天然药物化学显色反应总结.doc

反应类型
反应试剂
反应特点
鉴别特点
Feigl反应
碳酸钠、甲醛、邻二硝基苯
紫色
苯、萘、菲、蒽醌全有效
无色亚甲蓝
无色亚甲蓝溶液
蓝色
苯、萘醌
Bornträge反应
碱液
红、紫红
主要对羟基蒽醌类
Kesting– Craven反应
活性亚甲基试剂
（乙酰乙酸酯）
蓝绿、蓝紫
苯、萘醌 醌环上有未被取代位置
与金属离子
醋酸镁（铅）
橙黄、橙红、紫红、蓝色
蒽醌（ａ-酚羟基、邻二酚羟基）
对亚硝基二甲基苯胺
对亚硝基-二甲基苯胺
紫、绿、蓝、灰色
蒽酮
醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义
香豆素显色反应的鉴别特点和意义
反应类型
反应试剂
反应特点
针对结构
鉴别意义
异羟肟酸铁反应
盐酸羟胺、Fe+
红色络合物
内酯结构
内酯环有无
三氯化铁反应
Fe+ Cl3溶液
蓝绿色
酚羟基
酚羟基有无
Gibb’s 反应
2，6-二氯苯醌氯亚胺（OH—）
蓝色
酚羟基对位无取代
6-有无取代
判断香豆素的C－6位是否有取代基的存在，可先水解，使其内酯环打开生成一个新的酚羟基，然后再用Gibbs或Emerson反应加以鉴别，如为阳性反应表示C-6位无取代。
木脂素没有特征性的理化检识方法，常用的检识方法主要是针对木脂素结构中的功能基如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等而进行的检识。
1．三氯化铁反应——检查酚羟基
2．Labat反应（没食子酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝绿色）
3．Ecgrine反应（变色酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝紫色）
表6-3 黄酮类化合物的还原显色反应
反应类型
鉴别特征
鉴别意义
备注
盐酸-镁粉反应
黄酮、二氢黄酮
橙红~紫红
黄酮类特征性鉴别反应
假阳性（花色素）
黄酮醇、二氢黄酮醇
橙红~紫红
四氢硼钠
针对二氢黄酮、二氢黄酮醇
红~紫红
二氢黄酮类特有

铝盐

黄色络合物
定性定量分析

铅盐

黄、红色沉淀
碱式醋酸铅

锆盐
3-或5-羟基存在时
黄色锆络合物

镁盐
二氢黄酮、二氢黄酮醇
天蓝色荧光
二氢黄酮鉴别

氯化锶
邻二酚羟基
棕黑色沉淀
邻二酚羟基

三氯化铁
酚羟基

酚羟基有无

硼酸显色反应
5-羟基黄酮及2-羟基查耳酮类
亮黄色荧光

碱剂显色反应
见下文

锆盐：在实际应用时，通常同时使用二氯氧锆和枸橼酸，以判断黄酮类化合物3-OH、5-OH的存在。若有3-OH和（或）5-OH，加二氯氧锆显黄色。若只有5-OH，加枸橼酸后黄色减褪，若有3-OH，则加枸橼酸后黄色不变，因此可用于区分黄酮和黄酮醇。用于鉴别3-OH的存在。
醋酸铅只能与分子中具有邻二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-酮基结构的化合物反应生成沉淀。而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多，一般酚类化合物均可与其发生沉淀反应。
碱性试剂显色反应
①二氢黄酮易在碱液中开环，转变成相应的异构体查耳酮，显橙色至黄色。
②黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色。
③分子结构中有邻二酚羟基或3，4’-二羟基取代时，在碱液中不稳定，易被氧化，产生沉淀。

强心苷主要显色反应
1）、甾体母核的显色反应
反应名称
试 剂
现 象
Liebermann-Burchard
醋酐-浓硫酸反应
浓硫酸-醋酐（1：20）
黄、红、蓝、紫等颜色变化，最后退色
Salkowski反应
氯仿-浓硫酸
硫酸层显红色或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现
Tschugaeff反应
冰醋酸、乙酰氯、氯化锌
淡红色、紫红色
Kahlenberg反应
三氯化锑反应
三氯化锑的氯仿饱和液
可用于滤纸显色，干燥后60-70℃加热，显蓝色、灰蓝色、灰紫色等
Rosen-Heimer反应
三氯醋酸-氯胺T反应
25%三氯乙酸乙醇液
洋地黄毒苷元--------黄色荧光 羟基洋地黄毒苷元—亮蓝色 异羟基洋地黄毒苷元—蓝色
作用于五元不饱和内酯环
1． Legal反应
2. Kedde反应
3. Raymond反应
4. Baljet反应
用于甲型与乙型强心苷的鉴别
作用于甾核
1． 醋酐-浓硫酸（L-B）反应
2． Salkowski（氯仿-浓硫酸）反应
3． 三氯醋酸-氯胺T(Rosenheim)反应
4. 三氯化锑（五氯化锑）反应
作用于a-去氧糖
1. Keller-Kiliani（K-K）反应
2. 对二甲氨基苯甲醛反应
3. 占吨氢醇反应
4. 过碘酸-对硝基苯胺反应
用于 I型与 II、III型强心苷的鉴别
图9-3 强心苷的显色反应
按作用部位分：

