高考生物二轮复习-专题八-生物技术实践.ppt
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1、专题八生物技术实践专题八生物技术实践1.核心要点突破一、微生物的培养与应用一、微生物的培养与应用1微生物的实验室培养微生物的实验室培养(1)培养基培养基概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。殖的营养基质。分类和应用分类和应用2.制备:计算制备:计算称量称量溶化溶化灭菌灭菌倒平板。倒平板。3.(2)无菌技术无菌技术主要是为了防止外来杂菌的入侵,重点是消毒和灭菌。主要是为了防止外来杂菌的入侵,重点是消毒和灭菌。消毒和灭菌的区别消毒和灭菌的区别使用方法使用方法结果结果常用的方法举例常用的方法举例消毒消毒较为温
2、和的物理或较为温和的物理或化学方法化学方法仅杀死物体表面或仅杀死物体表面或内部一部分对人体内部一部分对人体有害的微生物有害的微生物(不包不包括芽孢和孢子括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、化学药剂消毒法消毒法灭菌灭菌强烈的理化因素强烈的理化因素杀死物体内外所有杀死物体内外所有的微生物,包括芽的微生物,包括芽孢和孢子孢和孢子灼烧灭菌、干热灭灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌菌、高压蒸汽灭菌4.三种常用灭菌方法的比较三种常用灭菌方法的比较灭菌灭菌方法方法适用材料或用具适用材料或用具灭菌条件灭菌条件灭菌时间灭菌时间灼烧灼烧灭菌灭菌接种环、接种针接种环、接种针或其他金属
3、工具或其他金属工具酒精灯火焰的充酒精灯火焰的充分燃烧层分燃烧层直至烧红直至烧红干热干热灭菌灭菌玻璃器皿玻璃器皿(吸管、吸管、培养皿培养皿)和金属和金属用具等用具等干热灭菌箱内,干热灭菌箱内,160 170 1 h2 h高压蒸高压蒸汽灭菌汽灭菌培养基等培养基等100 kPa,121 15 min30 min5.(3)微生物的纯化培养微生物的纯化培养包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段,纯化微生物时常用包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段,纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法和稀释涂布平板法的比较平板划线法和稀释涂布平板法的比较
4、6.7.2.微生物的分离和计数微生物的分离和计数(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数筛选菌株:利用选择培养基筛选菌株。筛选菌株:利用选择培养基筛选菌株。测定微生物数量的常用方法:测定微生物数量的常用方法:统计菌落数目和显微镜直接计数。统计菌落数目和显微镜直接计数。过程:土壤取样过程:土壤取样样品的稀释样品的稀释微生物的培养与观察。微生物的培养与观察。(2)分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离实验原理实验原理即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。流程:土壤取样流程:土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度
5、稀释涂布平板涂布平板挑选菌落。挑选菌落。8.二、传统发酵技术的应用1果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较9.2.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程比较及亚硝酸盐含量的检测10.三、植物有效成分的提取三、植物有效成分的提取1植物芳香油三种提取方法的比较植物芳香油三种提取方法的比较提取方法提取方法实验原理实验原理方法步骤方法步骤适用范围适用范围水蒸气蒸水蒸气蒸馏馏利用水蒸气将挥发利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香性较强的植物芳香油携带出来油携带出来水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏分离油层分离油层除水除水过滤过滤适用于提取玫瑰适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥油、薄荷油等挥发性强的芳香油发性强的芳香油压榨法
