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选修一测试

一、单选题
1．下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是(　　)
成分
牛肉膏
葡萄糖
K2HPO4
伊红
美蓝
青霉素
琼脂
蒸馏水
含量
10 g
10 g
2 g
0.4 g
0.065 g
1万单位
适量
1000 mL
A．能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因
B．此培养基是天然鉴别培养基
C．此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准
D．此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中
2．在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如下图。以下判断错误的是

A．a处抑菌效果小于b处 B．b处的滤纸片没有沥干
C．c处抗生素无效 D．d为对照
3．某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5 cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表。与此有关的叙述不正确的是(　　)
组别
1组
2组
3组
4组
土壤
灭菌
不灭菌
灭菌
不灭菌
处理
湿润
湿润
较干燥
较干燥

A．探究的问题是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用
B．预期结果是1、3组的落叶不被分解，2、4组中的落叶被不同程度的分解
C．为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理
D．该实验的自变量为土壤是否灭菌处理，实验中的对照组是1和3
4．果酒、果醋和泡菜制作过程中，发酵液最终都呈酸性，下列原因解释不正确的是(　　)
A．制作果酒初期酵母菌进行有氧呼吸产生CO2
B．制作果酒后期酵母菌进行无氧呼吸产生CO2
C．制作泡菜时乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸
D．制作果醋时醋酸菌进行无氧呼吸产生醋酸
5．抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌（图a），继续在同样条件下培养3天，结果如下图b。分析结果，得出的结论是

①甲菌产生了抗生素 ②丙菌的生长被乙菌产生的抗生素抑制
③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制
④丁菌产生的抗生素抑制了丙菌的生长
A．①④ B．①③ C．②③ D．②④
二、非选择题
6．某校生物研究性学习小组的同学欲调查某冷饮店的冰块中大肠杆菌的含量。具体实验步骤如下:
第一步:配置培养基（成分：蛋白胨、氯化钠、乳糖、水、X和Y）；
第二步:制作无菌平板；
第三步:设置空白对照组和实验组，对照组接种①，实验组接种②。
第四步:将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题:
（1）培养基中的乳糖可以为大肠杆菌提供________。为了方便大肠杆菌的鉴定，需要在培养基中添加成分X ______，在该培养基表面，大肠杆菌的菌落呈现 ______（填颜色）。为了完成步骤二，该培养基中的成分Y通常是________。
（2）完善步骤三，①是_________________ ，②是 ____________________ 。
（3）若该小组在空白对照组的平板上检测到少许菌落，请分析可能的原因:_____________________ 。
（4）将1mL冰块水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为 ___________________ 。
7．红梨醋饮属于绿色健康饮品，其制作流程如图：

请回答：
（1）可在酸性条件下用____________与发酵产物反应，检测①过程是否成功。
（2）①过程涉及的微生物与②过程涉及的微生物最主要的区别是______________。
（3）对②过程所用的微生物进行分离和纯化时，常用的划线工具是___________。在固体培养基上划线4次，至少需要灼烧划线工具______次。这种接种方法的名称是________________。
（4）为检测生产用水水源地的大肠杆菌含量，每次将200ml水样过滤后，取滤膜放在伊红美蓝培养基上，重复三次。将3个平板培养24h后挑选______色的菌落进行计数。平板上目的菌菌落数分别为130、121和109，据此可计算出每升水样中的大肠杆菌数为______个。若采用显微镜直接计数法，计数结果会偏高，原因是_____________________________。
8．国家生活饮用水卫生标准规定：接种1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，在37℃下经24 h培养，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：
（1）用无菌三角瓶取水样前，取样器（玻璃制品）需使用_____________法灭菌。取水前的这种无菌操作的目的是____________________________。
（2）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将30 mL水样平均分成3份进行过滤，再将3份滤膜分别放在，牛肉膏蛋白胨培养基上培养，培养时应将平板倒置，其原因是____________________________________________________________________________。在培养过程中，不同时间所观察到的平板上菌落特征的差异有________________________（至少写出两点）。
（3）在37℃下经24 h培养，结果如下表：