反应
试剂（共同试剂碱性醇溶液）
颜色反应
考点
Legal反应
吡啶＋亚硝酰铁氰化钠＋氢氧化钠溶液
深红色并逐渐退去
甲型强心苷的特征反应，强心苷类的检识，区别甲型和乙型强心苷。
Raymond反应
50%乙醇＋间二硝基苯＋氢氧化钠溶液
紫红
Kedde反应
醇＋3、5-二硝基苯甲酸＋氢氧化钠溶液。
红色或紫红
Baljet反应
苦味酸＋氢氧化钠醇溶液
橙色或橙红色
2）、C-17位不饱和内酯环的颜色反应
甲型强心苷的特征反应，因为五元不饱和内酯环上的双键位移产生C-22活性亚甲基乙型强心苷为六元不饱和内酯环，故不能反应。

3）、α-去氧糖反应
反应
试剂
颜色变化
考点
Keller-Kiliani（K-K）反应
冰醋酸、浓硫酸和三氯化铁
醋酸层渐呈蓝色
只对游离的α-去氧糖或α-去氧糖与苷元连接的强心苷呈色，存在假阴性。
占吨氢醇反应
冰醋酸、浓盐酸和占吨氢醇。
红色
只要分子中有α-去氧糖即可呈红色，可用于定量分析
对-二甲氨基苯甲醛反应
对-二甲氨基苯甲醛反应
灰红色

过碘酸-对硝基苯胺反应

胆汁酸的鉴别反应
反应
试剂
反应现象
考点
Pettenkofer反应
蔗糖和浓硫酸
两液面分界处出现紫色环
所有的胆汁酸均呈阳性反应
Gregory Pascoe反应
45%硫酸和0.3%糠醛65℃加热
紫色
定量检测胆酸
Hammarsten反应
20%铬酸溶液
胆酸显紫色，鹅去氧胆酸不显色
鉴别胆酸和鹅去氧胆酸
改良Hammarsten反应
20%铬酸浓盐酸液
溶液浑浊并变黄色，放置后变紫色
去氧胆酸和鹅去氧胆酸无变化。
皂苷的显色反应
试剂类型
鉴别特点
鉴别意义
Liebermann反应
颜色变化呈黄-红-蓝-紫-绿最后退色

醋酐-浓硫酸反应
Liebermann-Burchard
三萜皂苷 显红或紫色
甾体皂苷 显蓝绿色
用于两类皂苷的区别
三氯乙酸反应
甾体皂苷 加热60℃显色红—紫
三萜皂苷 100 ℃ 显色 红—紫
用于两类皂苷的区别
氯仿浓硫酸反应
硫酸层--红、蓝色，氯仿层-绿色荧

五氯化锑反应
（60~70加热）蓝、灰蓝、灰紫色
可在滤纸上进行
茴香醛-硫酸
甾体皂苷显色剂
可用于两类皂苷区别
分离含有羰基的甾体皂苷元，常用季铵盐型氨基乙酰肼类试剂，如吉拉尔T（Girard T）或吉拉尔P（Girard P）两种试剂。借此与不含羰基的皂苷元分离。
氨基酸的显色反应
试剂
反应现象
考点
茚三酮反应
一般显紫色，个别显黄色
氨气也有反应，应避免氨气的干扰
蛋白质的显色反应
反应
反应现象
试剂
考点
双缩脲反应
紫或紫红色
溶于碱水中，少量硫酸铜液
两个以上的肽键显阳性
表10-3 生物碱沉淀反应类型及特点
反应类型
反应试剂
反应特点
沉淀反应
碘化铋钾
橘红色至黄色无定形沉淀
沉淀反应
碘化汞钾
类白色沉淀
沉淀反应
碘—碘化钾
红棕色沉淀
沉淀反应
硅钨酸试剂
淡黄或灰白色沉淀
沉淀反应
饱和苦味酸试剂
2-4-6三硝基苯酚----黄色沉淀或结晶
沉淀反应
雷氏铵盐（硫氰酸铬胺）
红色沉淀或结晶
显色反应
Mac试剂（甲醛）
吗啡显紫红色
显色反应
草酚蓝、草酚绿

假阳性：蛋白质、多肽、氨基酸、鞣质等可引起假阳性。
假阴性：麻黄碱、咖啡碱、吗啡与多数生物碱沉淀试剂不能发生沉淀反应。
表3-2 苷的显色反应
反应类型
反应试剂
显色
意义
Molish反应
浓硫酸和5%α-萘酚
紫色环
检识各种存在形式的糖和苷，鉴别苷元和苷。
菲林反应
Cu(OH)2
砖红色沉淀
只检识还原糖，非还原糖和苷呈阴性。
多伦反应
新制银氨溶液
银镜