6、压榨法通过机械加压,压通过机械加压,压榨出果皮中的芳香榨出果皮中的芳香油油石灰水浸泡、石灰水浸泡、漂洗漂洗压榨、过压榨、过滤、静置滤、静置再次再次过滤过滤适用于柑橘、柠适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料檬等易焦糊原料中芳香油的提取中芳香油的提取有机溶剂有机溶剂萃取萃取使芳香油溶解在有使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发溶机溶剂中,蒸发溶剂后就可获得芳香剂后就可获得芳香油油粉碎、干燥粉碎、干燥萃取、过滤萃取、过滤浓浓缩缩适用范围广,要适用范围广,要求原料的颗粒要求原料的颗粒要尽可能细小,能尽可能细小,能充分溶解在有机充分溶解在有机溶剂中溶剂中11.2.实验流程设计实验流程设计(1)玫瑰精油的提取实验流程玫瑰
7、精油的提取实验流程(2)橘皮精油的提取实验流程橘皮精油的提取实验流程石灰水浸泡橘皮石灰水浸泡橘皮漂洗漂洗压榨压榨过滤过滤静置静置再次过滤再次过滤橘皮油。橘皮油。(3)提取胡萝卜素的实验流程提取胡萝卜素的实验流程胡萝卜胡萝卜粉碎粉碎干燥干燥萃取萃取过滤过滤浓缩浓缩胡萝卜素。胡萝卜素。12.四、植物的组织培养技术四、植物的组织培养技术1原理:细胞的全能性原理:细胞的全能性(1)植物体内已分化的细胞,在离体状态和一定的条件下,可植物体内已分化的细胞,在离体状态和一定的条件下,可以发育成完整的植株,其过程如下:以发育成完整的植株,其过程如下:(2)影响植物组织培养的因素影响植物组织培养的因素内因:植物
8、的种类,同一种植物材料的年龄、保存时间的长短、部位内因:植物的种类,同一种植物材料的年龄、保存时间的长短、部位等。等。外因:外因:MS培养基中的营养物质和培养基中的营养物质和PH、温度、光照等环境条件。、温度、光照等环境条件。植物激素:生长素用量植物激素:生长素用量/细胞分裂素用量影响细胞分裂、分化,该比值细胞分裂素用量影响细胞分裂、分化,该比值较高时,有利于根的分化、抑制芽的形成;该比值较低时,有利于芽的较高时,有利于根的分化、抑制芽的形成;该比值较低时,有利于芽的分化、抑制根的形成;该比值适中时,促进愈伤组织的形成。分化、抑制根的形成;该比值适中时,促进愈伤组织的形成。13.2植物茎的组织
9、培养与花药植株的产生的比较植物茎的组织培养与花药植株的产生的比较14.3.植物组织培养技术、微生物培养技术和无土栽培技术的比较植物组织培养技术、微生物培养技术和无土栽培技术的比较植物组织培养植物组织培养微生物培养微生物培养无土栽培无土栽培含义含义在无菌条件下,将离在无菌条件下,将离体的植物体器官或组体的植物体器官或组织接种在适当的培养织接种在适当的培养基上进行培养,最终基上进行培养,最终发育成完整植物体发育成完整植物体在无菌条件下,在在无菌条件下,在适宜的营养和环境适宜的营养和环境条件下对微生物的条件下对微生物的培养培养将植物生长发育过将植物生长发育过程中所需各种矿质程中所需各种矿质元素按一定
10、比例配元素按一定比例配成营养液,并利用成营养液,并利用这种营养液栽培植这种营养液栽培植物物培养培养基成基成分分水、矿质元素、蔗糖、水、矿质元素、蔗糖、维生素、有机添加物维生素、有机添加物和植物激素等和植物激素等水、无机盐、碳源、水、无机盐、碳源、氮源等氮源等水、必需矿质元素水、必需矿质元素特殊特殊操操严格控制无菌操作,严格控制无菌操作,在培养过程中要更换在培养过程中要更换培养基,调节细胞分培养基,调节细胞分裂素和生长素的比例裂素和生长素的比例严格控制无菌操作,严格控制无菌操作,整个培养过程无需整个培养过程无需更换培养基更换培养基适宜的环境条件,适宜的环境条件,基质垫底并固定幼基质垫底并固定幼苗
11、,不需要保证无苗,不需要保证无菌条件菌条件作要作要求求三种技术中均需要一定的营养物质,但营养物质的划分标准不同。三种技术中均需要一定的营养物质,但营养物质的划分标准不同。15.五、酶的研究与应用五、酶的研究与应用1果胶酶在果汁生产中的作用果胶酶在果汁生产中的作用(1)果胶酶的作用:分解细胞壁及胞间层的主要成分果胶酶的作用:分解细胞壁及胞间层的主要成分果胶,使其变成可果胶,使其变成可溶性的半乳糖醛酸,易于榨取果汁。溶性的半乳糖醛酸,易于榨取果汁。(2)酶的活性与影响酶活性的因素酶的活性与影响酶活性的因素酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力。酶反应速度用单位时间内、酶的活性是指酶催化一定化学反应的
