抗核抗体基本概念及对应临床疾病概述.ppt
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1、抗核抗体基本概念及抗核抗体基本概念及临床床检测1.传统定定义 针对细胞核成分的自身抗体的胞核成分的自身抗体的总称。称。广广义定定义 针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。称。对ANA的理的理解不再局限于核成分,而是指核酸和核蛋白抗体的解不再局限于核成分,而是指核酸和核蛋白抗体的总称称 靶靶抗抗原原存存在在于于包包括括细胞胞核核、细胞胞浆、细胞胞骨骨架架、细胞胞分分裂裂结构等部位构等部位抗核抗体的定抗核抗体的定义2.ANA可可见于多种疾病,特于多种疾病,特别是是结缔组织疾病,常作疾病,常作为结缔组织病的病的诊断、病情判断和断、病情判断和疗效效观察的指察的指标在非在非
2、结缔组织病中也可出病中也可出现阳性。阳性。正常人中(特正常人中(特别是老年人)也可出是老年人)也可出现阳性,但滴度低,并且阳性,但滴度低,并且常表常表现为IgM型型高滴度高滴度ANA则高度提示自身免疫性疾病高度提示自身免疫性疾病 目前,目前,ANA检测已成已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。ANA检测的的临床意床意义3.系系统性性红斑狼斑狼疮活活动期期非活非活动期期药物物诱导的的红斑狼斑狼疮混合性混合性结缔组织病(病(MCTD、Sharp综合征)合征)类风湿性关湿性关节炎炎进行性系行性系统性硬化症性硬化症多多发性肌炎及皮肌炎性肌炎及皮肌炎干燥干燥综合征
3、合征慢性活慢性活动性肝炎性肝炎溃疡性性结肠炎炎其它其它风湿病湿病正常人正常人 9510080100100100204020508595305070803040265-10ANA检测的临床意义4.ANA实验室室检测策略推荐策略推荐5.ANA间接免疫接免疫荧光法光法筛查实验6.间接免疫接免疫荧光法光法检测ANA基本原理基本原理间接免疫接免疫荧光法光法 包被包被HEp-2细胞的基胞的基质玻片玻片样本中本中ANA-IgGFITC标记的抗人的抗人IgG抗体抗体7.l抗原抗原谱完整完整(细胞核、胞核、细胞胞浆中近百种自身抗原中近百种自身抗原)l人源人源细胞,无种属非特异胞,无种属非特异荧光干光干扰l肿瘤瘤
4、细胞,易于培养及商品化生胞,易于培养及商品化生产l核核质比大,可比大,可观察到多种不同察到多种不同荧光核型光核型ANA筛查的的经典和典和标准基准基质:HEp-28.均质型核点型着丝点型核仁型Scl-70粗颗粒型细颗粒型核膜型.核糖体P蛋白线粒体型高尔基体溶酶体肌动蛋白波形蛋白基于基于Hep-2细胞胞为基基质的的ANA初初筛实验9.ANA间接免疫接免疫荧光法光法筛查试验的的实际价价值l初步甄初步甄别自身免疫性疾病患者(阴阳性自身免疫性疾病患者(阴阳性结果)果)l尽可能判断尽可能判断荧光核型(光核型(缩小靶抗原确小靶抗原确认实验范范围)l获取抗体滴度信息(判断病情取抗体滴度信息(判断病情进展、展、
5、预后等)后等)考考虑到到荧光法光法筛查试验存在主存在主观性性强的特点,因此的特点,因此应以一种客以一种客观和和现实的的态度去面度去面对筛查试验结果果10.几个相几个相对常常见且重要的且重要的荧光核型光核型均质型核点型着丝点型核仁型粗颗粒型核膜型.核糖体P蛋白线粒体型肌动蛋白常见且重要核型的标准l核型表现相对典型l阳性率相对较高l靶抗原相对明确11.应重重视ANA滴度的滴度的检测抗体滴度的临床意义1、明确界定自身免疫性疾病患者;2、作为疾病进程、临床疗效和病情预后及转归等的判断指标当前国际主流ANA间接免疫荧光法检测系统广泛采用的起始稀释度为1:40。即该检测系统的正常参考范围为1:40。梯度稀
6、释时的稀释因子为1:2。HOB公司产品推荐按照1:80开展稀释。12.荧光光强弱及血清稀弱及血清稀释度度荧光光强弱判弱判读 观察标本的特异性荧光强度一般用“+”号表示。“”为无或仅见极微弱荧光;“+”为荧光较弱但清楚可见;“+”为荧光明亮;“+”为耀眼的强荧光。临床上根据特异性床上根据特异性荧光光强度达度达“+”以上判定以上判定为阳性阳性抗体梯度稀抗体梯度稀释起始稀起始稀释:1:801:80梯度稀梯度稀释(稀(稀释因子因子2 2)1:1601:1601:3201:3201:6401:6401:12801:12801:25601:2560直至抗体直至抗体转阴阴13.各稀各稀释度的反度的反应性性抗
7、体滴度抗体滴度临床意床意义1:801:640阳性阳性+1:80阳性,需阳性,需结合合临床表床表现综合判断合判断阳性阳性+1:160阳性,提示可能存在相关疾病阳性,提示可能存在相关疾病阳性阳性+弱弱+1:320明确阳性,提示可能存在相关疾病明确阳性,提示可能存在相关疾病阳性阳性+阳性阳性+1:640中等阳性,提示可能存在相关疾病中等阳性,提示可能存在相关疾病阳性阳性+阳性阳性+1:1280强阳性,高度提示存在相关疾病阳性,高度提示存在相关疾病阳性阳性+阳性阳性+1:2560极极强的阳性,高度提示存在相关疾病。的阳性,高度提示存在相关疾病。ANA荧光滴度判光滴度判读举例例14.HOB公司公司间接免
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