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生物化学练习题

一、填空题
1. 酶促动力学的双倒数作图法，得到的直线在横轴上的截距为（ ），纵轴上的截距为（ ）。
2. 判断一个纯化酶的方法优劣主要依据是酶的（ ）和（ ）

二、判断题
1、 Km是酶的特征常数，在任何条件下，Km是常数。
2、 一种酶有几种底物就有几种Km.
3、 增加不可逆抑制剂的浓度，可以实现酶活性的完全抑制。
4、 正协同效应使酶促反应速度增加，使酶与底物亲和力增加，使酶促反应速度对底物浓度变化越来越敏感。
5、 竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。
6、 竞争性可逆抑制剂抑制程度与作用时间有关。

三、选择题
1、哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度？（ ）
（A）不可逆抑制作用 （B）竞争性可逆抑制作用
（C）非竞争性可逆抑制作用 （D）反竞争性可逆抑制作用
（E）无法确定
2、酶竞争性可逆抑制剂可以使（ ）
（A）Vmax 减小，Km减小； （B）Vmax增加，Km增大
（C）Vmax不变，Km增加； （D）Vmax 不变，Km减小
（E）Vmax 减小，Km增加；
3、下列常见抑制剂中，除哪个外都是不可逆抑制剂？（ ）
（A）有机磷化合物 （B）有机汞化合物
（C）有机砷化物 （D）氰化物
（E）磺胺类药物
4、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体？ （ ）
（A）His的咪唑基 （B）Lys的ε氨基
（C）Arg胍基 （D）Cys的巯基
（E）Trp的吲哚基

四、简答题
1、羧肽酶是由307个氨基酸残基构成的单链蛋白质，该酶活性部位的Arg145和Glu270是它的两个必需的残基。请分析下列问题。
（1）在该酶活性部位实际的催化反应中，这两个氨基酸残基间的空间距离很短，只有十几个纳米。请你解释其中 的原因。
（2）为确定该酶对底物的Km和Vmax，获得下面一组数据。请你计算出该酶的Km和Vmax。

2、分离到一个蝙蝠唾液来源的ATP酶，当酶浓度10-8mmol/L时，ATP的水解速率如下：
[ATP](μmol/L) ：5.0 1.7 1.0 0.7 0.56
V (μmol/L/min) ：2.6 1.95 1.7 1.4 1.24
确定酶的Km, Vmax, Kcat。

3.焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸，其相对分子质量为120×103，由6个相同亚基组成。纯酶的Vmax 为2800 U/mg酶。它的一个活力单位规定为：在标准测定条件下，37℃，15min内水解10μmol焦磷酸所需要的酶量。问：
（1）每mg酶在每秒钟内水解多少mol底物？
（2）每mg酶中有多少mol的活性部位（假设每个亚基上有一个活性部位）？
（3）酶的转换数是多少？

4. 称取25mg蛋白酶粉配制成25ml酶溶液，从中取出0.1ml酶液，以酪蛋白为底物，用Folin-酚比色法测定酶活力，得知每小时产生1500μg酪氨酸。另取2 ml酶液，用凯氏定氮法测定蛋白氮为0.2mg, 若以每分钟产生1μg 酪氨酸的酶量为1个活力单位计算，根据以上数据，求出：
（1）1ml酶液中所含蛋白质量及活力单位；
（2）比活力；
（3）1g酶制剂的总蛋白含量及总活力。

5. 某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据： 试计算比活力、百分产量和纯化倍数。

体积/mL
活力单位/（U/mL）
单位/（mg/mL）
初提取液
120
200
10
（NH4）2SO4
5
810
4