酶工程考试复习题及答案.doc
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1、酶工程考试复习题及答案一、名词解释题1. 酶活力: 是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可用在一定条件下,酶催化某一化学反应的速度来表示,酶催化反应速度愈大,酶活力愈高,反之活力愈低。2. 酶的专一性: 是指一种酶只能对一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化作用的性质,一般又可分为绝对专一性和相对专一性。3. 酶的转换数:是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数,即是每摩尔酶每分钟催化底物转变为产物的摩尔数,是酶的一个指标。4. 酶的发酵生产:是指通过对某些特定微生物进行发酵培养后,利用微生物生长发酵过程中特定的代谢反应生成生产所需要的酶,最后通过提取纯化过程得到酶制剂的过程称为
2、酶的发酵生产。5. 酶的反馈阻遏:6. 细胞破碎:是指利用机械、物理、化学、酶解等方法,使目标细胞的细胞膜或细胞壁得以破坏,细胞中的目标产物得以选择性或全部释放便于后续收集和分离的过程称为细胞破碎。7. 酶的提取: 是指在一定的条件下,用适当的溶剂处理含酶原料,使酶充分溶解到溶剂中的过程,也称作酶的抽提,是酶分离纯化过程常用的手段之一。8. 沉淀分离: 是通过改变某些条件,使溶液中某种溶质的溶解度降低,从溶液中沉淀析出,而与其他溶质分离的方法,常用语酶的初步提取与分离。9. 层析分离: 亦称色谱分离,是一种利用混合物中各组分的物理化学性质的差别,使各组分以不同程度分布在两个相中,其中一个相为固
3、定的(称为固定相),另一个相则流过此固定相(称为流动相)并使各组分由于与固定相和流动相作用力的不同以不同速度移动,从而达到分离的物理分离方法。10. 凝胶层析: 又称为凝胶过滤,分子排阻层析,分子筛层析等。是指以各种多孔凝胶为固定相,在流动相冲洗过程中混合物中所含各种组分的相对分子质量和分子大小不同,在固定相凝胶微孔中移动的距离不同,从而依次从层析柱中分离出来,达到物质分离的一种层析技术。11. 亲和层析: 是利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力,将混合物装入层析柱中利用流动相的冲洗作用和目标分子与固定相配基亲和作用力不同而使生物分子分离纯化的技术。12. 离心分离: 借助于离心
4、机旋转所产生的离心力,使不同大小、不同密度的物质分离的技术过程。13. 电泳: 带电粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的过程称为电泳。利用不同的物质其带电性质及其颗粒大小和形状不同,在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,故此可使它们分离,电泳技术是常用的分离技术之一。14. 萃取: 是利用物质在两相中的溶解度不同而使其分离的技术。15. 双水相萃取:双水相是指某些高聚物之间或者高聚物与无机盐之间在水中以一定的浓度混合而形各种不相溶的两水溶液相。由于溶质在这两相的分配系数的差异进行萃取的方法称为双水相萃取。16. 超临界萃取: 又称超临界流体萃取,是利用欲分离物质与杂质在超临
5、界流体中的溶解度不同而实现分离的一种萃取技术。17. 过滤: 借助于过滤介质将不同大小、不同形状的物质分离的技术过程称为过滤。18. 膜分离技术: 借助于一定孔径的高分子薄膜,将不同大小、不同形状和不同特性的物质颗粒或分子进行分离的技术称为膜分离技术。19. 结晶固定化酶: 通过结晶的手段,将晶体酶束缚于水不溶的载体上,限制酶分子的自由流动,但能使酶充分发挥催化作用的一种酶的固定化技术。20. 固定化细胞: 固定在载体上并在一定的空间范围内进行正常的生长、繁殖和新陈代谢等生命活动的细胞称为固定化细胞,又称固定化活细胞或固定化增殖细胞。21. 吸附法: 通过氢键、疏水作用和电子亲和力等物理作用或
6、离子交换作用,将酶固定于水不溶载体上,从而制成固定化酶的方法称为吸附法22. 包埋法: 是将聚合物的单体与酶溶液混合,再借助于聚合助进剂(包括交联剂)的作用进行聚合,酶被包埋在聚合物中以达到固定化的方法称为包埋法。23. 结合法:在适宜的pH和离子强度条件下,利用酶的侧链解离基团和离子交换剂的相互作用而达到酶的固定化的方法称为结合法也称为键合法24. 交联法: 借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用,制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。25. 酶的定向固定: 把酶和载体在酶的特定位点连接起来,使酶在载体表面按一定方向排列从而提高固定化酶活性的固定化方法称为酶的定向固定。26. 酶分子修饰:
