异性酰醇化酶）神经特异性酰醇化酶）七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-2）（二）免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用（二）免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用（2-2）（2）常用的免疫组化方法：）常用的免疫组化方法：PAP 法：法：辣根过氧化物酶辣根过氧化物酶-抗辣根过氧化物酶抗辣根过氧化物酶 (Peroxidase-antiperoxidase)ABC 法：法：生物素生物素-卵蛋白复合物卵蛋白复合物 (Avidin-biotin-peroxidase complex)S P 法：法：过氧化酶标记的链酶卵白素过氧化酶标记的链酶卵白素 (Streptavidin/Peroxidase)七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-3）（二）免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的应用（二）免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-3）：）：（3）ABC免疫组化染色的主要操作步骤：免疫组化染色的主要操作步骤：1）脱蜡切片水化）脱蜡切片水化 2）0.3%H2O2 甲醇封闭内源性过氧化物酶甲醇封闭内源性过氧化物酶 20-30 分钟；水洗；分钟；水洗；3）抗原修复（微波炉、高温高压、蛋白酶等），入）抗原修复（微波炉、高温高压、蛋白酶等），入PBS；4）正常血清作用）正常血清作用 10-15 分钟，弃掉血清；分钟，弃掉血清；5）特异性一抗孵育）特异性一抗孵育 60 分钟，分钟，PBS洗洗 3 次（次（3/次）；次）；6）生物素标记的二抗作用）生物素标记的二抗作用 30-60 分钟，分钟，PBS 洗洗 3次（次（3/次）次）7）生物素）生物素-卵白素复合物（卵白素复合物（ABC）作用）作用 30-60 分钟，分钟，PBS 洗；洗；8）DAB/AEC 呈色（流水冲洗）呈色（流水冲洗）9）苏木素）苏木素/甲基绿复染，脱水、透明、封片。甲基绿复染，脱水、透明、封片。七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-4）（二）免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的应用（二）免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-42-4）（4 4）免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的实际应用：）免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的实际应用：目的目的 主要应用于肿瘤的鉴别诊断（组织起源）、功能分类、主要应用于肿瘤的鉴别诊断（组织起源）、功能分类、病因、发病机理研究和指导临床治疗等。病因、发病机理研究和指导临床治疗等。1 1。肿瘤组织中相关抗原和癌基因编码产物的测定：肿瘤组织中相关抗原和癌基因编码产物的测定：CEACEA、AFPAFP、p21p212 2。肿瘤组织中受体的测定：肿瘤组织中受体的测定：ERER、PRPR、凝集素等；凝集素等；3 3。肿瘤细胞中病毒抗原的检测：乙肝病毒表面抗原、肿瘤细胞中病毒抗原的检测：乙肝病毒表面抗原、EBEB病毒等；病毒等；4 4。恶性淋巴瘤的分型和鉴别诊断：恶性淋巴瘤的分型和鉴别诊断：B B细胞、巨噬细胞、细胞、巨噬细胞、T T细胞亚类细胞亚类 5 5。