平板1
平板2
平板3
菌落数（个）
370
350
380
据上表结果判断，所取水样测定结果_____（填“符合”或“不符合”）饮用水的标准。
（4）该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目，可将滤膜放在含______________培养基上，计算培养基上______（颜色）菌落的数目。
9．临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：
（1）为统计样品中活菌的数目，常将样品用___________法接种于培养基表面。运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________________ ___________________________________________。
（2）为了检验该致病菌对于抗生素的敏感性，在该病菌菌落均匀生长的平板的不同位置，分别放置含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片，培养一段时间后，在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A>C>D>B，由此推断，该病人目前适合使用的抗生素_________________。含C的滤纸片周围透明圈比含A的小，最可能的原因是_______________导致的结果；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现一个菌落，这种菌落的出现可能是由于接种过程不严格导致的，也可能是产生了抗生素D的耐药菌，这种变异的特点是__________________________________（至少列举两个）。
（3）实验中培养基需用____________灭菌、接种环用灼烧灭菌、接种过程也在酒精灯火焰旁进行，其达到的实验目的是 _____________________________________________。
10．高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。请分析回答下列问题：

（1）按功能分，Ⅰ号培养基称为__________________________；该培养基中必须以______作为唯一碳源。过程①②合称为________________，若该过程所得平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为0.2mL，稀释倍数为105时，则每毫升样品中的细菌数约为______个。
（2）对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌，目的是_______________________________。

（3）在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的___________；也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图所示情况，可判断图中___________的菌落含有所需菌种。
（4）如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择下图中的______（填写字母）固定化工艺。

11．研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如下图所示。

(1) 柚皮易焦煳，宜采用________法提取柚皮精油，新鲜的柚皮干燥去水并用________浸泡处理，该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。
(2) 培养基中的尿素和牛肉膏可为乳酸菌A生长提供_____________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其相对分子质量越大，电泳速度________。
(3) 做抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(4) 柚皮油也可以用萃取法来提取，原因是__________________，分析上图，提高萃取效果的方法是__________________、__________________。

