脑膜炎奈瑟氏菌危害性评估报告.doc

脑膜炎双球菌危害性评估报告
1危害程度分类　　
1.1分类等级
根据《中华人民共和国传染病防治法》，由脑膜炎双球菌引起的流行性脑脊髓膜炎属于乙类传染病。在卫生部2006年公布的《人间传染病的病原微生物名录》中将脑膜炎双球菌列为危害程度第三类病原微生物。运输包装菌株或活菌培养物为B类，UN编号为UN3373。
1.2不同实验室操作生物安全实验室级别要求
根据《人间传染病的病原微生物名录》要求：脑膜炎双球菌培养属于大量活菌操作，应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL－2）要求实验室中进行。样本检测应在BSL－2实验室中进行。
2背景资料
2.1一般生物学特性
脑膜炎双球菌属奈瑟氏菌属，革兰氏阴性双球菌、直径约0.6～0.8μm，无芽胞、无鞭毛、新分离菌株多有荚膜和菌毛。培养特性：营养要求高，需在含有血液、血清等培养基中才能生长，最适温度37℃、最适PH7.4～7.6，专性需氧，5%CO2可促进生长。
2.2抵抗力
脑膜炎双球菌对外界环境和理化因素抵抗力弱。对青霉素、链霉素、磺胺药物等均敏感。
2.3致病因素及致病机制
2.3.1致病因素：脑膜炎双球菌主要致病物质是荚膜、菌毛和内毒素。
2.3.2致病机制：荚膜有抗吞噬和保护菌体免受体液中杀菌物质的损伤，利于细菌在体内的存活和繁殖。菌毛与鼻咽部粘膜上皮细胞表面的菌毛特异性受体结合，使其粘附于呼吸道粘膜上皮细胞表面，得于细菌的粘附和侵入，并操作粘膜上皮细胞。内毒素可引起发热、小血管及毛细血管内皮细胞损伤、局部血管栓塞及出血，出现出血性皮疹或瘀斑。可重时可导致中毒性休克及DIC。
2.4传播途径和感染的后果
2.4.1传播途径：呼吸道传播。
2.4.2感染的后果：感染后大多数表现为鼻咽部带菌状态，少数成为流脑患者，主要临床表现为突发性高热，头痛、呕吐、皮肤和粘膜出血点或瘀斑及颈项强直等脑膜刺激症状。
2.5流脑的预防、诊断、治疗
2.5.1预防：注射A群脑膜炎双球菌多糖菌苗可有效预防流脑；目前已有A＋C脑膜炎双球菌多糖菌苗。实验室人员应在实验活动前注射流脑疫苗，待产生抗体后，进行相关实验活动。
2.5.2诊断标准：
1）、临床表现：突发性高热，头痛、呕吐、皮肤和粘膜出血点或瘀斑及颈项强直等脑膜刺激症状。
2）、实验室诊断：①病人脑脊液或急性期血液分离到脑膜炎双球菌；②从病人脑脊液或急性期血清或尿中检测到脑膜炎双球菌群特异性多糖抗原；③检测病人恢复期血清抗体效价较急性期呈4倍或4倍以上升高；④以PCR检测到病人急性期血清或脑脊液中脑膜炎双球菌的DNA特异片段。
临床表现加实验室诊断中的任一项就可以确诊流脑。
2.5.3治疗：根据临床对症治疗。
3拟从事实验室活动的危险性分析及相应的预防措施
3.1标本的采集及运送
3.1.1可能危害：样品采集：鼻咽拭采样，有可能患者打喷嚏或咳嗽而将唾液喷到工作人员面部；脑脊液和血液采样时，有可能发生针刺伤工作人员；样本运送过程中，有可能发生溢漏和溅出，污染操作人员的手或样品运送箱。
3.1.2预防和处理措施：
3.1.2.1预防措施
1）、在样品采集过程中要有相适应的生物安全防护水平所需要的个人防护用品（隔离衣、帽、口罩、鞋套、手套、防护眼镜），防护材料、器材和防护措施。
2）、具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员。
3）、具有有效防止病原微生物扩散和感染的措施。
4）、样品运送中按B类感染性物质包装要求。
3.1.2.2处理措施