内分泌肿瘤的功能分类（确定激素类型）：内分泌肿瘤的功能分类（确定激素类型）：HCGHCG、促生长激素、促生长激素、降钙素、降钙素、*嗜铬颗粒素嗜铬颗粒素(chromograinin A)chromograinin A)七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-5）（二）免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用（二）免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用（2-5）：）：（5）目前免疫组化工作中存在的问题：）目前免疫组化工作中存在的问题：1）抗体的特异性较差：如：）抗体的特异性较差：如：McAb-S100在部分腺癌和在部分腺癌和 鳞癌中也阳性；鳞癌中也阳性；2）技术操作不严格：）技术操作不严格：抗体浓度、孵育时间、显色时间、抗体浓度、孵育时间、显色时间、阳性阳性/阴性对照不当等；阴性对照不当等；3）缺乏免疫病理的基本知识：结果的判定、分级误差等。）缺乏免疫病理的基本知识：结果的判定、分级误差等。七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（3）（三）肿瘤的细胞动力学及（三）肿瘤的细胞动力学及DNA分析：分析：（1）自显影术）自显影术 (Autoradiography)：（2）流式细胞术流式细胞术*(Flow cytometry)：（3）显微分光光度计技术）显微分光光度计技术 (Microspectro-cytometry)：流式细胞技术（流式细胞技术（Flow Cytometry，FCM)通过激光照射，快速自动扫描荧光染色的细胞学标通过激光照射，快速自动扫描荧光染色的细胞学标本（通常检查本（通常检查2000个细胞），显示被测细胞的个细胞），显示被测细胞的DSNA分分布特点与细胞周期，借以揭示瘤细胞的细胞生物学特点，布特点与细胞周期，借以揭示瘤细胞的细胞生物学特点，对研究肿瘤的发生、肿瘤的诊断与预后的估计以及指导对研究肿瘤的发生、肿瘤的诊断与预后的估计以及指导制定合理的治疗方案，均具有较大的实用价值。制定合理的治疗方案，均具有较大的实用价值。优点：简便易行，操作简单，可快速出结果；优点：简便易行，操作简单，可快速出结果；缺点：不能分析每个细胞的形态学特点。缺点：不能分析每个细胞的形态学特点。七。现代技术在肿瘤病理学研究中的应用（七。现代技术在肿瘤病理学研究中的应用（3）七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（4）（四）肿瘤的自动化诊断（四）肿瘤的自动化诊断（Autodiagnosis):基本原理：基本原理：数学病理学或计量形态学。数学病理学或计量形态学。以图象分析手段，采用多因素的综合分析方法，如采以图象分析手段，采用多因素的综合分析方法，如采用计算机手段分析细胞的大小、形态直径、周径、染色质用计算机手段分析细胞的大小、形态直径、周径、染色质及核分裂以及瘤组织的排列、厚度及基底膜的长度、完整及核分裂以及瘤组织的排列、厚度及基底膜的长度、完整程度等，综合分析瘤组织的特点，借以阐明瘤组织的良恶程度等，综合分析瘤组织的特点，借以阐明瘤组织的良恶性及恶性程度。性及恶性程度。优点：较单纯形态分析更为客观全面。优点：较单纯形态分析更为客观全面。*仍不能完全代替光镜诊断，只能作为辅助诊断手段之一。仍不能完全代替光镜诊断，只能作为辅助诊断手段之一。七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（5-15-1）（五）核仁组成区技术（五）核仁组成区技术(NOR):(Nucleolar Organizer Regions)基本原理：基本原理：核仁组成区是细胞核中的核糖体核仁组成区是细胞核中的核糖体DNA（rDNA)的环，具有核糖体的环，具有核糖体RNA(rRNA)基因，基因，银染技术与银染技术与rRNA相关的酸性蛋白相结合，这些相关的酸性蛋白相结合，这些蛋白将使蛋白将使DNA维持在一种伸展的状态，或具有某维持在一种伸展的状态，或具有某些控制些控制rRNA基因转录的调节功能。基因转录的调节功能。七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（5-2）（五）核仁组成区技术（五）核仁组成区技术（NORs):应用范围及意义：应用范围及意义：NORs:其数目的增加，其数目的增加，可能与细胞的增殖、染色体的倍体可能与细胞的增殖、染色体的倍体 数、转录活力的增加有关。