参考答案
1．D
【解析】据表分析：此表表示鉴定大肠杆菌的合成培养基。微生物的培养基的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐，有的还会有生长因子等。
由于青霉素抑制细菌的生长繁殖的作用，所以该培养基一般不适合培养大肠杆菌。能在此培养基上生长的大肠杆菌，抗青霉素的抗性基因一般位于大肠杆菌的质粒上，A错误；此培养基中含牛肉膏，属于天然成分，所以属于天然培养基，B错误；此培养基只能用来检测自来水中大肠杆菌含量是否符合饮用水标准，C错误；大肠杆菌常作为基因工程的工程菌，此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中，D正确。
【点睛】此表表示鉴定大肠杆菌的天然培养基。抗性基因一般位于大肠杆菌的质粒上，而不是拟核上；此培养基只能用来检测自来水中大肠杆菌含量是否符合饮用水标准。 
2．A
【解析】
透明圈大的抑菌效果好，透明圈小的抑菌效果弱。d为空白对照，与d处的比较可说明a处抑菌效果大于b处；A错误。B处透明圈不规则，可说明 b处的滤纸片没有沥干；B正确。C处的与d处相同，说明c处抗生素无效；C正确。
【考点定位】本题考查微生物的培养的相关知识。
3．D
【解析】由表格可知，该实验有两个自变量：是否灭菌和湿度，探究的问题是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用，A正确；1、3组灭菌，没有微生物，落叶不被分解，2、4组有微生物，但湿度不同，则落叶分解程度不同，B正确；该实验中微生物来自土壤，所以为控制无关变量，落叶应进行灭菌处理，C正确；该实验有两个自变量：是否灭菌和湿度，对照实验需遵循单一变量原则，在湿润条件下1、2形成对照，在干燥条件下3、4形成对照，所以1、3分别是两组对照实验的对照组，D错误。
4．D
【解析】制作果酒初期，酵母菌先进行有氧呼吸产生二氧化碳和水，故A正确；制作果酒后期，发酵罐中没有氧气，酵母菌进行无氧呼吸产生二氧化碳和酒精，故B正确；制作泡菜时，乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸，故C正确；制作果醋时，醋酸菌进行有氧呼吸产生醋酸，故D错误。
5．B
【解析】根据图b可知，乙菌落靠近甲菌落的位置生长受到抑制，说明甲菌产生了抑制乙菌生长的抗生素，①③正确；丙菌、丁菌菌落生长正常，说明丁菌不产生抑制病菌生长的抗生素，②④错误，选B。
【点睛】解答本题的关键是：根据四个菌落的位置及被抑制的菌落位置判断产生抗生素的菌落。
1．碳源 伊红美蓝 黑色 琼脂 适量无菌水 等量冰块水 培养基灭菌不合格或倒平板（接种）过程被污染 3.8×107
【解析】
【分析】
本题主要考查细菌培养的有关知识。伊红美蓝培养基是一种鉴别培养基，可用来鉴别大肠杆菌，当大肠杆菌分解乳糖产酸时，细菌带正电荷被染成红色再与伊红美蓝结合形成黑色菌落，并带有金属光泽；倒平板法需要固体培养基通过添加琼脂作为凝固剂来将液体培养基转化为固体培养基。
【详解】
(1 )培养基中的乳糖可以为大肠杆菌提供碳源，伊红美蓝培养基是一种鉴别培养基是用来鉴别大肠杆菌的，若有大肠杆菌,则培养基会变成紫黑色，并带有金属光泽；培养基中加入琼脂，将液体营养物质凝固倒在培养皿中冷却为固体培养基。
(2 )空白对照就要使对照组无菌，实验组加入鉴定对象冰块水，故对照组接种适量无菌水，实验组接种等量冰块水。
(3 )若培养基灭菌不合格或接种过程中被污染，那么在空白对照组的平板上也会检测到菌落。
( 4 ) 由由题意知1ml水样中的菌落数是（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×104个，每升水样中的活菌数为3.8×104×103=3.8×107。
【点睛】
对微生物的实验室培养和应用的知识的掌握是解决本题的关键。
2．重铬酸钾 前者有细胞核，后者无细胞核 接种环 5 平板划线法 黑 600 死菌也被计数
【解析】
【分析】
本题考查果酒和果醋的制作、微生物分离和培养，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其新陈代谢类型，掌握果酒和果醋制作的原理；识记接种微生物常用的方法及计数常用的方法，能结合所学的知识准确答题．
【详解】
（1）①为果酒发酵过程，该过程产生的酒精可使酸性重铬酸钾溶液变成灰绿色．
（2）①表示果酒发酵，②表示果醋发酵，参与果酒制作的微生物是酵母菌，是真核生物；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，是原核生物，最大的区别是前者有细胞核，后者无细胞核
（3）对②过程所用的微生物进行分离和纯化时，常用的划线工具是接种环（或接种针）．每次划线之前和结束后都需要灼烧接种环，因此在固体培养基上划线4次，至少需要灼烧划线工具5次．把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，这种方法称作平板划线法。
（4）伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌，使菌落呈黑色，因此将3个平板置于37℃恒温箱中培养24h后挑选黑色的菌落进行计数．每升水样中的大肠杆菌数为（32+292+36）÷3×1000÷200=600个．若采用显微镜直接计数法，死菌也被计数，造成计数结果会偏高，
【点睛】
图示①表示果酒发酵，②表示果醋发酵．
果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
