多普勒超声联合血清HIF-1α、VEGF水平诊断宫颈癌的临床应用价值.pdf

实验与检验医学2 0 2 3年8 月第41卷第4期Experimental and Laboratory MedicineAug.2023,Vol.41,No.4多普勒超声联合血清HIF-1、V E G F水平诊断宫颈癌的临床应用价值尚晓敏（南阳市中心医院，河南南阳47 30 0 0)摘要：目的探讨多普勒超声(TVCDS)联合血清缺氧诱导因子1(HIF-1）、血管内皮生长因子(VEGF)水平诊断宫颈癌的临床应用价值。方法选取本院收治的114例宫颈癌患者为宫颈癌组，另取同期114例宫颈良性病变患者为宫颈良性病变组,所有受试者使用多普勒超声检查，并使用免疫组化法检测HIF-1和VEGF的表达水平,绘制ROC曲线分析各指标单独及联合用于宫颈癌的诊断价值。结果宫颈癌组HIF-1和VEGF阳性率高于宫颈良性病变组（P0.05);ROC曲线显示，TVCDS、H I F-1和VEGF单独与联合诊断用于宫颈癌的曲线下面积(AUC)分别为0.7 50.0.6 9 9 和0.7 0 0,三者联合诊断宫颈癌的AUC为0.9 35,高于单独诊断(P0.05);HIF-1和VEGF在分化程度为中、低分化，有淋巴结转移，临床分期为期的宫颈癌组织中,阳性表达率高于分化程度为高分化、无淋巴结转移、临床分期为I+II期的宫颈癌组织（P0.05)。结论HIF-1和VECF表达水平在宫颈癌组织中更高,TVCDS、H IF-1和VEGF三者联合诊断有助于宫颈癌的早期诊断,HIF-1和VEG的表达水平与分化程度、临床分期和淋巴结转移有关，可以用于宫颈癌的病情评估。关键词：多普勒超声；缺氧诱导因子；血管内皮生长因子；宫颈癌中图分类号：R737.33D0I:10.3969/j.issn.1674-1129.2023.04.009Clinical value of Doppler ultrasonography combined with serum HIF-1 and VEGF levels in the diagnosis of cervicalcancer SHA NG Xiaoming.Nanyang Central Hospital,Henan Nanyang 473000,China.Abstract:Objective To investigate the clinical value of Doppler ultrasound(TVCDS)combined with serum hypoxia-inducingfactor l(HIF-la)and vascular endothelial growth factor(VEGF)levels in the diagnosis of cervical cancer.Methods A total of114 patients with cervical cancer admitted to our hospital were selected as cervical cancer group,and 114 patients with cervicalbenign lesions were selected as cervical benign lesions group.All subjects were examined by Doppler ultrasound,and the expres-sion levels of HIF-1 and VEGF were detected by immunohistochemical method.ROC curve was drawn to analyze the diagnosticvalue of each index for cervical cancer alone and in combination.Results The positive rates of HIF-l and VEGF in cervicalcancer group were higher than those in cervical benign lesion group(P0.05).ROC curve showed that the area under the curve(AUC)of TVCDS,HIF-1 and VEGF alone and combined for cervical cancer diagnosis were 0.750,0.699 and 0.700,respectively,and the AUC of TVCDS,HIF-1 and VEGF combined for cervical cancer diagnosis