12、能力。酶反应速度用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量表示。单位体积中反应物的减少量或产物的增加量表示。影响酶活性的因素有温度、影响酶活性的因素有温度、pH和酶的抑制剂等。和酶的抑制剂等。2探讨加酶洗衣粉的洗涤效果探讨加酶洗衣粉的洗涤效果(1)加酶洗衣粉中含有的常用酶制剂:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶加酶洗衣粉中含有的常用酶制剂:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶等。等。(2)实验过程要遵循单一变量原则和对照原则,严格控制无关变量。同时还实验过程要遵循单一变量原则和对照原则,严格控制无关变量。同时还要考虑到酶的专一性和洗涤成本等问题。要考虑到酶的专一性和洗涤成本等问题。16.3
13、多聚酶链式反应扩增多聚酶链式反应扩增DNA片段片段细胞内细胞内DNA复制与体外复制与体外DNA扩增扩增(PCR技术技术)比较比较17.4.血红蛋白的提取和分离血红蛋白的提取和分离(1)实验原理:依据蛋白质的各种特性可以将不同种类的蛋白质分离。实验原理:依据蛋白质的各种特性可以将不同种类的蛋白质分离。(2)常用方法常用方法凝胶色谱法:根据相对分子质量的大小分离蛋白质。凝胶色谱法:根据相对分子质量的大小分离蛋白质。电泳:利用待分离样品中各种分子带电性质的差异及分子本身大小、电泳:利用待分离样品中各种分子带电性质的差异及分子本身大小、形状的不同产生不同的迁移速度,由此将各种分子分离。形状的不同产生不
14、同的迁移速度,由此将各种分子分离。(3)蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。度鉴定。5酵母细胞的固定化酵母细胞的固定化(1)固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。在一定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。(2)配制海藻酸钠溶液时要用酒精灯加热,加热时要用小火间断加热,配制海藻酸钠溶液时要用酒精灯加热,加热时要用小火间断加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止。反复几
15、次,直到海藻酸钠溶化为止。18.(3)固定化酶和固定化细胞技术的比较固定化酶和固定化细胞技术的比较19.六、六、DNA和蛋白质技术和蛋白质技术1DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定(1)基本原理基本原理DNA在不同浓度的在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在溶液中的溶解度不同,在0.14 mol/L的的NaCl溶液溶液中的溶解度最低。中的溶解度最低。DNA不溶于酒精溶液。不溶于酒精溶液。DNA不被蛋白酶水解。不被蛋白酶水解。DNA可被二苯胺染成蓝色。可被二苯胺染成蓝色。(2)主要步骤:选取材料主要步骤:选取材料破碎细胞,获取含破碎细胞,获取含DNA的滤液的滤液去除滤液中的去除滤液中的杂质杂质
16、DNA的析出与鉴定。的析出与鉴定。(3)注意事项注意事项选择动物细胞时,细胞比较容易破碎,选择植物细胞时则要先溶解细选择动物细胞时,细胞比较容易破碎,选择植物细胞时则要先溶解细胞膜胞膜(如加洗涤剂、研磨等如加洗涤剂、研磨等)。以哺乳动物红细胞为材料时,需向血液中加入柠檬酸钠抗凝。以哺乳动物红细胞为材料时,需向血液中加入柠檬酸钠抗凝。二苯胺需现配现用。二苯胺需现配现用。20.热点考向探究果酒制作的原理及过程(2010年高考北京理综年高考北京理综)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时,正确的操作是在家庭中用鲜葡萄制作果酒时,正确的操作是()A让发酵装置接受光照让发酵装置接受光照B给发酵装置适时排气给发酵装置
17、适时排气C向发酵装置通入空气向发酵装置通入空气D将发酵装置放在将发酵装置放在45 处处【解析】果酒的制作原理是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精与二氧化碳。【解析】果酒的制作原理是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精与二氧化碳。要想得到酒精,不能向发酵装置内通入空气。酵母菌是异养型生物,不能要想得到酒精,不能向发酵装置内通入空气。酵母菌是异养型生物,不能直接利用光能。适宜的温度是酵母菌生长和繁殖的重要条件,温度为直接利用光能。适宜的温度是酵母菌生长和繁殖的重要条件,温度为20 左右时,最适合酵母菌生长、繁殖。制作果酒过程中给发酵装置适时排气左右时,最适合酵母菌生长、繁殖。制作果酒过程中给发酵装置适时排气是为了放