11． 高压蒸汽（或干热灭菌） 防止外来杂菌污染 防止冷凝水滴落污染培养基，也可使培养基表面的水分更好地挥发 菌落大小、数目、形状、颜色等 符合 伊红美蓝 黑色
【解析】试题分析：解答本题需要熟练掌握微生物的分离、计数与灭菌的方法。灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，使用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等；消毒是指用较为温和的物理和化学方法杀死物体表面或内部部分微生物（不包括芽孢和孢子），常用方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，使用对象有操作空间、某些液体、双手等。统计菌落数目使用的方法有显微镜直接计数法和活菌计数法，其中活菌计数法即稀释涂布平板法，一般选取菌落数在30-300个的平板进行计数。
（1）用无菌三角瓶取水样前，取样器（玻璃制品）需使用高压蒸汽（或干热灭菌）法灭菌。取水前的无菌操作的目的是防止外来杂菌污染，以免干扰实验结果。
（2）平板倒置后既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止冷凝水滴落到培养基上，造成污染，影响实验结果；不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落一般都具有稳定的特征，如菌落大小、数目、形状、边缘特征、隆起程度、颜色等。
（3）表格中3个平板的平均菌落数为367个，则每毫升水中的菌落数为36.7个，低于国家规定的标准，因此所取水样符合饮用水的标准。
（4）测定饮用水中大肠杆菌的数目的方法：将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色，可根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数目。
【点睛】微生物的培养和分离的易混点：一是无菌技术的关键是防止外来杂菌的入侵，其中灭菌比消毒效果好，但要考虑操作对象的承受能力，如活体材料、操作者等只能采用消毒法；二是统计细菌个数的方法分显微镜直接计数法和间接计数法（活菌计数法），本题中涉及的是活菌计数法。
12． 稀释涂布 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 A 该致病菌对C的敏感性比对A的弱 随机的 不定向的 高压蒸汽 确定某致病菌对不同抗生素的敏感性
【解析】【试题分析】
本题主要考查微生物培养过程中的接种方法，以及分析实验结果获取结论的能力。解题的关键是运用所学过的知识点“透明圈”，进行知识点的迁移、类比，然后解决问题。
1．稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
2．抗生素是由真菌产生的，可以抑制生长、繁殖或杀死细菌等致病菌的一类物质。在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌。透明圈的大小表示此种抗生素抗菌的强弱，根据材料分析，抗菌强弱依次是A、C、D、B；D的透明圈中出现了一个菌落，说明该菌落对此种抗生素具有耐药性。
（1）为统计样品中活菌的数目，常将样品用稀释涂布法接种于培养基表面；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此，运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
（2）在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌，透明圈的大小表示此种抗生素抗菌的强弱。由于四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B，可以推断出抗生素A对该致病菌的效果最好，该病人目前适合使用的抗生素是A；含C的滤纸片周围透明圈比含A的小，说明该致病菌对C的敏感性比对A的弱；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现一个菌落，这种菌落的出现可能是由于接种过程不严格导致的杂菌污染，也可能是由于基因突变产生了抗生素D的耐药菌，基因突变的特点是随机的、不定向的。
（3）培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，接种环的灭菌方法是灼烧灭菌，接种过程应该在点燃的酒精灯旁进行，以防止杂菌污染；该实验的目的是确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
13．选择培养基 淀粉 稀释涂布平板法 2.5×107 使培养基中所有微生物永远丧失生长繁殖能力（或杀死培养基中所有的微生物，包括芽孢和孢子或防止杂菌污染） 透明圈 周围不显蓝色 C
【解析】
【分析】
本实验目的是从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，因此需要制备以淀粉为唯一碳源的选择培养基；图示可见，①过程是稀释嗜热菌培养液的过程，接种嗜热菌即②过程常用稀释涂布平板法。培养基配制和灭菌过程中，应注意先调节pH，后灭菌，一般培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法，高压蒸汽灭菌法是可杀灭包括芽胞在内的所有微生物的一种灭菌方法。部分嗜热菌在Ⅰ培养基上生长时可产生淀粉酶，分解培养基中的淀粉后会在菌落周围形成透明圈，透明圈越大，说明产生的淀粉酶越多，因此应挑选透明圈大的菌落接种在Ⅱ号培养基上继续培养。