数、转录活力的增加有关。AgNORs（Ag-stained NORs):检测结果可用来作为判断细胞良恶性的标准之一。检测结果可用来作为判断细胞良恶性的标准之一。组织细胞坏死性淋巴结炎：组织细胞坏死性淋巴结炎：NORs:1.42+0.10 非何杰金淋巴瘤：非何杰金淋巴瘤：NORs:6.08+1.36 (p0.01)七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（6-1）（六）原位分子杂交（六）原位分子杂交（In situ hybridization)（1）:基本原理：基本原理：原位分子杂交技术就是在细胞水平上的原位分子杂交技术就是在细胞水平上的DNA-DNA或或DNA-RNA杂交。将组织细胞杂交。将组织细胞 DNA 在切片上在切片上或平皿中与探针或平皿中与探针DNA同时变性解旋变为单链同时变性解旋变为单链DNA，当温度当温度提高达复性温度（提高达复性温度（100 C）时，探针时，探针DNA与细胞内同源的与细胞内同源的DNA碱基配对形成新的双链碱基配对形成新的双链DNA，这样含有同位素或生物这样含有同位素或生物素标记的探针即可经过放射自显影或素标记的探针即可经过放射自显影或DAB底物显色便可显底物显色便可显示出杂交颗粒。示出杂交颗粒。七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（6-2）（二）原位分子杂交（二）原位分子杂交(In situ hybridization）（）（2）：）：应用应用：（1）在细胞水平检测多种结构蛋白、功能酶、激）在细胞水平检测多种结构蛋白、功能酶、激素、受体的编码基因，素、受体的编码基因，mRNA的分布部位、复制状态及基的分布部位、复制状态及基因编码产物水平之间的相互关系等；因编码产物水平之间的相互关系等；（2）在细胞水平了解癌基因的位置、表达水平，及其）在细胞水平了解癌基因的位置、表达水平，及其同癌细胞分化、转移之间的关系；同癌细胞分化、转移之间的关系；（3）在染色体水平可见出易位的染色体片段，也能检）在染色体水平可见出易位的染色体片段，也能检出单拷贝的癌基因或整和的病毒基因。出单拷贝的癌基因或整和的病毒基因。第二部分：专第二部分：专 题题1 1。恶性肿瘤侵袭转移机理。恶性肿瘤侵袭转移机理 的研究进展的研究进展 2 2。胃癌前病变的研究进展。胃癌前病变的研究进展3 3。肿瘤的早期诊断。肿瘤的早期诊断 肿瘤侵袭转移机理的研究进展肿瘤侵袭转移机理的研究进展主要内容：主要内容：（一）肿瘤的生长、发展与转归（一）肿瘤的生长、发展与转归（二）恶性肿瘤的生物学特征（二）恶性肿瘤的生物学特征（三）肿瘤细胞的侵袭（恶性浸润）（三）肿瘤细胞的侵袭（恶性浸润）（四）恶性肿瘤的转移（四）恶性肿瘤的转移肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）（一）肿瘤的生长、发展与转归：（一）肿瘤的生长、发展与转归：（1）肿瘤细胞群体的组成）肿瘤细胞群体的组成（2）人类肿瘤的增殖动力学特点）人类肿瘤的增殖动力学特点（3）原发性及转移性人类肿瘤的倍增时间）原发性及转移性人类肿瘤的倍增时间（4）肿瘤细胞的丢失（凋亡）肿瘤细胞的丢失（凋亡）（5）恶性肿瘤的演变与转归）恶性肿瘤的演变与转归肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）（一）肿瘤的生长、发展与转归（一）肿瘤的生长、发展与转归（1-1）：）：（1）肿瘤细胞群体的构成：）肿瘤细胞群体的构成：1）周期细胞（）周期细胞（G1 S G2 M）干细胞：干细胞：具无限增殖能力。具无限增殖能力。过度细胞：过度细胞：有限增殖有限增殖 2）G0期细胞期细胞（静止期细胞）（静止期细胞）3）终末分化细胞）终末分化细胞（不再进行分裂而注定要死亡的）（不再进行分裂而注定要死亡的）*细胞群体动力学细胞群体动力学：在空间上占有一定位置，在形态、在空间上占有一定位置，在形态、功能上类似的细胞群体的由增生、分化、停滞和死亡（丢功能上类似的细胞群体的由增生、分化、停滞和死亡（丢失）的不断运动、变化的过程。