个体化新生抗原疫苗治疗微卫星稳定型晚期结直肠癌1例.pdf
《个体化新生抗原疫苗治疗微卫星稳定型晚期结直肠癌1例.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《个体化新生抗原疫苗治疗微卫星稳定型晚期结直肠癌1例.pdf(4页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、930第 53 卷温 州 医 科 大 学 学 报第 11 期2023-03-19温州市科技局重大科技专项(2018ZY004);浙江省科技厅公益技术研究项目(LGF20H160019,LGF21H160035,LGF22H160044)单娜,住院医师,Email:。蔡振寨,主任医师,Email:。收稿日期:基金项目:作者简介:通信作者:个体化新生抗原疫苗治疗微卫星稳定型晚期结直肠癌1例单娜1,俞耀军2,林李淼3,蔡振寨31.绍兴市人民医院消化内科,浙江绍兴312000;2.温州医科大学附属第二医院胃肠外科,浙江 温州325000;3.温州医科大学附属第二医院消化内科,浙江温州325000本文引
2、用:单娜,俞耀军,林李淼,等.个体化新生抗原疫苗治疗微卫星稳定型晚期结直肠癌1例J.温 州医科大学学报,2023,53(11):930-932,935.病 例 分 析关键词 免疫治疗;新生抗原;结直肠癌;微卫星稳定中图分类号R574.6 DOI:10.3969/j.issn.2095-9400.2023.11.011以肿瘤新生抗原为靶点的免疫治疗因其肿瘤特异性和免疫原性强、安全性高而被认为是肿瘤免疫治疗的最优靶点。我们之前的研究探索了基于肿瘤新生抗原的疫苗疗法在小鼠结直肠癌模型中的可行性和有效性1,但此类疫苗在人类结直肠癌中尚未见应用。为进一步拓展新生抗原疫苗对晚期微卫星稳定(microsat
3、ellitestability,MSS)型结直肠癌(colorectalcancer,CRC)的治疗作用,本研究为1例晚期MSS型CRC患者制备并注射了新生抗原疫苗,研究的初步结果证明了基于肿瘤新生抗原疫苗的可行性及安全性。1 病例资料1.1 病史及一般资料 患者,男,40岁,既往体健。2010年3月10日于上海行“结肠癌根治术”,术后病理提示:乙状结肠溃疡型中分化腺癌,侵及全层,周围淋巴结见癌转移(5/18),术后因个人原因未进行辅助化疗及定期随访。2013年复查发现肝、肺转移性肿瘤,随后于扬州武警医院行肝肺转移瘤微波消融术。2019年至温州医科大学附属第二医院行肝、肺穿刺检查,病理免疫组化
4、结果均提示符合结肠癌转移,基因检测提示未测得用药靶点,后接受两次肺转移瘤微波消融术及一次肝转移瘤微波消融术。2019年12月开始接受新生抗原疫苗治疗。本研究涉及人体样本,相应的设计、方案和修改均获得温州医科大学附属第二医院医学伦理委员会的批准(编号:LCKY2018-67)。1.2 肿瘤新生抗原疫苗制备及注射 使用All-PrepDNA/RNA微型试剂盒(Qiagen,USA/Illumina,USA)从术后肿瘤组织的石蜡切片及外周静脉血中提取DNA和RNA,完成全外显子组DNA和RNA测序。基于MuPeXI(V1.2.0)2、NetMHCpan4.0和变异效应预测器(varianteffec
5、tpredictor,VEP)数据库3对DNA突变和人类白细胞抗原(humanleukocyteantigen,HLA)进行整合分析,根据HLA结合亲和力、表达水平、与自身肽的相似性和突变等位基因频率4-6,对每个肽进行优先级评分。具有高优先级得分的候选新生抗原将最终被选择用于合成疫苗。疫苗为27个氨基酸组成的长多肽,以入选的新生抗原突变点为中心,突变点前后各增加13个氨基酸7-8。采用标准固相合成肽的原理合成新生抗原多肽,多肽的纯化和纯度分析采用反相高效液相色谱法(reversedphase-highperformanceliquidchromatography,RP-HPLC)。疫苗的质检
6、包括细菌内毒素、真菌D葡聚糖检测、细菌真菌涂片检查及小鼠异常毒性检测。拟于患者治疗第1、第4、第8、第15和第22天接受疫苗基础阶段注射,在第12周和第20周接受疫苗加强阶段注射。具体方法为:将疫苗与聚肌胞注射液(广东南国药业有限公司)1:1混匀,在双侧腋Vol.53 No.11Nov.2023第53卷第11期2023年11月温 州 医 科 大 学 学 报Journal of Wenzhou Medical University931第 11 期第 53 卷下和腹股沟行皮下注射治疗,每次按照逆时针顺序完成4个部位的皮下注射。1.3 安全性评估 使用国家癌症研究所不良事件共同术语标准(4.0版)
7、进行评分,通过评估临床不良事件的发生率来评估疫苗治疗安全性。患者疫苗注射前后的常规血指标变化也作为安全性评价的客观依据。1.4 临床 监测及 干 扰素-(in t e rf e ro ngamma,IFN-)酶联免疫斑点(enzyme-linkedimmunosorbentspot,ELISpot)检测 在新生抗原疫苗治疗前后进行临床肿瘤标记物监测。每两个月进行一次增强CT检查,以确定是否存在可测量的肿瘤转移灶。在完成基础阶段及加强阶段的注射治疗后,利用IFN-ELISPOT试剂盒(深圳达科为生物科技有限公司)检测新生抗原特异性T细胞中的IFN-,评估新生抗原的免疫反应。1.5 本例患者疫苗治