was 0.935,higher than that of single diagnosis(P0.05).The positive expression rates of HIF-l and VEGF in cervical cancer tissues with moderate or low differentiation,lymphnode metastasis and clinical stage II were higher than those with highly differentiated cervical cancer tissues without lymph nodemetastasis and clinical stage I+II(P0.05).Conclusion The expression levels of HIF-1 and VEGF are higher in cervical cancer tissues,and thecombined diagnosis of TVCDS,HIF-1 and VEGF is helpful for the early diagnosis of cervical cancer.The expression levels ofHIF-l and VEG are related to the degree of differentiation,clinical stage and lymph node metastasis,and can be used for the e-valuation of cervical cancer.Key words:Doppler ultrasound;Hypoxia-inducing factor;Vascular endothelial growth factor;Cervical cancer宫颈癌是由错综复杂的因素引起的女性恶性肿瘤。由于该病的早期症状不易察觉,且该病容易基金项目：河南省科技攻关计划项目，编号LHGJ20191188作者简介：尚晓敏，主治医师。417.实验研究文献标识码：A文章编号：16 7 4-112 9(2 0 2 3)0 4-0 417-0 5误诊为慢性宫颈炎，导致治疗效果不佳,严重影响预后。因此，宫颈癌的早期诊断至关重要。经阴道彩色多普勒超声(Transvaginal color Doppler sonogra-phy,TVCDS)可以清晰显示肿瘤血流分布,是一种.418无创检查,操作方便 2。缺氧诱导因子1(Hypoxiainduciblefactor-l,HIF-l）在缺氧环境下会异常表达，促进肿瘤细胞生长3。血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF）可以通过影响内皮细胞的表达促进血管生长，从而促进肿瘤细胞增殖。有部分学者研究发现HIF-1、VEGF在子宫内膜癌中高表达，可以影响肿瘤血管生成,但在宫颈癌中的探究不足。为了提高宫颈癌的诊断价值，进而为宫颈癌的临床治疗和预后提供更多思路，本研究以114例宫颈癌组织标本为例，探讨TVCDS、H IF-1、VE G F在宫颈癌早期诊断的应用价值。1资料与方法1.1一般资料选取2 0 17 年1月至2 0 19 年12 月本院收治的114例宫颈癌患者为宫颈癌组。纳人标准：(1)经病理学检查确诊为宫颈癌；(2)年龄大于18 周岁。排除标准：(1)合并其他生殖系统疾病患者；(2)合并心肝肾肺功能障碍、代谢性疾病以及其他恶性肿瘤患者；(3)合并妊娠患者；(4)精神类疾病患者;(5)化疗和放疗病史患者；(6)近3个月使用过激素药物和免疫抑制剂患者。其中,年龄3469岁，平均（53.32 6.2 7)岁；临床分期I期2 4例，期52 例，期38 例；有淋巴结转移者46例,无淋巴结转移者6 8 例。另取同期114例宫颈良性病变患者为宫颈良性病变组,其中年龄35 6 9岁，平均(54.48 6.13)岁。两组受试者的基础资料差异无统计学意义（P0.05)。本研究符合世界医学协会赫尔辛基宣言要求。1.2方法（1）采集人院后两组受试者的组织标本，经石蜡包埋后切片，厚度约为4m,采用免疫组化染色（试剂盒均购自北京中杉金桥生物科技有限公司），所有步骤按照试剂盒说明书操作，以阳性切片和PBS代替一抗作阴性对照。(2)采用半定量积分法判定HIF-1和VEGF结果，在光镜下,HIF-1阳性为胞质或细胞核中观察到棕黄色染色，VEGF阳性为胞质或细胞核中观察到棕黄色染色。以染色强度计分：棕黄色3分，黄色2 分，淡黄色1分，无色0 分。在高倍镜下，随机选取5个视野，阳性细胞百分比大于7 5%为3分，31%7 5%为2 分，11%30%为1分，小于11%为0 分。