失）的不断运动、变化的过程。肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）（一）肿瘤的生长、发展与转归（一）肿瘤的生长、发展与转归（1-21-2）（2 2）人类肿瘤的增殖动力学特点）人类肿瘤的增殖动力学特点：肿瘤干细胞肿瘤干细胞 1 肿瘤细胞起源于不同分化阶段的正常细胞的干细胞：肿瘤细胞起源于不同分化阶段的正常细胞的干细胞：低分化干细胞低分化干细胞-低分化肿瘤；高分化干细胞低分化肿瘤；高分化干细胞-高分化肿瘤。高分化肿瘤。2 肿瘤干细胞的特征是多能性和具有自我维持的能力：肿瘤干细胞的特征是多能性和具有自我维持的能力：干细胞的增殖、分化结果是产生不同分化程度的功能性细胞。干细胞的增殖、分化结果是产生不同分化程度的功能性细胞。肿瘤细胞群体中这种分化序列是细胞更新换代持续生长的保证。肿瘤细胞群体中这种分化序列是细胞更新换代持续生长的保证。3 肿瘤干细胞在肿瘤的增殖生长过程中处于核心位置：肿瘤干细胞在肿瘤的增殖生长过程中处于核心位置：干细胞干细胞-终末细胞是一个等级分化过程，各部分细胞量在逐渐终末细胞是一个等级分化过程，各部分细胞量在逐渐 增加的同时，细胞分化程度增高，增殖能力逐步丧失。增加的同时，细胞分化程度增高，增殖能力逐步丧失。肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）（一）肿瘤的生长、发展与转归（一）肿瘤的生长、发展与转归（1-21-2）（2）人类肿瘤的增殖动力学特点）人类肿瘤的增殖动力学特点：肿瘤干细胞肿瘤干细胞44肿瘤干细胞的异质性：肿瘤干细胞的异质性：同一肿瘤随时间迁延，所含干细胞同一肿瘤随时间迁延，所含干细胞 克隆亚群也逐渐增多。共同存在的多个干细胞之间，不同转移克隆亚群也逐渐增多。共同存在的多个干细胞之间，不同转移 灶之间以及同一瘤块上不同部位之间细胞克隆性生长情况不同，灶之间以及同一瘤块上不同部位之间细胞克隆性生长情况不同，对抗癌药物的反应也不同，这种亚群之间生物学性质上的差异对抗癌药物的反应也不同，这种亚群之间生物学性质上的差异 并不独立，克隆间具有相互调节作用。并不独立，克隆间具有相互调节作用。55肿瘤干细胞在肿瘤的生长、转移和复发中起重要作用肿瘤干细胞在肿瘤的生长、转移和复发中起重要作用。66原癌基因原癌基因c-mycc-myc、c-mybc-myb、bcl-1bcl-1等等与肿瘤干细胞的发生、与肿瘤干细胞的发生、发展有密切关系。发展有密切关系。DNADNA去甲基化作用与干细胞自我更新去甲基化作用与干细胞自我更新 密切相关。密切相关。肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）（一）肿瘤的生长、发展与转归（一）肿瘤的生长、发展与转归（3 3）（3）原发性和转移性人类肿瘤的倍增时（举例）：）原发性和转移性人类肿瘤的倍增时（举例）：肿瘤类型肿瘤类型 原发瘤倍增时原发瘤倍增时 肺转移瘤倍增时肺转移瘤倍增时结直肠癌结直肠癌 632（天）（天）95（天）（天）乳腺癌乳腺癌 96（天）（天）73（天）（天）骨肉瘤骨肉瘤 63（天）（天）30（天）（天）*人类肿瘤的倍增时在不同病人（即使同一组织类型）的人类肿瘤的倍增时在不同病人（即使同一组织类型）的肿瘤之间变化很大；转移瘤的倍增时较其原发瘤明显缩短肿瘤之间变化很大；转移瘤的倍增时较其原发瘤明显缩短（转移瘤生长速度增快）。（转移瘤生长速度增快）。肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）肿瘤侵袭转移机理的研究进展（一）（4）肿瘤细胞的丢失：）肿瘤细胞的丢失：（一）肿瘤的生长、发展与转归（一）肿瘤的生长、发展与转归（4-1）：）：在细胞增殖的三个参数中，细胞丢失是最难以估计的。在细胞增殖的三个参数中，细胞丢失是最难以估计的。以往认为：以往认为：增殖失控是引起恶性肿瘤生长的唯一原因。增殖失控是引起恶性肿瘤生长的唯一原因。新近研究表明：新近研究表明：细胞也有控制其何时死亡的内