8、疗的可行性及安全性评估结果 患者于2019年12月至2020年7月完成了8次疫苗注射治疗(见图1)。治疗及随访期间,患者癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)指标降至正常范围并维持11个月(见图2),胸部增强CT显示肺部多发转移灶进展较前控制(见图3)。ELISpot结果显示,新生抗原疫苗治疗后的外周单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMCs)对新生抗原的应答活性显著增强(见图4)。图1 患者治疗和临床随访图图2 CEA监测图01234567891011121314151617181920(月)治疗肺部影像疫苗注射治疗微波
9、消融术存活控制好转CEA2019-04-06CEA(ng/mL)8060402002020-01-192020-03-252020-06-112020-08-192020-10-052020-11-172020-12-13疫苗治疗期间未观察到明显的治疗相关不良事件,常规血检查也未发现明显异常。2 讨论经全外显子组测序分析,该患者共测得508个突变肽,根据评分系统其中有246个突变肽被认定为新生抗原,最终有7个新生抗原被选定用于疫苗的合成。患者入组后共接受8次疫苗治疗,在新生抗原疫苗接种期间未观察到明显的不良事件,并且没有因毒性作用而延迟给药。在观察期间,患者CEA指标降至正常范围并维持11个月
10、,胸部增强CT显示肺部多发转移灶进展较前控制。通过监测外周静脉血中的PBMCs,发现疫苗治疗后机体产生了较强的免疫反应。截至临床试验截止日期,患者的无进展生存期(progression-freesurvival,PFS)已达24个月。上述结果的分析表明,即使是MSS型晚期CRC患者也有望从这种免疫疗法中获益。目前,我国CRC的发病率在全身恶性肿瘤中居第五位9,约20%的CRC首次就诊时已是IV期,其5年生存率仅为13%10-12。CRC晚期确诊率高、晚期生存率低已成为不容忽视的现状。由于错失最佳手术机会、放化疗方案单一、可用的靶向药物不多等因素使得晚期CRC患者经常面临“无药可医”的困境。20
11、13年,肿瘤的免疫治疗被Science杂志评为年度十大科学突破之首13。目前,基于免疫检查点抑制剂(immunecheckpointinhibitors,ICIs)的免疫疗法已广泛应用于肺癌、转移性黑色素瘤、食管癌等肿瘤的治疗14-16。Keynote-177随机I I I期临床试验表明,使用帕博利珠单抗(pembrolizumab)治疗微卫星不稳定型(microsatelliteinstabilityhigh,MSI-H)转移性CRC患者的PFS优于化疗,同时影像学评价也显示帕博利珠单抗组的总缓解率和完全缓单娜,等:个体化新生抗原疫苗治疗微卫星稳定型晚期结直肠癌1例932第 53 卷温 州
12、医 科 大 学 学 报第 11 期解率较高17。这有力地证明了基于ICIs的免疫疗法在MSI-H型转移性CRC治疗中的临床价值。2015年和2016年,美国临床肿瘤学会(AmericanSocietyofClinicalOncology,ASCO)发表了程序性死亡受体1(programmedcelldeathprotein1,PD-1)/程序性死亡配体1(programmedcelldeath1ligand1,PD-L1)抑制剂帕博利珠单抗和纳武单抗(nivolumab)治疗晚期CRC的临床试验结果。结果表明MSI-H型CRC患者客观缓解率优良,缓解时间较长,药物不良反应可控。然而,占绝大多数
13、MSS型的晚期患者很难从ICIs免疫治疗中获益18。因此,破除MSS型晚期CRC患者的免疫抵抗或提出新的免疫治疗方法,成为了CRC免疫治疗研究的热点。基于新生抗原的肿瘤疫苗已被证明是治疗黑色素瘤和晚期肺癌的安全有效的疫苗8,19。相关研究表示基于肿瘤新生抗原的疫苗会触发特异性T细胞对疫苗接种前未检测到的预测新表位的反应,这也有力地证明了存在利用自身免疫系统杀死肿瘤细胞的可能性20。目前,一些临床试验已经证明了这些疫苗的安全性和有效性21。然而,关于晚期CRC肿瘤个体化疫苗治疗的研究很少。课题组前期将个体化新生抗原疫苗注射到结肠癌小鼠模型体内,初步验证了新生抗原鉴定的可行性、治疗的安全性和有效性
14、1。本研究为1例MSS型晚期CRC患者进行新生抗原疫苗治疗,评估了肿瘤疫苗治疗晚期CRC的可行性和安全性,为结直肠癌患者的免疫治疗提供了新的思路。初步结果表明,新生抗原疫苗是一种安全可行的MSS型CRC治疗策略。然而,我们的临床试验入组患者数量少,且未能进行多中心临床试验,对新生抗原疫苗有效性的评估仍欠完善,这些问题都需要投入更多的时间和精力去解决。参考文献1 YU Y,ZHANG J,NI L,et al.Neoantigen-reactive T cells exhibit effective anti-tumor activity against colorectal cancer J.
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 个体化 新生 抗原 疫苗 治疗 卫星 稳定 晚期 直肠癌
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。