两项的乘积得分1分为阳性,0 分为阴性。（3)使用多普勒超声诊断仪（飞利浦公司)对入院后的两组受试者进行检查，设置频率5 9 MHz,取截石位，实验与检验医学2 0 2 3年8 月第41卷第4期Experimental and LaboratoryMedicine，A u g.2 0 2 3,Vo l.41,No.4探头置人阴道穹部，进行多角度全方位检查，结果由两名经验丰富的医师分析。1.3评价指标（1）比较两组受试者HIF-1和VEGF阳性率。（2)比较TVCDS、H I F-1和VEGF单独与联合诊断应用于宫颈癌的诊断效果。（3)比较HIF-1和VEGF表达水平与临床病理特征。1.4统计学处理使用SPSS20.0统计软件，计量资料以x土s表示，进行t检验；计数资料以率（%）表示并以x进行检验；等级资料采用Mann-Whit-neyU检验;绘制TVCDS、H I F-1和VEGF及三者联合诊断的ROC曲线，比较曲线下面积,P0.05,为数据差异有统计学意义。2结果2.1两组受试者HIF-1和VEGF阳性率比较宫颈癌组HIF-1和VEGF阳性率高于宫颈良性病变组(P0.05)。见表1。表1 两组受试者HIF-1和VEGF阳性率比较 n(%)组别宫颈良性病变组宫颈癌组值P值2.2 TVCDS、H I F-1和VEGF单独与联合诊断应用于宫颈癌的诊断效果ROC曲线显示,TVCDS诊断宫颈癌的曲线下面积（AreaUnder Curve，AUC）为0.8 55,HIF-1诊断宫颈癌的AUC为0.881,VEGF诊断宫颈癌的AUC为0.8 41，三者联合诊断宫颈癌的AUC为0.9 0 1，高于单独诊断(P0.05)。见图1,表2。1.0-0.8-0.6-搬感度0.4-0.2-0.00.0HIF-1 阳性1142(1.75)11489(78.07)436.3410.001ROC曲线0.40.61-特异性图1TVCDS、H I F-1和VEGF单独与联合诊断在宫颈癌中的ROC曲线VEGF阳性5(4.39)83(72.81)319.6200.001TVCDSHF-10VEGF联台0.810实验与检验医学2 0 2 3年8 月第41卷第4期Experimental and Laboratory Medicine,Aug.2023,Vol.41,No.495%CI项目AUCTVCDS0.855HIF-10.881VECF0.841联合0.9012.3宫颈组织中HIF-1和VEGF表达阳性率与临床病理特征关系HIF-1和VEGF在分化程度为中、低分化,有淋巴结转移,临床分期为期的宫颈癌组织中，阳性表达率高于分化程度为高分化、无淋巴结转移、临床分期为I+期的宫颈癌组织（P0.05）。见表3。3讨论宫颈癌的发病机制尚未有定论，有研究学者认为,宫颈癌的发生可能与女性性生活紊乱、口服避孕药、吸烟、乳头瘤病毒感染等因素有关 7-8。宫颈癌在女性恶性肿瘤中病死率极高，仅低于乳腺癌，由于该病早期无显著症状，很容易发展为中晚期,而这一时期治愈率较低9。因此,宫颈癌的早期治疗极为重要。而且早期治疗的治愈率可达9 0%以上 10 。目前,宫颈癌的诊断方法较多,但是诊断率普遍较低，因此需要寻找合适的指标来提高宫颈癌的早期诊断率。由于代谢旺盛，恶性肿瘤细胞需要更丰富的血液供应来满足增殖的需求，致使血流异常。TVCDS可以清晰显示女性阴道的解结构，获得表 3宫颈组织中 HIF-1 和 VEGF表达水平与临床病理特征关系(n,%)n(%)临床特征n年龄50岁50岁肿瘤直径4cm4cm分化程度中、低高淋巴结转移有无临床分期I+I419.表2 TVCDS、H I F-1和VEGF单独与联合诊断在宫颈癌中的诊断价值S.E下限0.0240.0010.0210.0010.0230.0010.0200.001宫颈和管腔的血流分布情况，从而可以用来判断肿瘤的生长状况,是临床常用的诊断方式 2 。本研究结果显示,TVCDS在宫颈癌中的ROC曲线下AUC为0.8 55，提示TVCDS用于宫颈癌具有诊断价值。但是该诊断方式依赖医师的主观判断,特异度不高，会影响诊断效果。HIF-1在缺氧的环境中会大量转录,是重要的蛋白因子，可以影响蛋白的合成,从而促进肿瘤细胞增殖,已有研究报道,HIF-1在乳腺瘤、子宫内膜癌、卵巢癌中存在异常表达13。本研究结果显示，宫颈癌组HIF-1阳性率高于宫颈良性病变组,且HIF-1在宫颈癌中的ROC曲线下AUC为0.881,提示HIF-1参与了宫颈癌的发生,具有一定的诊断价值。在正常的机体中，氧环境正常，HIF-1的合成量基本等于讲解量，两者处于动态平衡中,因此很难检测到HIF-1的表达 4。在宫颈癌中，癌细胞处于缺氧环境，在这种情况下，HIF-1的合成呈几何数快速上升,而降解受到抑制，合成后的HIF-1与缺氧应答靶基因结合,为肿瘤细胞的增殖提供能量。