7、 通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。27. 金属离子置换修饰: 把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子,使酶的特性和功能发生改变的修饰方法称为酶的金属离子置换修饰。28. 大分子结合修饰:把酶分子通过共价作用或非共价作用与某些特定的大分子结合,从而使酶的特性和功能发生改变的修饰方法称为酶的大分子结合修饰。29. 肽链有限水解修饰: 利用酶分子主链的切断和连接,使酶分子的化学结构及其空间结构发生某些改变,从而改变酶的特性和功能的方法称为酶的肽链有限水解修饰也称为酶蛋白主链修饰。30. 核苷酸剪切修饰:利用一定的方法(一般为化学法)在DNA
8、转录过程中通过将目标酶蛋白核苷酸的部分剪切,从而通过蛋白质翻译后改变酶的结构、特性和功能的方法称为酶的核苷酸剪切修饰。31. 酶的侧链基团修饰: 采用一定的方法(一般为化学法)使酶蛋白的侧链基团发生改变,从而改变酶分子的特性和功能的修饰方法称为酶的侧链基团修饰。32. 氨基酸置换修饰: 在DNA序列中的某一特定位点上进行碱基的改变获得突变基因,对酶蛋白中特定的氨基酸进行置换,从而改变酶分子的特性和功能的修饰方法称为氨基酸置换修饰。33. 定点突变: 是指在DNA序列中的某一特定位点上进行碱基的改变从而获得突变基因的操作技术。34. 核苷酸置换修饰:通过定点突变等技术对酶蛋白分子DNA序列中的某
9、一特定核苷酸序列进行替换从而改变酶蛋白中特定氨基酸的种类实现酶分子特性和功能改变的修饰方法称为核苷酸置换修饰。35. 核酶: 是指具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂,一般具有降解特异的mRNA序列等功能,又称核酸类酶、酶RNA、 核酶类酶RNA。 它的发现打破了酶是蛋白质的传统观念。36. 模拟酶: 研究天然酶中那些起主导作用的因素,利用有机化学、生物化学等方法设计和合成一些比天然酶简单的具有催化功能的非蛋白质分子或蛋白质分子称为模拟酶。37. 抗体酶:是指通过对生物抗体进行特定的修饰作用在其可变区赋予酶的催化结合等属性制备出的一种催化功能的抗体分子,是一种新型人工酶制剂。38. 生物催化
10、: 利用酶或者生物有机体(细胞、细胞器、组织等)作为催化剂进行化学转化的过程。39. 酶反应器: 在工业生产中以酶作为催化剂进行反应所需的设备称为酶反应器,是用于完成酶促反应的核心装置。它为酶催化反应提供合适的场所和最佳的反应条件,以便在酶的催化下,使底物(原料)最大限度地转化成产物。40. 搅拌罐式反应器: 又称为批量反应器、间歇式搅拌罐。由容器、搅拌器及保温装置组成,底物与酶一次性投入反应器内,产物一次性取出,反应完成之后,酶(细胞)用过滤法或超滤法回收,再转入下一批反应的一类反应器。41. 填充床式反应器: 又称固定床反应器,是将固定化酶填充于反应器内,制成稳定的柱床,然后通入底物溶液,
11、在一定的反应条件下实现酶催化反应,以一定的流速收集输出的转化液(含产物)的一类反应器。42. 流化床式反应器: 是将底物溶液以足够大的流速,从反应器底部向上通过固定化酶柱床,使固定化酶颗粒始终处于流化状态,使反应液的混合程度介于全混型和平推流型之间。即可用于处理黏度较大和含有固体颗粒的底物溶度,同时亦可用于需要供气体或排放气体(即固、液、气三相反应)的酶反应器称为流化床式反应器。43. 鼓泡式反应器: 是利用从反应器底部通入的气体产生的大量气泡,在上升过程中起到提供反应底物和混合两种作用的一类反应器。也是一种无搅拌装置的反应器。44. 膜反应器: 是一种将酶催化反应与半透膜的分离作用组合在一起
12、而成的反应器,可以用于游离酶的催化反应,也可以用于固定化酶的催化反应。45. 喷射式反应器: 通入高压喷射蒸汽,实现酶与底物的混合,进行高温短时催化反应,适用于某些耐高温酶的一类反应器称为喷射式反应器。二、填空题1. 根据国际系统分类法,将所有已知的酶按照催化反应类型分为:氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶六大类。2. 酶活力是催化速率快慢的量度指标,酶的比活力是纯度高低的量度指标,酶的转换数的主要组分是酶催化周期长短的量度指标.3. 1961年,国际酶委员会规定的酶活力单位为:在特定条件下(25,pH及底物浓度为最适宜)每1min,催化1mol的底物转化为产物的酶量为一个国际