【详解】
（1）Ⅰ号培养基称为选择培养基，该培养基中必须以淀粉作为唯一碳源。过程①②为稀释涂布平板法；若平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为0.2mL，稀释倍数为105时，则每毫升样品中的细菌数约为50÷0.2×105=2.5×107个。
（2）对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌，是为了杀灭包括芽胞在内的所有微生物，防止杂菌污染。
（3）1号培养基上的嗜热菌可产生淀粉酶分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈；若菌落含有可产淀粉酶的嗜热菌，淀粉会被分解，加碘液后不显蓝色，因此可判断图中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种。
（4）据图分析，A是物理吸附法，B是化学结合法，C是包埋法，由于酶容易从包埋材料中漏出，所以一般不使用包埋法，化学结合法可能会对酶活性产生影响，想要酶活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择图中的C。
【点睛】
本题结合筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌的过程图，考查学生的识图能力、识记能力和理解应用能力，意在考查学生对微生物选择、培养、利用的理解和酶的固定化技术。
14．压榨 石灰水 过滤 碳源和氮源 越慢 大小 柚皮油易溶于有机溶剂　 适当延长萃取时间(萃取时间为1.5 h) 适当提高萃取温度
【解析】
试题分析：当水蒸气蒸馏法出现原料易焦糊、有效成分易水解等现象时，这时一般应选取压榨法，如橘（柚）皮精油的提取。为了提高出油率，需要对橘（柚）皮干燥去水，再用石灰水浸泡以防治压榨时出现滑脱现象。进行抑菌实验的原理是长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈，可通过测定透明圈的大小来比较抑菌效果。如果提取物易溶于有机溶剂，可也选择萃取法提取，根据题中曲线分析可知，为了提高萃取效果，可以采用适当延长萃取时间和适当提高萃取温度的方法。
（1）柚皮易焦糊，宜采用压榨法提取柚皮精油。为了提高出油率，需将新鲜的柚皮干燥去水并用石灰水浸泡处理。该过程得到的糊状液体可通过过滤除去其中的固体杂质。
（2）尿素是由C、H、O和N组成的有机化合物，培养基中的尿素可为乳酸菌A的生长提供碳源和氮源。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度越慢。
（3）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。透明圈越大，说明抑菌效果越好，反之则抑菌效果较差，因此可通过测定透明圈的大小来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
（4）柚皮油易溶于有机溶剂，也可以用萃取法来提取。曲线图显示，在一定范围内，随着时间的延长或温度的提高，出油率也随之增加，说明适当延长萃取时间（萃取时间为1．5h） 和适当提高萃取温度（萃取温度为55度）都能提高萃取效果。
【点睛】本题主要涉及植物有效成分提取时方法选择的判断以及操作要求的考查，需要熟悉蒸馏法、压榨法和萃取法的适用原理、操作过程和影响因素等。
15．（1）三丁基锡；氮源；琼脂
（2）玻璃器皿和金属用具能耐高温，且要保持干燥
（3）稀释涂布平板法；低；杀灭接种环上的微生物，使微生物数目能够随着划线次数的增加而逐步减少，以达到分离的效果
（4）乙
【解析】
（1）本实验为分离分解三丁基锡的微生物，培养基的碳源应为三丁基锡。培养基的成分一般包括碳源、氮源、水分、无机盐等，选择培养基一般为固体培养基，培养基中应含有琼脂。
（2）干热灭菌法适用于能耐高温，需保持干燥物品，玻璃器皿和金属器皿符合该条件。
（3）重要的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，前者只能用于分离微生物，后者不仅能分离微生物还能计数；稀释涂布平板法计数是根据菌落数目表示微生物数目，菌落有可能是两个微生物或多个共同发育而来，导致菌落数目小于微生物数目；灼烧是接种环常用灭菌方法；上次划线的末端微生物数目少，通过划线能进一步降低微生物的数目，达到分离的目的。
（4）根据停止生长的时间，乙需要时间最短，说明其分解三丁基锡的能力最强。
考点：微生物的分离和培养、消毒灭菌的方法
【名师点睛】微生物消毒和灭菌常用方法
项目

条件

结果

常用方法

应用范围

消
毒

较为温和的物理或化学方法

仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物

煮沸消毒法

日常用品

巴氏消毒法

不耐高温的液体

化学药剂消毒法

用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源

灭
菌

强烈的理化因素

杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子

灼烧灭菌法

接种工具

干热灭菌法

玻璃器皿、
金属工具

高压蒸汽
灭菌法

培养基及容
器的灭菌