万爱红等 15 研究发现，在分化程度为中、低分化，有淋巴结转移，临床分HIF-1阳性X0.9746956(81.16)4533(73.33)7152(73.24)4337(86.05)8067(83.75)3422(64.71)4644(95.65)6845(66.18)7654(71.05)3835(92.11)PP0.3242.5660.1095.0540.02513.9240.0016.5580.010上限0.8020.8980.8310.9200.7870.8860.8540.936VECF阳性X1.94347(68.12)36(80.00)52(73.24)31(72.09)74(92.50)9(26.47)43(93.48)40(58.82)49(64.47)34(89.47)P0.1630.0180.89452.5420.00116.6440.0017.9970.005.420.期为期的宫颈癌组织中,HIF-1阳性表达率更高。本研究表明,HIF-1在分化程度为中、低分化，有淋巴结转移，临床分期为期的宫颈癌组织中，阳性表达率高于分化程度为高分化、无淋巴结转移、临床分期为I+期的宫颈癌组织，提示HIF-1与宫颈癌的分化程度、淋巴结转移和临床分期有关。在宫颈癌肿瘤的发展过程中,肿瘤细胞始终处于缺氧环境，为了存活并适应缺氧环境，HIF-1会不断合成。一方面,HIF-1可以促进VEGF表达,加速血管生成,便于肿瘤细胞增殖;另一方面,HIF-1能提高具有携氧能力的红细胞生成，来使肿瘤细胞周围的区域保持稳定的氧平衡状态。VEGF在促进血管生成方面,是目前发现的能力最强的细胞因子，而血管的生成与宫颈癌的发生和发展密切相关6。本研究中,宫颈癌组VEGF阳性率高于宫颈良性病变组，且VEGF在宫颈癌中的ROC曲线下AUC为0.8 41，提示VEGF与宫颈癌的发生有关，具有诊断价值。VECF通过影响血管的生成和通透性，来促进肿瘤细胞增殖和转移。本研究表明,VEGF在分化程度为中、低分化，有淋巴结转移,临床分期为期的宫颈癌组织中，阳性表达率高于分化程度为高分化、无淋巴结转移、临床分期为I+期的宫颈癌组织,提示VEGF与宫颈癌的分化程度、淋巴结转移和临床分期密切相关。为了进一步分析TVCDS、H I F-1和VECF的诊断价值，绘制各指标单独与联合诊断的ROC曲线。结果显示，三者联合诊断的AUC高于单独诊断，提示TVCDS、H I F-1和VEGF三者联合诊断价值更高。绝大多数宫颈癌肿块边界不清晰生长形态不规则，但也有部分恶性肿瘤早期时形态规则,因此难以和良性肿瘤区分。另外，由于代谢旺盛，恶性肿瘤细胞需要更丰富的血液供应来满足增殖的需求,从而使血流异常，而良性肿瘤中乳头状瘤同样会出现血流异常的现象,TVCDS容易出现误诊。HIF-1和VEGF具有协同作用,HIF-1可以刺激VEGF表达，而VEGF可以促进血管生成来为肿瘤细胞的增殖提供环境，肿瘤细胞的大量增殖会促进HIF-1的合成。因此,TVCDS、H IF-1和VEGF三者联合诊断比单一指标更具有诊断价值。综上所述,HIF-1和VEGF表达水平在宫颈实验与检验医学2 0 2 3年8 月第41卷第4期Experimental and LaboratoryMedicine，A u g.2 0 2 3,Vo l.41,No.4癌组织中更高,TVCDS、H I F-1和VEGF三者联合诊断有助于宫颈癌的早期诊断,HIF-1和VEG的表达水平与分化程度、临床分期和淋巴结转移有关，可以用于宫颈癌的病情评估。参考文献1彭芳，陈艳宇，王贵明，等.linc00152通过调控DNMT3A和DN-MT3B促进人宫颈癌细胞生长与侵袭 J中南医学科学杂志，2019,47(4):358362.2Yang G,Fried K O.Most Thyroid Cancers Detected by SonographyLack Intranodular Vascularity on Color Doppler Imaging:Reviewof the Literature and Sonographic-Pathologic Correlations for 698Thyroid NeoplasmsJ.J Ultrasound Med,2017,36(1):89-94.3JXi H,Gao Y H,Han D Y,et al.Hypoxia inducible factor-1 sup-presses Peroxiredoxin 3 expression to promote proliferation ofCCRCC cellsJ.Febs 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