13、单位,即1IU。4. 酶活力的测定方法有终点法、动力学法、酶偶联法和电化学法。5. 决定酶催化活性的因素有两个方面,一是酶分子结构,二是反应条件。6. 求Km最常用的方法是双倒数作图法。7. 戊二醛、二氨基丁烷、乙二胺是酶分子修饰中分子内交联最常用的交联剂。8. 1960年,查柯柏和莫洛德提出了操纵子学说,认为DNA分子中,与酶生物合成有关的基因有四种,即操纵基因、调节基因、启动基因和结构基因。9. SDS-PAGE是利用蛋白质的自身相对分子质量不同进行分离,离子交换层析是利用蛋白质的对不同离子亲和作用力不同进行分离。10. 可逆抑制作用可分为竞争性抑制作用、非竞争性抑制作用和反竞争性抑制作用
14、。11. 酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。12. 通常酶的固定化方法有吸附法、交联法、键合法、和包埋法。13. 酶分子的体外改造包括酶的化学酶工程修饰和生物酶工程修饰。14. 模拟酶的两种类型是全合成酶和半合成酶。15. 抗体酶的制备方法有引入法和拷贝法。16. 根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有热变性法和酸碱变性法。17. 酶的生产方法有提取法、发酵法和化学合成法。18. 日本称为“酿素”的东西,中文称为酶,英文则为Enzyme是库尼于1878年首先使用的。其实他存在于生物体的细胞外和细胞内中。19. 酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能,即提高酶的活性、减少抗原性,
15、增加稳定性。20. 借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用,制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。21. 酶的分离纯化方法中,根据目的酶与杂质分子大小差别的分离方法有凝胶过滤法、超滤法和超离心法三种。22. 由于各种分子形成结晶条件的不同,也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶,因此酶结晶既是纯化手段,也是纯化标志。23. 酶催化的作用机理在于能降低反应的活化能。24. 非竞争性抑制的特点是最大反应速度Vm,米氏常数Km。25. 细胞破碎的主要方法有机械破碎,物理破碎,化学破碎和酶促破碎。26. 酶的提取方法主要有盐溶液提取,酸溶液提取,碱溶液提取和有机溶剂提取。27. 结晶的方法主要有盐析结晶
16、,有机溶剂结晶法,透析平衡结晶法,等电点结晶法。28. 加压膜分离可分为微滤,超滤和反渗透。29. 常用的萃取方法有有机溶剂萃取,双水相萃取,超临界流体萃取和反胶束萃取。30. 固定化酶是固定在载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。31. 固定法细胞是固定在载体上并在一定空间范围内进行生命活动的细胞。32. 固定化对酶反应有:,。33. 用带负电荷的载体制备的固定化酶,其最适pH比游离酶的最适pH向碱性方向移动偏高,用带正电荷的载体制备的固定化酶,其最适pH比游离酶的最适pH向酸性方向移动偏低,用不带电荷的载体制备的固定化酶,其最适pH与游离酶的最适pH相近。34. 酶催化反应的产物为酸
17、性是,固定化酶最适pH比游离酶的最适pH高。35. 定点突变是在DNA序列的某一特定位点上进行碱基的改变,从而获得基因突变的操作技术。36. 模拟酶在结构上必须具有两个特殊位点,一个是结合位点,一个是催化位点。37. 抗体酶常用的制备方法有细胞融合法、抗体结合位点化学修饰法、引入辅助因子法、拷贝法等。38. 搅拌罐式反应器主要由反应罐,搅拌器和温度调节装置组成。39. 填充床式反应器是通过底物溶液的流动,实现物质的传递和混合。40. 鼓泡式反应器是有气体参与的酶催化反应中最常用的一种反应器。41. 膜反应器是将酶的催化效应与半透膜的分离作用组合在一起而形成的反应器。42. 喷射式反应器是利用高
18、压蒸汽的喷射作用,实现酶与底物的混合,进行高温短时催化反应的一种反应器。问答题1. 举出四例,说明酶在医学上有广阔的用途。酶作为一种生物催化剂已经被广泛的利用于各个生产生活领域,在医学方面酶也可用于疾病的诊断与治疗。如葡萄糖氧化酶用于测定血糖、尿糖,诊断糖尿病。尿素酶测定血液、尿液中尿素的量,诊断肝脏、肾脏病变。溶菌酶具有抗菌、消炎、镇痛等作用,用于治疗手术性出血、咯血、鼻出血,分解脓液,消炎镇痛等。超氧化物歧化酶(SOD)催化超氧负离子(O2)进行氧化还原反应,使机体免遭O2的损害。因此SOD具有抗辐射作用,并对红斑狼疮、皮炎、结肠炎及氧中毒等疾病有显著疗效。2. 如何检查一种酶的制剂是否达
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