一旦发生样本溢漏和溅出应立即用浸有0.5%的含氯消毒剂多重软布擦拭标本容器和污染到的表面。样本管的外层包装如能高压的可以进行高压灭菌处理，不能高压的材料应用0.5%的含氯消毒剂浸泡30分钟后处理。
3.2脑膜炎双球菌的培养及鉴定
3.2.1可能危害
在脑膜炎双球菌培养和鉴定过程中，试管开封、培养物刮取、革兰氏染色涂片时均易产生气溶胶；培养物制剂溅出造成的严重污染；可能发生培养瓶或平皿的破损导致培养物泄漏，造成污染；对实验材料或废物的处理也可能导致污染；
3.2.2预防处理措施
3.2.2.1预防措施
1）、脑膜炎双球菌的从样品开启、培养、鉴定等一系列操作必须在BSL－2实验室内生物安全柜内进行；
2）、操作者在实验全过程中应按相应的生物安全防护要求，确保穿戴好一切防护用品。操作全过程应严格执行实验室的标准操作规程（SOP）。
3）、在实验室内尽可能减少玻璃器皿的应用。玻璃器材有任何的破损和裂痕都不能使用。
3.2.2.2处理措施
1）、菌液污染手部，立即浸于0.5%次氯酸钠，经5～10分钟再用肥皂水及水冲洗干净。
2）、菌液流洒桌面、地面或其他表面，用布或纸巾覆盖并吸收。向纸巾上倾倒消毒剂（0.5%次氯酸钠或0.1%的过氧乙酸），并立即覆盖周围区域，用消毒剂从外向内进行消毒处理，
作用30分钟后，将所处理物质清理掉。如果含有碎玻璃或其他锐器，则要使用簸箕或硬的纸板来收集处理过的物品，并将它们置于可防刺透的容器中以待处理。
3）、生物安全柜内菌（毒）液的洒溢如果少量的按上述办法消毒后可继续工作。
如果在洒溢量比较大，应立即停止工作，在风机工作状态下，按上述办法进行台面消毒，然后将柜内全部物品移出，打开在、台面钢板，往下层槽中加入消毒液使整个收集槽被消毒液覆盖，30分钟后打开收集槽下面的放水阀门，将消毒液缓慢放出收集到一容器中，擦拭干净后再用清水擦洗干净，盖好台面钢板。再进行紫外线照射消毒。
4工作人员素质
脑膜炎双球菌实验室共有技术人员2名，申请进入BSL－2级实验室2名。两名技术人员均为中专毕业，一名为检验专业，一名为公共卫生专业。两名技术人员均未从事过脑膜炎双球菌检验工作。所有人员均参加过生物安全培训，其中省级1名，两人次，本单位培训两名1人次。所有技术人员均学习过生物安全手册并签署知情同意书，经体检健康状态良好。工作人员素质评价表见附表。
5评估结论
5.1各种实验活动的防护措施
1）、在样品采集和运送过程中，可能发生空气污染等。因此在样品采集时必须按要求穿好个人防护用品（隔离衣、帽、口罩、鞋套、手套、防护眼镜）。样品运送包装要按B类包装（两层包装，主容器必须密封，辅助包装必须防泄漏）。
2）、所有标本都应按潜在感染性标本进行处理，所有操作都要在生物安全二级实验室内进行，个人防护措施要按生物安全二级实验室防护级别进行个人防护。
实验完毕后能高压的废弃物在实验室内121℃高压处理20分钟，不能高压的物品用含有10%有效氯的次氯酸钠溶液进行浸泡消毒30分钟以上。运送至焚烧炉。
5.2感染控制和医疗监测
5.2.1禁忌人群：从事脑膜炎双球菌检测的实验室工作人员必须在身体状况良好的情况下才能进入BSL－2实验工作。出现下列情况不能进入：由于多种原因所致抵抗力下降、腹泻、孕妇及哺乳期妇女、或其他原因造成的处于疲劳状态者。
5.2.2感染控制：从事脑膜炎双球菌检测的实验室工作人员在上岗之前必须进行相应的体检，在工作中一旦怀疑感染了流脑，应立即到指定医院进行确诊并接受相应的支持和对症治疗。而且，根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》的有关规定，在两小时之内报告单位领导及卫生局主管部门。

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