18、出产生的二氧化碳,维持装置内气压的平衡。是为了放出产生的二氧化碳,维持装置内气压的平衡。【答案】【答案】B21.细胞的固定化技术(2010年高考江苏卷年高考江苏卷改编改编)下图下图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作,表示制备固定化酵母细胞的有关操作,图图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图,下列叙述不正确的是是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图,下列叙述不正确的是()A刚溶化的海藻酸钠应迅速与活刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液化的酵母菌混合制备混合液B图图1中中X溶液为溶液为CaCl2溶液,其溶液,其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C图图2发酵过
19、程中搅拌的目的是发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触为了使培养液与酵母菌充分接触D图图1中制备的凝胶珠用蒸馏水中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图洗涤后再转移到图2装置中装置中图图1图图222.【解析】在酵母细胞的固定化过程中,刚溶化好的海藻酸钠【解析】在酵母细胞的固定化过程中,刚溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温才能加入已活化的酵母细胞,否则会影响酵溶液要冷却至室温才能加入已活化的酵母细胞,否则会影响酵母细胞的活性,母细胞的活性,A项错;将海藻酸钠慢慢滴加到配制好的项错;将海藻酸钠慢慢滴加到配制好的CaCl2溶液中,液滴在溶液中,液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠,溶液中形成凝胶
20、珠,B项正确;在发项正确;在发酵过程中,搅拌的目的是使培养液与酵母细胞更充分地接触,酵过程中,搅拌的目的是使培养液与酵母细胞更充分地接触,C项正确;将固定好的酵母细胞用蒸馏水冲洗项正确;将固定好的酵母细胞用蒸馏水冲洗23次后,再将次后,再将葡萄糖溶液转入锥形瓶,加入固定好的酵母细胞,置于适宜条葡萄糖溶液转入锥形瓶,加入固定好的酵母细胞,置于适宜条件下发酵,件下发酵,D项正确。项正确。【答案】【答案】A23.微生物培养的基本操作(2009年高考宁夏卷年高考宁夏卷)(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌
21、具有体积小、和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点,因此常作为等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行进行_(填填“消毒消毒”或或“灭菌灭菌”);操作者的双手需要进行清洗和;操作者的双手需要进行清洗和_(填填“消毒消毒”或或“灭菌灭菌”);静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能因是紫外线能使蛋白质变性,还能_。(3)
22、若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的_。(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的细菌进行初步的_。(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是培养基应采用的检测方法是_。(6)若用大肠杆菌进行实验,
23、使用过的培养基及其培养物必须经过若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。24.【解析】本题考查微生物培养的无菌操作、活菌计数等技术。【解析】本题考查微生物培养的无菌操作、活菌计数等技术。(1)大肠杆菌是常用的实验材料,其培养过程需要适宜的温度、大肠杆菌是常用的实验材料,其培养过程需要适宜的温度、酸碱度等条件。酸碱度等条件。(2)微生物的无菌培养是最关键的环节,需针对不同的操作涉及微生物的无菌培养是最关键的环节,需针对不同的操作涉及对象采用不同的消毒、灭菌措施。对象采用不同的消毒、灭菌措施。(3)待测样品的稀
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